流式细胞术为一种生物学技术,计数和分选悬浮于流体中的微小颗粒是它的主要用途。这种技术能够用来连续的多参数的分析流过光学或电子检测器的一个个细胞。流式细胞术(FlowCytoMetry,FCM)是通过检测标记的荧光信号使高速、逐一的定量分析和分选悬液中的单细胞或其他生物粒子得以实现的技术。实验设计原则有哪些呢?将红细胞去除的方法:红细胞裂解法,有着简单的操作,比较快的速度,并且使原始标本的白细胞分布尽可能保持。建议在染色后溶血。若需要在染色前溶血,则应当确保:溶血过程中不能改变抗原性。彻底洗去溶血剂,没有影响到细胞和抗体结合的动力反应。固定剂不包含在所用的溶血剂中,不然会对细胞活性及表面标记结果产生影响。密度梯度离心法,能够比较好的回收靶细胞,并且可能得到富集,同时将红细胞、碎片等去除。细胞分析仪可通过可视化分析,提高实验结果的可信度和有效性。南京Agilent流式细胞仪采购
染色体分析,流式细胞仪要求:360nm或488nm光源,450nm、580nm滤光片。BrdUrd标记追踪细胞分化,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm滤光片。淋巴细胞亚群分析,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm滤光片,液量计数系统。白血病免疫分型,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片。Z少三色荧光,参数越多检测越为灵敏。血小板分析,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片,液量计数系统。白血病、淋巴瘤微小残留病灶检测:①T系白血病微小残留病灶检测,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片,液量计数系统。②B系白血病微小残留病灶检测,液量计数系统,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片。Z少三色荧光,参数越多检测越为灵敏。③髓系白血病微小残留病灶检测,液量计数系统南京Agilent流式细胞仪采购细胞分析仪作为单细胞分析仪,可以更好地帮助科学家了解细胞的多样性和复杂性。
流式细胞仪的维护保养:选择正确的荧光染料,一般原则是:低表达抗原标记高S/N(信噪比)荧光素,高表达抗原标记低S/N(信噪比)荧光素。当样品用2种以上荧光染料时,为消除干扰,需要做荧光补偿。在应用流式细胞仪软件作荧光补偿时,补偿只应用在同一个激光激发的不同荧光素之间,应避免补偿不足和过度补偿。溶液使用前,所用溶液都要进行过滤处理,以免出现沉淀物而堵塞喷嘴。流式细胞仪状态稳定后,要先排除进样针内的气泡以保证喷嘴畅通,之后再对样本进行检测。
减少操作的复杂性,可满足各种分选需求,借助该仪器,研究人员可对品类繁多的生物样本进行研究工作,从微粒体到巨噬细胞,从星型胶质细胞到异种移植体,全都可以进行分析和分选,该仪器还可用于一些非生物学应用,比如琼脂糖凝胶液滴、金纳米粒子或环境颗粒;或者单细胞研究,比如循环疾病细胞、新药研发、稀有分析、干细胞和神经细胞以及微生物生态和生理学等。CyClone(克隆分选):板式分选:预设6-1536孔板,用户自定义孔板类型,分选精细度高可达250dpi。水浴温度控制,可进行加热或制冷(可选)。管式分选:高6路分选。2路分选:1.5,5,15,50mL样品管接收。4路分选:4×5mL,3x5mL+1x50mL样品管接收。6路分选:1.5或5mL样品管接收。细胞分析仪在基因编辑、细胞工程等领域中有着普遍的应用。
流式细胞仪分析细胞时,可以从一个细胞中同时获得多种细胞信息。由于流式细胞仪采用的光源不断改进从开始的单一的激光器或紫外光器,至目前发展为采用2-3个激光器,或再加一个紫外光器。有的采用立体空间激光系统,实现多荧光道分析,Zda程度地减少荧光信号之间的补偿,提高检测的灵敏度,所以,利用空间立体激发的多激光系统可以提高多参数的分析质量。目前的单激光四色分析或双激光四色分析的流式细胞仪,488nm激光器激发出的4种不同荧光光谱之间常有重叠,做4色分析时,难以避免荧光过多重叠而导致的补偿困难。利用该系统对488nm激光产生的3色荧光与635nm激发而产生的第4种荧光分成两种信号,能Zda程度地减少补偿,使4色荧光达到Zwan美的效果。细胞分析仪常常和细胞培养箱、显微镜等其他装置一起使用。南京全息无标记3D显微镜供货报价
细胞分析仪在临床领域也有普遍应用,如肿瘤细胞的检测和分析。南京Agilent流式细胞仪采购
细胞分析仪又叫流式细胞仪,是以流式细胞术为重要技术,集光学、电子学、流体力学、细胞化学、生物学、免疫学以及激光和计算机等多门学科和技术于一体的先进科学技术设备。细胞分析仪主要用作细胞分析和细胞分选。细胞分析原理:将待测样品制成单细胞悬液,经特异性荧光染料染色后装入样品管,由系统产生一定气体压力将样品管送入流动室,细胞悬液从样品管射出,样品管周围由鞘液包围。鞘液管与样品管成一定角度使得待测细胞在鞘液的作用下成单行排列,形成细胞柱,通过喷嘴与入射的激光束垂直相交,细胞或颗粒被激光激发产生荧光信号和非荧光散射信号,Z终通过光学系统和检测系统处理后由计算机输出。南京Agilent流式细胞仪采购
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