深圳卵母细胞纺锤体胚胎植入

纺锤体观测新技术提升“试管婴儿”胚胎受精率

什么是纺锤体观测仪？

      纺锤体观测仪是利用光线经过双折射性的物体时产生的光程差，对卵母细胞内的纺锤体进行动态及无创观察的显微观测系统。

纺锤体观测仪主要有什么用处？

       纺锤体观测仪主要用于ICSI注射时纺锤**置观测，避免ICSI注射时对卵子的纺锤体损伤。

       目前的ICSI注射方法是：假定成熟的MII卵母细胞的纺锤体靠近***极体，通过定位***极**置于6点或12点方向，在垂直于***极体的3点钟方向注入精子。但事实上，纺锤体的位置不是固定不变的，***极体不能精细预测所有卵母细胞纺锤体的位置，约39%的纺锤体并不能通过***极体预测。传统的ICSI注射很可能损坏纺锤体，若纺锤体损伤很可能导致卵母细胞死亡或染色体异常。因此，在ICSI注射时对纺锤体进行观察，对于ICSI操作和受精结局都有非常重要的意义，可以显著提高ICSI受精率，有大量文献报道正常受精率在观察到纺锤体的卵子中***高于未观察到纺锤体的卵子（83.3% VS 77.2%）。

纺锤体仪还有什么作用？

      纺锤体观测仪还可以对一代受精后的卵母细胞受精情况进行评估，选择未受精的卵母细胞进行补救ICSI***。 纺锤体微管的正极朝向细胞两极，负极则靠近染色体。深圳卵母细胞纺锤体胚胎植入

纺锤体生成

      在含中心体的细胞中，纺锤体的生成开始于细胞分裂前初期 - 即在细胞核膜分解(Nuclear Envelope Breakdown, NEB)之前。初期的结构为两个**的以中心体为核的星状体(asters)。当细胞核膜分解后，染色体和星状体发生一系列复杂的互动反应。**终结果为所有的染色体在纺锤体的**(赤道板,)排列整齐，每两条染色体有一个着丝点，每一个着丝点被一束极性相同的微管（通常称为纺锤丝）附着。此时细胞处于分裂中期，纺锤体生成完毕。实验证明，中心体在这个过程中的作用不是必需的。动物细胞在中心体被激光捣毁后仍旧能够筑构纺锤体，但其位置通常不在细胞的大致几何中心，其后的胞质分裂也会受严重影响。纺锤体 [1]

       在不含中心体的细胞中，纺锤体的生成是由染色体本身主导的。此过程由一小分子量的GTP连接蛋白（Ran GTPase）控制。细胞核分解后，纺锤丝由染色体周围生成。其后这些纺锤丝会在动力分子与为微管动力的合作影响下自动排列为极性相反大致数目相同的两组。每组的极性相对于一组着丝点。同时在微管远端的动力蛋白 dynein 会将这些微管束集中到一点，形成纺锤极区(Spindle Polar Zone)。与此同时，染色体会自动在赤道板排列整齐。纺锤体生成完毕。 上海双折射性纺锤体加热台纺锤体的功能异常可能导致细胞分裂错误，引发遗传疾病。

秋水仙素为什么会使有丝分裂的细胞停滞于中期

如果用秋水仙素处理有丝分裂的细胞，纺锤体会迅速消失，细胞停滞在有丝分裂中期，染色体无法分离成两组。用秋水仙碱进行诱导，从而将细胞阻断在细胞分裂中期，也是诱导细胞周期同步化的重要方法之一。真核细胞周期可分为4个时期，分别是G1期、S期、G2期和M期。在细胞周期调控中主要有3个控制点，***个控制点在G1期，决定细胞能否进入S期；第二个控制点在G2期，决定细胞能否进入有丝分裂期；第三个控制点在M期，决定细胞是否已经准备好将复制好的染色体拉向两极。CDK（周期蛋白依赖性蛋白激酶）对细胞周期运行起着**性调控作用，CDK与不同时期的周期蛋白结合会在特定周期起调节作用。cyclinA、cyclinB是在M期起调节功能的两种主要周期蛋白。细胞周期运转到分裂中期后，在后期促进复合物(APC)的作用下，M期cyclinA和cyclinB通过泛素化途径迅速降解，Cdkl活性丧失，细胞周期便从M期中期向后期转化。APC活性变化是细胞周期由分裂中期向后期转换的关键因素，其活性受到多种因素的综合调节，纺锤体组装检查点是其重要的调控因素。纺锤体组装不完全，或所有动粒不能被动粒微管全部捕捉，则APC不能被***。

近年来，研究者们通过不断优化冷冻保护剂的配方和浓度，发现某些特定成分的组合能够减轻冷冻过程中纺锤体的损伤。例如，紫杉醇等细胞骨架保护剂在稳定纺锤体微管结构方面表现出色，成为冷冻保存中的重要辅助手段。Polscope偏振光显微成像系统的应用，使得对双折射性纺锤体的动态观察成为可能。通过实时监测冷冻过程中纺锤体的形态变化，研究者能够更准确地评估冷冻效果，并优化冷冻保存条件。此外，偏光成像技术还能够提供纺锤体异常率的量化数据，为临床应用提供可靠依据。纺锤体微管的聚合与解聚受到多种酶的调控。

近年来，随着玻璃化冷冻技术的不断发展，成熟卵母细胞纺锤体的冷冻保存研究取得了进展。研究表明，采用玻璃化冷冻法冷冻保存的成熟卵母细胞，在解冻后其纺锤体和染色体的形态及功能均能得到较好的保持。这主要得益于玻璃化冷冻过程中避免了冰晶形成对细胞的损伤，以及冷冻保护剂对细胞的有效保护。然而，值得注意的是，尽管玻璃化冷冻法在提高解冻存活率和妊娠成功率方面取得了成效，但仍存在一些问题。例如，冷冻过程中纺锤体的微管结构可能受到低温的影响而发生解聚，导致染色体分离异常。此外，冷冻保护剂的毒性也可能对卵母细胞造成一定的损伤。为了克服这些问题，研究者们进行了大量的实验和优化工作。例如，通过改进冷冻保护剂的配方和浓度，降低其对细胞的毒性；通过优化冷冻速率和程序，减少冷冻过程中对细胞的机械损伤；以及通过筛选和评估不同冷冻载体和保存时间对卵母细胞冷冻效果的影响，寻找好的冷冻保存条件。纺锤体在减数分裂中也发挥重要作用，确保生殖细胞染色体正确分离。美国卵母细胞纺锤体Hoechst染料

纺锤体在细胞分裂中扮演关键角色，确保遗传物质均等分配。深圳卵母细胞纺锤体胚胎植入

纺锤体是如何形成的(1)

纺锤体是动植物细胞分裂期形成的与染色体正常分离直接相关的分裂器，纺锤体的装配在有丝分裂的前期完成。动物细胞纺锤体由星体微管、极间微管、动粒微管及其结合蛋白构成，因含有星体微管故称有星纺锤体。无中心体的动物细胞和植物细胞也能形成纺锤体，因不含有星体微管而称之为无星纺锤体。微管是由α、β微管蛋白异源二聚体及少量微管结合蛋白聚合而成的亚稳定动态结构。动物细胞的中心体由一对相互垂直的圆筒状中心粒及中心体基质构成。它是纺锤体微管向外生长的**，又称微管组织中心。在有丝分裂前间期的S期初期，中心体开始复制倍增，在G2期结束时完成。在细胞分裂期前期，间期复制倍增的两个中心体分离，每一个中心体形成放射状排列的微管，称为星体，每个中心体是它自身星体的**。在有丝分裂细胞周期的分裂期，微管通过持续增加和丢失组成微管的微管蛋白亚基来实现微管的聚合和解聚，微管始终处于生长和缩短的更替中。在分裂前期，纺锤体微管由游离的微管蛋白组装而成，介导染色体的运动；分裂末期，纺锤体微管解聚，又组装形成细胞质微管网络。纺锤体微管包括动粒微管、极间微管和星体微管. 深圳卵母细胞纺锤体胚胎植入