编辑|steins来源|岛津分析中心背景摘要:紫外可见分光光度计和荧光分光光度计都经常用于样品定量。使用紫外可见分光光度计进行定量时基于朗伯比尔定律,测定的吸收值一定范围内与样品浓度成正比。另一方面,利用荧光分光光度计时,使用荧光强度。在低浓度时,荧光强度与浓度成正比,所以,可以用于定量。本次使用紫外可见分光光度计和荧光分光光度计两台仪器分别测定了罗丹明B溶液。罗丹明B是用于纤维和皮革的染色的荧光物质。关于测定结果,对两个机种的定量、检测下限值和标准曲线的线性度进行了比较,下面将进行介绍。1紫外1罗丹明B溶液的吸光度测定使用了紫外可见分光光度计UV-260Oi测定样品吸光度。测定条件如表1所示。将粉末状的罗丹明B溶解在蒸馏水中,调配~5ug/ml的标准溶液。罗丹明B的标准溶液的吸光光谱如图1所示,根据544nm的吸光度值创建的标准曲线如图2和图3所示。在图2中,用~5ug/ml的6点和空白样品(蒸馏水)创建,得到了线性度良好的标准曲线(相关系数的平方值是)。在图3所示的低浓度区域中,噪声的影响相对较大,导致线性较差。2荧光2罗丹明B溶液的荧光强度测定使用了荧光分光光度计RF-60O0测定了样品荧光强度。测定条件如表2所示。火焰光度计由光学与电子线路组成测量装置。河北大容量火焰光度计操作
在前面几期《聚创环保小科普》中,小聚从光度计的原理到紫外可见分光光度计的使用说明,再到适用领域给各位看官介绍的明明白白,本期小聚给大家重点介绍一下“为什么光度计分为红外的?紫外的?原子荧光的?超微量的?火焰的?”是不是在选购上很是迷茫呢?不要着急,下面重点给大家介绍。首先:什么是光度计?简单说,光度计是将成分复杂的光,分解成光谱线的科学检测仪器。一、紫外可见分光光度计和红外分光光度计的原理不同:紫外可见分光光度计的原理:物质的吸收光谱本质上是物质中的分子和原子吸收了光中的光波能量,相应地发生了分子振动级跃迁和电子能级跃迁的结果,由于各种物质具有不同的分子原子和分子结构,所以在吸收光能量的情况也各不相同,仪器通过各种物质特有的吸光光谱的曲线,来判定被检测物质的含量,这就是紫外可见分光光度计定性和定量的基础,紫外可见分光光度计就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分,结构。河北大容量火焰光度计操作在使用紫外可见火焰光度计测试过程中可能出现出现数字显示不能归零,同时伴有图线记录基线位置偏高的情况。
5、WFZ800-DA、756型等分光光度计,由于其光电接收装置为光电倍增管,它本身的特点是放大倍数大,因而可以用于检测微弱光电信号,而不能用来检测强光。否则容易产生信号漂移,灵敏度下降。针对其上述特点,在维修、使用此类仪器时应注意不让光电倍增管长时间暴露于光下,因此在预热时,应打开比色皿盖或使用挡光杆,避免长时间照射使其性能漂移而导致工作不稳。6、放大器灵敏度换挡后,必须重新调零。7、比色杯的配套性问题。比色杯必须配套使用,否则将使测试结果失去意义。在进行每次测试前均应进行比较。具体方法如下:分别向被测的两只杯子里注入同样的溶液,把仪器置于某一波长处,石英比色杯;220nm、700nm装蒸馏水,玻璃比色杯:700nm处装蒸馏水,将某一个池的透射比值调至100%,测量其他各池的透射比值,记录其示值之差及通光方向,如透射比之差在,若超出此范围应考虑其对测试结果的影响。典型故障及其排除方法1、仪器不能调零。可能原因:a.光门不能完全关闭。解决方法:修复光门部件,使其完全关闭。b.透过率“100%”旋到底了。解决方法:重新调整“100%”旋钮。c.仪器严重受潮。解决方法:可打开光电管暗盒,用电吹风吹上一会儿使其干燥。
分光光度法始于牛顿(Newton)。早在1665年牛顿作了一介罈人的实验:他让太阳光透过暗室窗上的小圆孔,在室内形成很细的太阳光束,该光束经棱镜色散后,在墙壁上呈现红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫的色带。这色带就称为“光谱”。顿通过这个实验;揭示了太阳光是复合光的事实。紫外可见分光光度计附件发展紫外可见分光光度计多一种附件就多一种功能、多一种适应性。纵观当今世界上的紫外可见分光光度计附件的发展,实在是令人眼花缭乱。这些附件很大程度方便了用户,是广大紫外可见分光光度计使用者所欢迎的,也是紫外可见分光光度计进展的重要内容之一。在测定时,紫外可见火焰光度计受到强电磁场干扰,应去除无线电干扰环境后,再次测量。
试剂盒包含一个空白滤光片、三个检查光度的滤光片和三个校正波长的滤光片。每个滤光片的吸光值是相对空白滤光片测定的。这个试剂盒不仅能让用户获得测量准确性的信息,也能提供精确度的信息,包括平均值和变异系数。在测量准确性和精确度时,将空白滤光片和样品滤光片放入插槽内。将测得的输出吸光度值与允许值范围比较。在检查波长时,测定三个测试滤光片在对应波长(260nm、280nm和800nm)下的吸光度,以确定每个波长的变异系数。。紫外可见火焰光度计灵敏度高、选择性好、准确度高、适用浓度范围广、分析成本低、操作简便、快速。河北哪里卖火焰光度计代理商
不用紫外-可见火焰光度计时,请及时关机、并拔掉电源插头,以防止雷雨天气可能造成的损坏。河北大容量火焰光度计操作
紫外-可见分光光度计是基于紫外可见分光光度法原理,利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射吸收来进行分析的一种分析仪器。主要由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。其工作原理为分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量,这就是分光光度定性和定量分析的基础。本文介绍的是日立U-3010型号紫外分光光度计的使用方法。日立U-3010型号紫外分光光度计的使用1.开电源,先开U-3010电源,再启动电脑2.点击桌面上UV,启动程序3.点击method窗口,将会出现GeneralQuantitationinstrumentMonitorReport五个对话框,如下图所示:4.设置(1)General对话框;(2)Quantitation对话框,如果测波长选择wavelength,数量可选多个,比如测定:260nm,280nm,230nm,则选择3个;如图所示:(3)Instrument对话框,将你要测定的波长值依次输入框内;(4)设置好后,点确定键5.放入空白对照。河北大容量火焰光度计操作