电离对于任何质谱分析都是必不可少的,为此有许多适合不同样品类型和应用的方法。大体上,这些方法可以细分为气相方法、解吸方法和喷雾方法。以下是每种方法的概要。电子电离(EI):分析物分子必须处于气相状态,以便与加热的灯丝在真空中产生的高能电子进行有效的互动。EI可以被认为是一种相当苛刻的分子破碎和电离方法,常用于样品相对挥发性和低分子量的情况。化学电离(CI):将浓度高于分析物的气体引入EI电离室。载气与电子的相互作用将产生几个分子离子,随后与过量的载气进一步反应,形成不同的分子离子。然后这些离子将与被分析物分子反应,通过几种不同的机制形成被分析物分子离子。CI是一种非常软的电离技术,不会导致普遍的碎片化。蛋白免疫分析仪的灵敏度可用于检测微生物或病毒传染引起的免疫反应变化。南昌单细胞免疫分析仪
气相色谱法使用的高温使其不适合高分子量的化合物(如蛋白质),因为热使它们变性。它很适合用于石油化工、环境监测和修复以及工业化学领域。样品可以是固体、液体或气态。分离后,化合物可以用质谱技术进行分析,如ICP-MS,进行鉴定,或用EI或CI进行电离,并在ToF质量分析器中进行分析[17]。近期有文献已经对GC-MS领域的进展进行了回顾。液相色谱法与气相色谱法相似,只是样品现在是在液相中。样品被溶解在溶剂中,并被注入色谱柱中,色谱柱由被溶解的化合物(流动相)和固体(固定相)组成。南昌单细胞免疫分析仪蛋白免疫分析仪是生命科学研究必不可少的分析工具之一。
常用的检测器包括:电子倍增器(EM):离散金属板的串行连接,将离子电流放大约108倍,变成可测量的电子电流。法拉第杯(FC):撞击集电极的离子导致电子从地面流过电阻,由此产生的电阻上的电位降被放大。光电倍增管转换二极管:离子开始撞击到一个二极管,导致电子发射。产生的电子然后撞击荧光屏,而荧光屏又释放出光子。然后光子进入倍增器,在那里以级联的方式进行放大--很像EM。阵列检测器(包括同时测量不同m/z的几个离子的检测器和对位置敏感的离子检测的检测器):涵盖了普遍的检测器类型和系统,可以结合多种检测技术。
离子阱质谱仪的MS-MS属于时间串联型,它的操作方式见上图,在A阶段,打开电子门此时基础电压置于低质量的截止值,使所有的离子被阱集,然后利用辅助射频电压抛射掉所有高于被分析母离子的离子。进入B阶段,增加基频电压,抛射掉所有低于被分析母离子的离子。以阱集即将碰撞活化的离子。在C阶段,利用加在端电极上的辅助射频电压激发母离子,使其与阱内本底气体碰撞,在D阶段,扫描基频电压,抛射并接收所有CID过程形成的子离子,获得子离子谱。以此类推,可以进行多级MS分析。由离子阱的工作原理可以知道,它的MS-MS功能主要是多级子离子谱,利用计算机处理软件,还可以提供母离子谱,中性丢失谱和多反应监测(MRM)。在临床应用中,蛋白免疫分析仪可检测炎症标志物、心肌酶等重要指标。
实时直接分析(DART):形成等离子体,产生离子、电子和激发态物种。激发态物种与液态、固态或气态样品的相互作用,然后负责分析物分子的电离。DART能够分析不同形状和尺寸的材料,无需事先准备样品,而且在环境条件下进行分析。感应式耦合等离子体(ICP):准备好的含有分析物的液体被气溶胶化,并利用等离子体转化为气相离子。ICP有能力电离几乎所有的元素。基质辅助激光解吸电离(MALDI):由要检测的分子类型决定的「基质」被过量地添加到要分析的样品中。然后用激光照射样品,使分析物分子气化,几乎没有碎片或分解。带正电和负电的离子都可以产生。MALDI是主要的「软」电离方法之一,特别适用于分析大分子或易溶分子。快速原子轰击法(FAB):一束加速的电离原子被聚焦到要分析的样品上,喷出并电离目标分析物。这是一种软电离技术,能够产生带正电和负电的离子。热离子源:加热的Cs,产生正离子,是常见的一次离子源,可以用静电离子光学器件聚焦,用于二次离子MS。蛋白免疫分析仪在完整性蛋白质组学中的应用日益增多。南昌单细胞免疫分析仪
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一旦H与D的交换完成,样品就可以通过质谱分析来提供关于蛋白质结构随小分子结合而变化的信息、蛋白质折叠的信息或关于没有结晶或不适合其他结构生物学方法的蛋白质的结构信息。MALDI-TOF不仅是一种好的质谱分析方法,它还能够通过步进扫描平台、在激光反复发射下连续扫描平台或扫描激光束来生成图像[25]。这种技术被称为基质辅助激光解吸/电离质谱成像(MALDI-MSI)。由此产生的图像可以提供丰富的信息,例如,大的组织切片,空间分辨率在50-200毫米之间。由于MALDI是一种软电离技术,分子信息得以保留,因此感兴趣的化合物不需要像荧光显微镜那样被标记来检测。因此,它提供了一种「无标签」成像的手段。南昌单细胞免疫分析仪