流式细胞仪是一类先进的检测仪器,其运用计算机技术,可以呈现即时的数据。流式细胞仪普遍应用于生物学、免疫学、遗传学、药理学、血液学、病理学、临床检验等领域。流式细胞仪开始的雏形诞生于1934年,Moldavan提出使悬浮的单个血红细胞流过玻璃毛细管,在亮视野下用显微镜进行计数,并用光电记录装置测量的设想。1953年Crosland-Taylor根据牛顿流体在圆形管中流动规律设计了流动室。其后又经过Coulter、Parker&Horst、Kamentsky、Gohde、Fulwyler、Herzenberg等人的不断改进,设计了光电检测设备和细胞分选装置、完成了计算机与流式细胞仪的物理连接及多参数数据的记录和分析、开创了细胞的免疫荧光染色及检测技术、推广流式细胞仪在临床上的应用。细胞分析仪可以直接在已接种细胞的架构中进行样本留取和净化。西安全息无标记3D显微镜
流式细胞仪的其他几方面的技术改进:①荧光信号从线性测量到对数测量的改进,由于对数测量可以放大电信号,使之对弱荧光和某些药物自发荧光标本检测才得到满意的结果;②光谱重叠的校正,通过补偿修饰软件的开发应用,从而保证了各种不同激发荧光检测分析的质量;③DNA含量分析时,通过分析脉冲的面积、宽度,区分实体瘤组织标本中的粘连细胞群体,剔除DNA检测中的二联体细胞,Zda程度地减少假阳性,从而解决了实体瘤DNA分析时长期存在的关键性的难题;④过去采用激光的一种波长(如488nm)的发射光只能激发样品中一种波长的继发光,因此,只能检测细胞中一种细胞成分。现在流式细胞仪采用一种488nm激发波长的发射光,可以同时激发样品中三种或四种不同波长的继发光,这便可用于同一细胞不同成分的同步分析。常州外泌体分离分析系统设计细胞分析仪非常适合进行单个细胞荧光检测、单个细胞质量控制、单个细胞精确鉴定等操作。
细胞分析仪在临床上的用途:细胞病变过程中伴随细胞DNA含量的改变,DNA非整倍体细胞是恶性疾病的特异性标志。细胞分析仪的FSC能够给出这些信息,在疾病的早期诊断和鉴别诊断中有着很重要的作用;早在80年代人们发现特定T细胞亚群可以反映AIDS患者的临床状态,而细胞分析仪可以对这些T细胞亚群进行检测,为AIDS的诊断、ZL提供有用信息。细胞分析仪借助于各种荧光染料测定一个细胞的多种参数完成白血病及淋巴瘤的诊断,准确率达90%左右,较传统形态学检查准确性提高10%~20%。细胞分析仪对淋巴细胞及其亚群数量的检测,可以探索疾病的发病机理、病程、预后,指导临床ZL方案。
使用直方图的形式来表达单参数数据,其细胞数目为Y轴,测量强度为X轴。通常而言,512或1024通道数为流式细胞仪坐标轴的分辨率,此取决于模数转换器的分辨率。关于双参数或多参数数据,不仅能够对每个参数的直方图单独显示,而且能够对二维的三点图、等高线图、灰度图或三维立体视图进行选择。通过对含有单细胞的液滴进行分离来实现细胞的分选。将一个超高频电晶体配备在流动室的喷口上,充电后振动,使喷出的液流断裂为均匀的液滴,在这些液滴之中分散待测定细胞。将正负不同的电荷充入这些液滴中,当液滴从带有几千伏特的偏转板流经时,在高压电场的作用下偏转,往各自的收集容器中落入,往中间的废液容器落入不予充电的液滴,从而使得细胞的分离实现。细胞分析仪可以进行单个细胞的分析,支持对个体差异的分析。
细胞分析仪在生物学及微生物学上的用途:从早期到现在,在细胞及细胞器方面很多已被人们所接受的科技,都经细胞分析仪研究过。在细胞功能的早期研究中,研究者只能通过观测微生物的吞噬来研究噬中性粒子,而细胞分析仪可以通过它们的大小、形状、抗体及吞噬过程中微生物种类、数量的变化更深入的辨别、研究这些噬中性粒子;氧自由基的实时、单细胞繁殖评价,DNA倍体分析,细胞循环中细胞增殖和凋亡分析等都会用到细胞分析仪;细胞分析仪对细胞周期可以轻松分析,促进了以此为基础的植物学的发展,辅以成像仪器,细胞分析仪可以对微生物的成长、繁殖进行3-D研究。细胞分析仪通过多重荧光染色的组合,能够更为精确地指定不同活细胞。西安全息无标记3D显微镜
细胞分析仪可以分析细胞分子,如分析细胞分子的来源、种类、数量等。西安全息无标记3D显微镜
测量区光路调节:这是调试工作的关键,需要保证在测量区的液流、激光束、90°散射测量光电系统垂直正交,而且交点较小。一般可在用标准荧光微球等校准中完成。流式细胞仪中所测得的量是相对值,因此需要在使用前或使用中对系统进行校准或标定,这样才能通过相对测量获得的意义。流式细胞仪校准的标准样品应该稳定,有形成份形状应是大小比较一致球形,样品分散性能良好,且经济、容易获得。常用标准荧光微球作为非生物学标准样品,鸡血红细胞做为生物学标准样品。微球用树脂材料制作,或标有荧光素,或不标记荧光素。西安全息无标记3D显微镜