精液显微镜检查
(1)精子存活率:排精后30~60分钟,正常精子存活率应为80%~90%,精子存活率降低是导致不育的重要原因。(2)精子活动力:指精子活动状态,也是指活动精子的质量。世界卫生组织(WHO)推荐将精子活动力分为4级:①精子活动好,运动迅速,活泼有力,直线向前运动;②精子活动较好,运动速度尚可,游动方向不定,呈直线或非直线运动,带有回旋;③精子运动不良,运动迟缓,原地打转或抖动,向前运动能力差;④死精子,精子完全不活动。正常精子活动力应在③级以上,若>40%的精子活动不良(③、④)级,常是导致男性不育的重要原因。精子活动力低,主要见于精索静脉曲张、泌尿生殖系统非特异性***,应用某些药物如抗疟药、雄***等所致。 男性精液检测主要依赖计算机辅助精子分析仪(computer assistant semen analyses,CASA)。美国慢速运动精子分析负相差
医生为了鉴定男性生育能力,常嘱男方作精液检查,正常精液颜色为灰白色或乳白色。如节欲时间长者,可呈淡黄色,若出现鲜红色. 暗红色,则提示患者有炎症或生殖道损伤。每次排精量为2~6毫升,常受排精次数与频率的影响。新鲜精液呈稠厚胶冻状,1小时之内应液化为稀薄的液体,用一根小玻璃棒插入精液中再提起,所形成的精液丝长度一般不超过2厘米,否则视为异常。精液呈弱碱性,PH值为7.2~7.8。正常精子数应超过2000万/毫升。排精后1小时内活动精 >=50%。世界卫生组织推荐精子活动力分为四级:0级:不活动;1级:精子原地摆动;2级:有中等的前向运动;3级:前向运动活跃,快速直线运动。正常的精子活动力为2~3级的精子>=40%~50%.精子形态:畸形精子小于50%。分析男性生育能力不能单从精液的一项指标定论,应对精子数量 活力 活动率 液化时间 畸形率等多方面进行综合能力分析。 采集精液前5~7天内必须停止性生活,并且不得有**、梦遗等情况,还应禁烟戒酒,忌服对生精功能有影响的药物等。广州山羊精子分析VCL传统的CASA系统仍使用传统阈值图像处理方法,准确率有待提高。
精子分析仪工作原理
以灰度识别CASA为例,采用高分辨率的摄影技术与显微镜结合,**标本液化后吸入计数,通过显微镜放大后,用图像采集系统获取精子动、静态图像后输入计算机。根据设定的精子大小和灰度、精子运动移位及运动参数,对采集图像进行精子密度、活动力、活动率、运动特征等几十项检验项目动态分析,由计算机处理后,打印出“**分析检查报告以及精子动态特征分布图”。一次能对1000个精子进行动态检测分析,2-3分钟即可完成检测 [1]。
优点:
操作简便,用量少,检测速度快,重复性优于人工检测,并且能够快速、准确的测定精子密度、活力、精子分级等,还可提供精子运动状态的多种参数等。
缺点:
影响分析结果的因素较多,除**本身性质所含的固有误差外,不同的精子计数池的相对准确性和精确性可产生明显不一致的效果。
CASA精子运动速度和运动轨迹特征主要参数有:①轨迹速度(VCL):也称曲线速度,即精子头部沿其实际行走曲线的运动速度。②平均路径速度(VAP):精子头沿其空间平均轨迹的运动速度,这种平均轨迹是计算机将精子运动的实际轨迹平均后计算出来的,可因不同型号的仪器而有所改变。③直线运动速度(VSL):也称前向运动速度,即精子头部直线移动距离的速度。④直线性(LIN):也称线性度,为精子运动曲线的直线分离度,即VSL/VCL。⑤精子侧摆幅度(ALH):精子头实际运动轨迹对平均路径的侧摆幅度,可以是平均值,也可以是最大值。不同型号的CASA系统由于计算方法不一致,因此相互之间不可直接比较。⑥前向性(STR):也称直线性,计算公式为VSL/VAP,亦即精子运动平均路径的直线分离度。⑦摆动性(WOB):精子头沿其实际运动轨迹的空间平均路径摆动的尺度,计算公式为VAP/VCL。⑧鞭打频率(BCF):也称摆动频率,即精子头部跨越其平均路径的频率。⑨平均移动角度(MAD):精子头部沿其运动轨迹瞬间转折角度的时间平均值。⑩运动精子密度:每毫升精液中VAP>0μm/s的精子数。全自动精子分析仪在临床Z疗中展现了明显的优势。
CASA系统也可用于精子形态学评估。CASA系统可用来定量分析精子头部形态学、中段甚至主段的形态,可以把精子头部和中段分类为正常或者不正常,还可以给出头部和中段尺度、头部椭圆率和匀称性的均数、标准差和中位数,以及对染色的精子顶体区进行测量[3]。
与人工操作相比,自动化系统更具客观性,精确度和重复性的潜力[4]。精确度和重复性不低于7%[5],这优于有经验的技术人员的手工评估。两个研究已经提示在CASA结果与生育力之间存在***联系。Coetzee等发现自动分析的正常精子形态的结果是预示体外受精率和妊娠率的有意义指标[6]。Garrett等发现**中能与透明带结合的、具有某些头部形态特征的精子所占的百分比(Z%),和直线速度(VSL)的精子的百分比,与大样本的低生育力夫妇的自然妊娠率是有***且**的关系。Z%和VSL与生育力间的关系显示是连续的,而且没有显示临界值;高于临界值,妊娠率也不会进一步增加[7]。 CASA系统通过计算机分析精子运动参数,能够提供精确的量化数据,优于人工检测方法。鱼精子分析VAP
Hamilton Thorne精子分析仪具有良好的数据管理和报告生成功能,能够方便用户查阅和分享分析结果。美国慢速运动精子分析负相差
世界卫生组织(WHO)《人类精液及精子—宫颈粘液相互作用实验室检验手册》于1980年***出版,以满足临床与科研对人类精液标准化检测程序日益增长的需求。该手册是人类精液实验室检查和处理程序及方法的标准操作指南,旨在提高精液分析的质量和提高不同实验室结果的可比性。在过去40年里,该手册进行了4次修订与补充(1987年、1992年、1999年和2010年),内容涉及精液检查的标准化操作程序、精子功能、精浆生化、精液处理与冷冻以及质量保证等,已成为国际公认的标准,被世界各地临床和实验室***使用。中国卫生部已在2003年将其纳入人类辅助生殖技术规范。WHO《人类精液检查与处理实验室手册(第5版)》精液参考值的数据是来自全球3大洲8个国家的前瞻性、多中心临床研究的结果,通过循证医学研究获得的精液参数参考值具有里程碑式意义。自2010年出版以来成为WHO很受欢迎的出版物之一,即使在**近几年其下载量也在稳步增长。它是男科实验室及全球范围内开展精液分析操作的其他实验室、医院和研究机构使用的标准操作手册。该手册在国际大会、科学会议、以及WHO合作中心、专业学会和其他学术机构的培训项目中进行了***传播。截止到2021年,已被3000余篇同行评议论文和评论引用。美国慢速运动精子分析负相差
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