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显微镜对于不透明物体的照明和暗视场照明方法

对于不透明物体，采用从侧面或者从上方照明的方法。此时，标本是靠散射光或反射光成像的。侧面照明是把光源放在标本的斜上方，有的显微镜用物镜四周的小灯泡形成斜照明，上方照明方式使物镜兼作聚光镜

暗视场照明方法：暗视场照明适用于离散分布的颗粒标本的观测。在某种程度上，暗视场照明可以提高显微镜的分辨率。暗视场照明的原理是不让透过标本的光直接进入物镜，只让由颗粒散射的光线进入物镜。这样，使物镜形成的像面是一个暗背景上分布着亮颗粒的景象。由于衬度（对比）好，有利于颗粒的分辨。暗视场照明分为单向暗视场照明和双向暗视场照明。分为单向暗视场照明和双向暗视场照明。 共聚焦显微镜观察激发光与发射光。PSM-1000显微镜推荐厂家

共聚焦主要的观察对象是荧光。通俗来讲，是指用波长短的光照射某物质，该物质被照射时，由于光激发原理，能发射出比照射光波长较长的光，后者即为荧光。我们观察的荧光物质主要为荧光蛋白或荧光染料，可能样本本身也会有一些自发荧光。具体到共聚焦显微镜上，就是用不同的激光器去激发样本中的荧光染料，使之发射不同的荧光，就可以得到多色荧光图像了。不管是荧光染料还是荧光蛋白，或是其它荧光材料，都有其荧光特性，主要指激发光(Ex)-Excitation与发射光(Em)-Emission。我们常说的488，543，633就是指相关荧光材料的激发光，但要注意，无论激发光还是发射光，都不是一个数值，而是一段波谱，只是为了日常使用方便才使用488nm这样的波谱峰值(Ex-Max)。显微镜品牌排行同一个物镜不切换，得到两个不同视野的成像。

透射电镜的工作过程与光学显微镜类似。在光学显微镜中聚焦后的可见光射向样品，穿过样品的光经过物镜、目镜等光学系统聚焦后被眼睛接收。在电子显微镜中，可见光由电子枪发射出来的电子束所代替,在阳极加速电压的作用下，电子经过2、3个电磁透镜会聚为电子束，用来照明样品薄片 (电子的穿透能力很弱，因此样品必须很薄)，穿过样品薄片的电子携带了样品本身的结构信息，经物镜、中间镜和投影镜所组成的成像系统的接力聚焦放大以图像或衍射谱的形式显示于荧光屏或感光材料上。

共聚焦显微镜扫描时用的是激光光源，激光的穿透力强，可对样本进行一定深度的光学断层，从而获得高标准的连续光学切片，由此做Z轴光学切片后重组出3D效果就能立体地展示样品里荧光的空间分布。配有高精度电动载物台和图像拼接软件，能完美解决放大倍数和整体成像这一问题。可做时间序列拍摄，实时监测荧光变化，可以把荧光变化的过程以动态的形式展示出来。

共聚焦的应用很广，像离体细胞、组织切片、物理材料、模式生物等荧光样本都可以用共聚焦进行拍摄，除了常规的荧光图片拍摄进行定性定位外，还可以进行荧光的半定量分析、共定位分析、荧光漂白恢复（FRAP）、荧光共振能量转换(FRET)等，但也要注意一下，常规405-647nm之间的激发波长都可以支持。 芯片测试观察用显微镜；

透射电子显微镜、扫描电子显微镜、扫描隧道显微镜和原子力显微镜是各个高科技领域经常运用的四种显微镜。英文名分别是Transmission Electron Microscope（TEM），Scanning Electron Mcroscope(SEM)、Scanning Tunneling Microscope（STM）和Atomic Force Microscope(AFM)。从名字中很容易知道四个显微镜的特点，其中TEM和SEM用的是电子来替代光，从而确定观测样品结构，而STM和AFM其实用的都是探针。所以可以认为亚显微级显微镜（这个名字主要是区别开光学显微镜，用来说明其分辨率远高于用可见光观测）可以分为两大类，即电子显微镜类别和探针显微镜类别。扫描隧道显微镜(STM)和原子力显微镜(AFM)是比较常用的两类扫描探针显微镜。motic 显微镜种类

激光扫描共聚焦显微镜的扫描成像技术。PSM-1000显微镜推荐厂家

扫描探针显微镜的特点：

扫描探针显微镜是除了场离子显微镜和高分辨率透射电子显微镜之后的第三种以原子尺度观察物质结构的显微镜。以扫描隧道显微镜(STM)为例，其横向分辨率为0.1~0.2nm，纵向深度分辨率则为0.01nm，这样的分辨率可以清楚地观测到分布在样品表面的单个原子或分子。同时，扫描探针显微镜还可以在空气，其他气体或液体环境下进行观察研究。扫描探针显微镜拥有原子分辨、原子搬运、纳米微加工等特点，但是由于细部各种扫描显微镜的工作原理不同，它们得到的结果所反映的样品表面信息是很不同的。扫描隧道显微镜测量的是样品表面的电子台分布信息，具有原子级别的分辨率但仍得不到样品的真结构。而原子显微镜探测的是原子之间的相互作用信息，因此可以得到样品表面原子分布的排列信息即样品的真实结构。但另一方面，原子力显微镜测不到可以和理论比较的电子态信息，因此二者各有短长。 PSM-1000显微镜推荐厂家

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