上海精子分析VSL

世界卫生组织(WHO)《人类精液及精子—宫颈粘液相互作用实验室检验手册》于1980年***出版，以满足临床与科研对人类精液标准化检测程序日益增长的需求。该手册是人类精液实验室检查和处理程序及方法的标准操作指南，旨在提高精液分析的质量和提高不同实验室结果的可比性。在过去40年里，该手册进行了4次修订与补充(1987年、1992年、1999年和2010年)，内容涉及精液检查的标准化操作程序、精子功能、精浆生化、精液处理与冷冻以及质量保证等，已成为国际公认的标准，被世界各地临床和实验室***使用。中国卫生部已在2003年将其纳入人类辅助生殖技术规范。WHO《人类精液检查与处理实验室手册(第5版)》精液参考值的数据是来自全球3大洲8个国家的前瞻性、多中心临床研究的结果，通过循证医学研究获得的精液参数参考值具有里程碑式意义。自2010年出版以来成为WHO很受欢迎的出版物之一，即使在**近几年其下载量也在稳步增长。它是男科实验室及全球范围内开展精液分析操作的其他实验室、医院和研究机构使用的标准操作手册。该手册在国际大会、科学会议、以及WHO合作中心、专业学会和其他学术机构的培训项目中进行了***传播。截止到2021年，已被3000余篇同行评议论文和评论引用。Hamilton Thorne精子分析仪具有快速、高效、智能化的特点，能够满足用户对精子分析的多方面需求。上海精子分析VSL

精子计数是在显微镜下计算一次排出的精液中精子的数量将精子计数值乘以精液量就可得出一次**的量。

精液液化后将样本按一定比例稀释和固定后，滴于血细胞计数板上，在显微镜下计数红细胞计数区内的所有精子数并换算为每m1内所含精子数。此外还可用电子细胞计数仪经调整阈值设置后计数精子数量。

将已经液化的精液标本均匀混合，用白细胞计数吸管吸精液至0.5刻度，再吸稀释液至11刻度，振荡三分钟，然后置于血球计数板内，计数二大格（每格面积1平方毫米）之精子数，在尾数后加5个“0”即得每毫升精液内精子数。例如计数为1280个，则每毫升精子应为128,000,000。精液稀释液之配制：重碳酸钠5克、福尔马林1毫升、蒸馏水加至100毫升。稀释液内重碳酸钠有消化粘液的作用，福尔马林有使精子制动的作用。如精液之稠度过高而不易吸取时，可以精液1毫升混匀于稀释液19毫升内，稀释后进行计数。如精子的数目极少，亦可改为稀释10倍计数。每次排精75%的精子是从附睾尾部所贮存的，还有25%是由输精管道的其他部分来的，因此单凭一次排精的精子计数来衡量睾丸生精机能是不***的。只有在排精后间隔4-5天以后多次精液检查，才能比较正确地从这些精子计数来反映睾丸的生精机能。 香港密度精子分析精确温度控制不同品牌CASA分析的结果差异较大，因此，更高效精确的精液质量检测系统对促进男科学发展具有重要的意义。

CASA系统进行**分析应注意以下几点：

3.2**分析仪阈值的确定（1）精子灰度、对比度阈值：由于分析仪是根据灰度的高低来判断精子的真伪，对亮度和对比度要求特别高，检测时应多次试用，寻找能准确识别精子的比较好灰度阈值[8]。（2）碎片：测定精子浓度准确性受**中细胞成份和非精子的颗粒物质的干扰，测定活动精子的百分率也受精子中非精子物质的影响[9]，这些也是需要注意的。对于系统误认为精子的非精子成分，如精原细胞、白细胞和非白细胞颗粒等，可人为准确记数后在可删除杂质一栏将其舍去。3.3出现1次异常结果应间隔复查反复检查2�3次方能得出比较正确的结果。3.4对于无精子的患者应仔细进行视野检查注意不要将杂质误认为精子计数在内，应将**3000ɡ离心15分钟后，再涂片检查，确认无精后再出报告。

CASA精子运动速度和运动轨迹特征主要参数有：①轨迹速度（VCL）：也称曲线速度，即精子头部沿其实际行走曲线的运动速度。②平均路径速度（VAP）：精子头沿其空间平均轨迹的运动速度，这种平均轨迹是计算机将精子运动的实际轨迹平均后计算出来的，可因不同型号的仪器而有所改变。③直线运动速度（VSL）：也称前向运动速度，即精子头部直线移动距离的速度。④直线性（LIN）：也称线性度，为精子运动曲线的直线分离度，即VSL/VCL。⑤精子侧摆幅度（ALH）：精子头实际运动轨迹对平均路径的侧摆幅度，可以是平均值，也可以是最大值。不同型号的CASA系统由于计算方法不一致，因此相互之间不可直接比较。⑥前向性（STR）：也称直线性，计算公式为VSL/VAP，亦即精子运动平均路径的直线分离度。⑦摆动性（WOB）：精子头沿其实际运动轨迹的空间平均路径摆动的尺度，计算公式为VAP/VCL。⑧鞭打频率（BCF）：也称摆动频率，即精子头部跨越其平均路径的频率。⑨平均移动角度（MAD）：精子头部沿其运动轨迹瞬间转折角度的时间平均值。⑩运动精子密度：每毫升精液中VAP>0μm/s的精子数。在精子研发的历程中，计算机辅助精子检测经历了黑白图像机、彩色图像检测。目前先进的是荧光精子图像检测。

美国Hamilton Thorne的TOX IVOS精子分析仪已经被FDA和国内外毒理学实验室所使用。本试验研究目的对精子分析仪和血细胞计数板在大鼠附睾精子计数结果的比较验证。方法选取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,对三批次雄鼠的精子计数进行比较。健康雄鼠通过戊巴比妥钠麻醉实施安乐死后,取左侧附睾尾称重,将附睾尾部放入37℃预热的含有M199培养液平皿中,剪碎附睾尾,放入培养箱中37℃孵育5 min,然后吸取1份精子悬液,用M199培养液进行一定倍数的稀释,混匀后,取1滴稀释液,滴入精子分析仪**载玻片上,将载玻片放入TOX IVOS精子分析仪载物台,进行精子计数,同时吸取稀释后的精子悬液滴入血细胞计数板内,通过光学显微镜进行计数,比较两种计数方法的差异性。结果***批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为165.9±91.7,140.0±59.6。三个批次的精子分析仪和血细胞计数板的精子计数结果无统计学差异(P>0.05)。结论精子分析仪是一种方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理学研究中具有重要的应用价值。‌精子分析可以分析参数有，曲线速率（VCL）‌：精子头沿其实际曲线运动的时均速率。上海人精子分析DAP

‌HAMILTON THORNE精子分析仪可分析参数，前向性（STR）‌：平均路径的直线性。上海精子分析VSL

精子手工计数原理及操作方法

1.原理：将精液用适当的稀释液作一定量稀释后，混匀注入计数池内计数，再算出每毫升精液中精子数。2.方法（按照***版第四版《全国临床检验操作规程》）1).于小试管内加精子稀释液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀释液内混匀。2).充分摇匀后,滴入改良Neubauer计数板的计数池内,静置1~2分钟,待精子下沉后,以精子头部作为基准进行计数。

3.计算1).如每个**中方格内精子少于10个,应计数所有25个中方格内的精子数。2).如每个**中方格内精子在10~40个,应计10个中方格内的精子数。3).如每个**中方格内精子多于40个,应计数5个中方格内的精子数。公式：精子数=计数结果/计数中方格×25×1/计数池高度×20×103/ml=计数结果/计数中方格×1/计数池高度×5×103/ml 上海精子分析VSL