细胞分析仪又叫流式细胞仪,是以流式细胞术为重要技术,集光学、电子学、流体力学、细胞化学、生物学、免疫学以及激光和计算机等多门学科和技术于一体的先进科学技术设备。将待测样品制成单细胞悬液,经特异性荧光染料染色后装入样品管,由系统产生一定气体压力将样品管送入流动室,细胞悬液从样品管射出,样品管周围由鞘液包围。鞘液管与样品管成一定角度使得待测细胞在鞘液的作用下成单行排列,形成细胞柱,通过喷嘴与入射的激光束垂直相交,细胞或颗粒被激光激发产生荧光信号和非荧光散射信号,Z终通过光学系统和检测系统处理后由计算机输出。细胞分析仪是一种高度自动化、快速检测、精确测量和分析细胞的仪器。江苏BioTek酶标仪哪家好
由于各细胞或颗粒的大小、内部结构、理化性质、蛋白质含量、核酸(DNA或RNA)含量等的不同,使得接收到的荧光信号和非荧光散射信号也不同,从而实现对不同性质的细胞或群体进行分析和分类。细胞分选原理:细胞分析仪的分选功能是由细胞分选器来完成的。在分选过程中,细胞分析仪通过高频振荡对液流施加液滴驱动能量,使其断离为均匀的液滴,根据事先确定的分选标准由系统判断是否将被分选,由充电电路对选定的细胞液滴进行充电。当带电液滴通过电场时,会在电场的作用下向左或向右偏转,具体方向取决于液滴的电荷极性,未带电荷的液滴不受电场的影响,它们将在ZX位置通过,Z后进入废液抽吸器,发生偏转的液滴落入相应的收集器中,从而实现细胞分选。江苏细胞外囊泡分离分析系统哪家好细胞分析仪逐一记录细胞的每一个荧光谱,进行单元素分析和多元素分析,具有精确性和可重复性。
流式细胞仪分选是把液滴形成的信号加在压电晶体上使之产生机械振动,流动室即随之振动,使液柱断列成一连串均匀的液滴,一部分液滴中包有细胞,而细胞性质是在进入液滴以前已经被测定了的,如果其特征与被选定要进行分选的细胞特征相符。流式细胞仪在这个被选定的细胞刚形成液滴时给整个液柱充以指定的电荷,使被选定的细胞形成液滴时就带有特定的电荷,而未被选定细胞形成的细胞液滴和不包含细胞的空白液滴不被充电。带有电荷的液滴向下落入偏转板的高压静电场时,按照所带电荷符号向左或向右偏转,落入指定的收集器内,完成分类收集的目的。流式细胞仪对分选出的细胞可以进行培养或其他处理,做更深的研究。
流式细胞仪在临床细菌学中的应用有:流式细胞仪泛用于细菌、病原体、血清抗体及药敏试验。在免疫荧光方法中的流式微球捕获芯片技术是流式细胞仪的一个新应用,它将近似于细胞大小的微珠作为捕获载体,使其携带已知荧光抗原或抗体,来捕获检测物中的相关抗体或抗原。由于遮蔽效应可以使荧光微球的发散光减弱,应用不同大小的荧光微球,可同时检测同一标本的多种抗原或抗体。这种方法能同时检测单一液相样本中多个目的蛋白(如同时测定多种细胞因子、多种自身抗体),检测需用标本量少,灵敏度高,重复性好,直接荧光标记易于使用,检测线性范围宽,避免酶联反应所致的人工假象,可用于单细胞分子水平的多参数检验,也可用于寄生虫、病毒或混合传染的检测。细胞分析仪可以分析细胞物理特性,比如细胞大小、形态等。
流式细胞仪分析细胞时,可以从一个细胞中同时获得多种细胞信息。由于流式细胞仪采用的光源不断改进从开始的单一的激光器或紫外光器,至目前发展为采用2-3个激光器,或再加一个紫外光器。有的采用立体空间激光系统,实现多荧光道分析,Zda程度地减少荧光信号之间的补偿,提高检测的灵敏度,所以,利用空间立体激发的多激光系统可以提高多参数的分析质量。目前的单激光四色分析或双激光四色分析的流式细胞仪,488nm激光器激发出的4种不同荧光光谱之间常有重叠,做4色分析时,难以避免荧光过多重叠而导致的补偿困难。利用该系统对488nm激光产生的3色荧光与635nm激发而产生的第4种荧光分成两种信号,能Zda程度地减少补偿,使4色荧光达到Zwan美的效果。细胞分析仪可以准确识别极度稀有的细胞,如干细胞、白血病细胞等。江苏BioTek酶标仪哪家好
细胞分析仪可以使用多种细胞的样本,如细胞悬浮液、过滤筛、细胞混合物等。江苏BioTek酶标仪哪家好
交叉淋巴细胞、粒细胞毒实验,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片。血小板自身抗体检测,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm滤光片。移植交叉配型,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm滤光片。检测细胞经抗原或细胞有丝分裂刺激后活化效应,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片。检测细胞内因子(TH1/TH2细胞检测),流式细胞仪要求:488nm或633nm(APC染料)光源,525nm、575nm、675nm、767nm滤光片。细胞增殖状态检测,流式细胞仪要求:488nm或633nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片。江苏BioTek酶标仪哪家好
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