5分钟认识酶标仪:从ELISA走向多功能和细胞成像免疫分析方法无处不在。比如,这阵子大家购买的抗原检测卡,就应用这一原理。到医院里医生开个单子,查标志物,也是基于免疫检测技术,只不过使用的是几十上百万的酶免疫工作站。酶标仪是酶免疫工作站中的常规设备,随着酶免疫分析技术的出现诞生,主要解决少量样本的自动化快速测试问题。而酶标仪现在的发展已经不只是“酶标”,它可以应用多种原理、大小分子都能测、还可配合成像开展各种细胞实验。本文带您快速了解酶标仪的前世今生,并介绍主流的中高质量产品,希望在您下次入手酶标仪时有点帮助。酶标仪应用于酶活性测定、抗体检测、蛋白质定量等领域,在生物学研究中发挥着重要作用。湖北智能化酶标仪用户体验
按照滤光方式分类滤光片式酶标仪内置滤光片,根据试验所需选择滤光片来获得不同的波长。光源发出的全波谱光经滤光片后,大部分被过滤,只剩下滤光片本身允许的波长通过。对ELISA来说,检测波长范围是400~750nm(固定波长:405,450,490,630nm)可见光范围,即可满足显色测定需求。“单波长”只使用对显色较大吸收的波长测定,目前基本已淘汰。“双波长”除了对较大吸收波长进行测定外,同时用对特异显色不敏感的波长进行校准,OD值为二者之差。选择什么波长主要根据底物溶液颜色和pH值,比如邻苯二胺OPD-过氧化氢H2O2或四甲基联苯胺TMB-H2O2较大吸收波长不同,前者的吸收波长为492nm,后者为450nm。对于多功能酶标仪来说,检测波长范围覆盖紫外区、可见光区、近红外等,需要5~6个滤光片。滤光片式酶标仪获得的波长都是固定的,不能获得任意所需波长,而且更换滤光片价格昂贵。上海科研酶标仪设备酶标仪通过光学测量技术,实现对酶活性、浓度等参数的精确检测和分析。
酶标仪从而实现自动进样检测过程。而另一些酶标仪则是采用手工移动微孔板进行检测,因此省去了X,Y方向的机械驱动机构和控制电路,从而使仪器更小巧,结构也更简单。微孔板是一种经事先包埋用于放置待测样本的透明塑料板,板上有多排大小均匀一致的小孔,孔内都包埋着相应的抗原或抗体,微孔板上每个小孔可盛放零点几毫升的溶液。光是电磁波,波长100nm~400nm称为紫外光,400nm~780nm之间的光可被人眼观察到,大于780nm称为红外光。人们之所以能够看到色彩,是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色,是因为植物吸收的大部分为红橙光和蓝紫光,但对绿色不吸收,反射出来,所以植物呈现为绿色。酶标仪测定的原理是在特定波长下,检测被测物的吸光值。随着检测方式的发展,拥有多种检测模式的单体台式酶标仪叫做多功能酶标仪,可检测吸光度(Abs)酶标仪从原理上可以分为光栅型酶标仪和滤光片型酶标仪。光栅型酶标仪可以截取光源波长范围内的任意波长,而滤光片型酶标仪则根据选配的滤光片,只能截取特定波长进行检测。中心定位仪器会自动对酶标孔进行中心定位,中心定位是要消除酶标孔底的凸凹引起的厚薄不均带来检测的不准确。
酶标仪作为一种专业的生物分析仪器,具有广泛的应用范围,主要用于测量酶活性、蛋白质浓度、核酸浓度等生化指标。它广泛应用于生命科学研究、医学诊断、药物开发等领域,为科研和医疗工作者提供了强大的工具。以下是酶标仪可以进行的主要检测类型:酶活性检测:酶标仪可以通过监测底物与酶反应产生的产物在特定波长下的吸光度变化,计算出酶的活性。这种检测方法对于研究酶的催化机制、了解酶在生物体中的功能具有重要意义。蛋白质浓度测定:使用专门的试剂盒,酶标仪可以测定蛋白质溶液中的蛋白质浓度。这在分子生物学实验和蛋白质纯化过程中非常重要,有助于了解蛋白质在生物体内的分布和功能。核酸浓度测定:酶标仪可用于测定核酸的浓度,包括DNA和RNA。通过测定核酸与某些染料的结合或反应产生的吸光度变化,可以确定核酸的浓度,对于基因表达和遗传研究具有重要意义。细胞增殖和细胞毒性检测:酶标仪可以用于测定细胞培养物中细胞的增殖情况,或者用于评估化合物对细胞的毒性。这对于药物筛选和细胞生物学研究具有重要意义。免疫学实验:酶标仪在酶联免疫吸附试验(ELISA)中起着关键作用,可以检测多种免疫相关指标,如抗体、抗原等。酶标仪的出现极大地提高了生物分子检测的效率和准确性,为生物医学研究和药物开发提供了有力支持。
全自动酶标仪是一种高级的生物实验设备,主要用于进行生物酶的定性和定量分析。其主要功能是能够自动读取酶标板上的吸光度,以此判断样品的含量、活性、结构等信息。全自动酶标仪的基本原理:全自动酶标仪主要由样品处理系统、酶标板处理系统、测试系统和数据分析系统组成。样品处理系统可以自动加样、混合、分配等操作;酶标板处理系统可以自动清洗、涂覆、加背景液等操作;测试系统可以自动检测样品的吸光度;数据分析系统则可以自动计算、分析样品的数据,并生成图表、报告等结果。与传统的化学分析方法相比,酶标仪具有更高的灵敏度和更低的检测限,能够更准确地反映生物分子的微小变化。浙江智能化酶标仪原理
酶标仪在生物学研究中用于分析蛋白质、DNA等生物分子的浓度和活性,是生命科学研究的重要工具。湖北智能化酶标仪用户体验
此物质能够吸收较多的光能量。如果选择其它的波长段,就会造成检测结果的不准确。因此,在测定检测物时,我们选择特定的波长进行检测,称为测量波长。但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收,为了消除这种非特异性吸收,我们再选取一个参照波长,以消除这个不准确性。在参照波长下,检测物光的吸收较小。检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收。检测值计算仪器中的检测器接收透过被检测物的光能量,转换成二进位数字信号,较大为4095。仪器定义没有光源下的透光值为0%,没有检测物的透光值为100%。则实际检测中,检测物的透光值均在0%一100%之间。透光值的计算如下:T=(Meas—Min)/(Max—Min)其中T为透光值,Meas为检测的二进位数值,Min为在0%的情况下检测的二进位数值,Max为在100%的情况下检测的二进位数值,举例如下:MaX=3600Min=20Meas=30T=(30-20)/3600-20)=0.0028OD=log(1/T)=log(1/)=中心定位仪器会自动对酶标孔进行中心定位,中心定位是要消除酶标孔底的凸凹引起的厚薄不均带来检测的不准确。在对每一个酶标仪进行检测时,仪器其实要进行35个点的测量,选取较中间的5个点的均值为本孔的OD值。湖北智能化酶标仪用户体验