金相显微镜答疑解惑

扫描探针显微镜控制器通过扫描器在竖直舛由方向移动样品以使探针和样品之间的距离(或相互作用的物理量)稳定在某一固定值;同时在x-y水平平面移动样品，使探针按照扫描路径扫描样品表面。扫描探针显微镜在稳定探针与样品间距的情况下，检测系统检测探针与样品之间相互作用的相关物理量信号;在稳定相互作用物理量的情况下，则通过竖直方向礴由位移传感器检测探针与样品之问距离。图像系统则根据检测信号(或探针与样品间距)对样品表面进行成像等图像处理。显微镜不同的照明方式，观察成像也不同。金相显微镜答疑解惑

激光扫描共聚焦显微镜的另一个特点是它是一种扫描成像技术，传统的宽场照明技术是将整个样品都照亮，因此可以图像可以直接被肉眼或探测器捕捉，但是LSCM采用一束或多束聚焦光束穿过样品扫描成像，这样得到的图像被称为光学切片。现代共聚焦显微镜的一种实际的工作方式是激光发出的激发光通过二向色镜，通过一对振镜在样品x方向和y方向进行扫描，样品激发（或反射）的光通过针（zhen）孔进入PMT检测器被记录，记录下的扫描图像通过计算机重构出实际的样品图像。70XL显微镜报价体视显微镜的广泛应用；

共聚焦显微镜扫描时用的是激光光源，激光的穿透力强，可对样本进行一定深度的光学断层，从而获得高标准的连续光学切片，由此做Z轴光学切片后重组出3D效果就能立体地展示样品里荧光的空间分布。配有高精度电动载物台和图像拼接软件，能完美解决放大倍数和整体成像这一问题。可做时间序列拍摄，实时监测荧光变化，可以把荧光变化的过程以动态的形式展示出来。

共聚焦的应用很广，像离体细胞、组织切片、物理材料、模式生物等荧光样本都可以用共聚焦进行拍摄，除了常规的荧光图片拍摄进行定性定位外，还可以进行荧光的半定量分析、共定位分析、荧光漂白恢复（FRAP）、荧光共振能量转换(FRET)等，但也要注意一下，常规405-647nm之间的激发波长都可以支持。

显微镜机械系统维护保养：

▪油漆表面的清洁：顽固污迹可以使用软性清洁剂清洁▪塑料表面的清洁：软布蘸水清洁即可。

显微镜光学系统维护保养：

▪不要用手接触光学零件▪擦镜纸是给油镜清洁使用的，干镜清洁请务必使用脱脂棉签▪油镜使用后用干净柔软的专业擦镜纸蘸无水乙醇采用螺旋渐进的方式轻轻擦干净油的物镜；√ 留意擦镜纸的两个面，纹路是不同的：其中一面是粗糙的，另一面更光滑些，要使用更光滑的那一面来清洁。一般不建议用干的擦镜纸直接擦拭，同样可能划伤镜头。▪如果有较顽固污迹或灰尘，先用洗耳球吹走较大较硬灰尘，然后用长纤维脱脂棉签或干净细棉布蘸无水乙醇擦拭，这样可以避免较大较硬灰尘颗粒划伤镜头，影响观察效果。▪目镜和物镜的擦试方法√ 准备工作：在长纤维脱脂棉签顶端蘸上无水乙醇√ 目镜：从中间部分开始，采用螺旋渐进的方式轻轻逐步擦到边缘。√ 物镜&聚光镜：用脱脂棉签按同样方法擦试物镜和聚光镜顶透镜。

注意：无需经常将物镜/目镜拆下来清理擦拭，日常使用时需用脱脂棉签及擦镜纸配合无水乙醇擦去油污即可，只有遇到顽固污渍时才应将物镜拆卸清理。擦试镜头时，动作应轻柔，不能过于用力，以避免损坏镀膜层。 体视显微镜和视频显微镜。

共聚焦主要的观察对象是荧光。通俗来讲，是指用波长短的光照射某物质，该物质被照射时，由于光激发原理，能发射出比照射光波长较长的光，后者即为荧光。我们观察的荧光物质主要为荧光蛋白或荧光染料，可能样本本身也会有一些自发荧光。具体到共聚焦显微镜上，就是用不同的激光器去激发样本中的荧光染料，使之发射不同的荧光，就可以得到多色荧光图像了。不管是荧光染料还是荧光蛋白，或是其它荧光材料，都有其荧光特性，主要指激发光(Ex)-Excitation与发射光(Em)-Emission。我们常说的488，543，633就是指相关荧光材料的激发光，但要注意，无论激发光还是发射光，都不是一个数值，而是一段波谱，只是为了日常使用方便才使用488nm这样的波谱峰值(Ex-Max)。显微镜系统维护保养；视频显微镜性价比

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显微镜放置和使用环境的维护：

▪防潮：当空气太潮湿时，光学镜片容易生霉，起雾；机械零件受潮后，容易生锈。平时显微镜室应保证65%以下的湿度，潮湿地区应在室内配置除湿机。

▪控温：为避免热胀冷缩引起镜片开胶与脱落，显微镜室室温建议维持在20-24℃。

▪防尘：光学元件表面落入灰尘，不仅影响光线通过，而且经光学系统放大后，会生成很大的污斑，影响观察。灰尘、砂粒落入机械部分，还会增加磨损，危害同样很大。故显微镜室应该保持干净，显微镜不用时应用防尘罩罩住以防止落灰。

▪防腐蚀：显微镜不能和具有腐蚀性和强挥发性的化学试剂放在一起，如硫酸、盐酸、强碱等。

▪防震：显微镜的光学系统和机械系统都是经过精密校正的，在使用及保管期间要防震，同时也要注意避免阳光直射，避免空调直吹显微镜，以保证它固有的高性能。

▪稳压：显微镜室供电电压波动不应超过正常电压的±10%，电压不稳的地区应加装稳压电源，保护显微镜系统不受损害。 金相显微镜答疑解惑

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