精子分析仪工作原理
以灰度识别CASA为例,采用高分辨率的摄影技术与显微镜结合,**标本液化后吸入计数,通过显微镜放大后,用图像采集系统获取精子动、静态图像后输入计算机。根据设定的精子大小和灰度、精子运动移位及运动参数,对采集图像进行精子密度、活动力、活动率、运动特征等几十项检验项目动态分析,由计算机处理后,打印出“**分析检查报告以及精子动态特征分布图”。一次能对1000个精子进行动态检测分析,2-3分钟即可完成检测 [1]。
优点:
操作简便,用量少,检测速度快,重复性优于人工检测,并且能够快速、准确的测定精子密度、活力、精子分级等,还可提供精子运动状态的多种参数等。
缺点:
影响分析结果的因素较多,除**本身性质所含的固有误差外,不同的精子计数池的相对准确性和精确性可产生明显不一致的效果。 精子分析,平均角位移(MAD):精子头沿其曲线轨迹瞬时转折角度的时均J对值。人精子分析W.H.O 6
扩展性检查:可以在某些情况下由实验室选择或根据临床医生的特殊要求而使用的项目。手册增加了精子DNA损伤、遗传学和炎症细胞等相关检查项目。提出了基因突变是导致不育和精液常规检查异常的原因。新增了精液相关细胞因子、趋化因子等检测的方法、试剂、检测步骤等内容。在精液参数异常的男性中普遍存在精子DNA损伤,并且已有报道指出其与精液参数正常男性的不育有关。由于与精液质量相关,精子DNA损伤检测是男性不育检查中的重要补充内容,已成为男科学基础和临床中论述**多、**有前景的精子损伤分子标志物之一。本版手册增加了大量篇幅对其原理和检测方法进行了描述。新增了基因和基因组测序内容。临床上,越来越多的人意识到染色体异常[数量异常、结构异常(包括微缺失和微重复)]和基因突变是导致各种男性不育症的基础病因,而这正是在精液分析中观察到的许多异常的原因。尽管基因和基因组测序常规在医学遗传学实验室进行,但一些男科实验室也在做同样的检测。为明确生殖道炎症对于男性不育的影响,泌尿男科医生可能提出对精液中的趋化因子和细胞因子进行评估。本手册纳入了精液中白细胞介素检测方法。美国浓度精子分析WOBCASA系统可以给出多种精子运动状态的参数,这些参数能够帮助更有效地了解精子的运动特性。
CASA精子运动速度和运动轨迹特征主要参数有:①轨迹速度(VCL):也称曲线速度,即精子头部沿其实际行走曲线的运动速度。②平均路径速度(VAP):精子头沿其空间平均轨迹的运动速度,这种平均轨迹是计算机将精子运动的实际轨迹平均后计算出来的,可因不同型号的仪器而有所改变。③直线运动速度(VSL):也称前向运动速度,即精子头部直线移动距离的速度。④直线性(LIN):也称线性度,为精子运动曲线的直线分离度,即VSL/VCL。⑤精子侧摆幅度(ALH):精子头实际运动轨迹对平均路径的侧摆幅度,可以是平均值,也可以是最大值。不同型号的CASA系统由于计算方法不一致,因此相互之间不可直接比较。⑥前向性(STR):也称直线性,计算公式为VSL/VAP,亦即精子运动平均路径的直线分离度。⑦摆动性(WOB):精子头沿其实际运动轨迹的空间平均路径摆动的尺度,计算公式为VAP/VCL。⑧鞭打频率(BCF):也称摆动频率,即精子头部跨越其平均路径的频率。⑨平均移动角度(MAD):精子头部沿其运动轨迹瞬间转折角度的时间平均值。⑩运动精子密度:每毫升精液中VAP>0μm/s的精子数。
全自动的IVOS可以提供**快的分析速度以及高质量数据输出。可以使用一次性的和可重复的载玻片,深度从10um~100um。每次分析捕捉100帧图像,扫描速度每秒60帧。**的软件升级。
IVOS能提供:精确、客观、具有重复性的结果。高速分析,在60Hz下半秒扫描30帧,为实验室节省成本。 [1]主要功能IVOS自动精子活动、浓度、形态分析系统。Hamilton Thorne的CASA系统适用于临床、研究实验室、动物繁殖基地、水产业、制药公司等各种领域,成为了精液分析业的金标准。可以应用于包括人类、公牛、马、野猪、狗、兔子、老鼠、绵羊、山羊、鱼以及各种濒危动物。在TOX IVOS上有**的大鼠精液分析软件。 WHO第6版明确提出:使用CASA系统须遵循适当的程序步骤,才能获得可靠和可重复的结果。
Hamilton Thorne精子分析仪IVOS Ⅰ与IVOS Ⅱ一致性比对分析
根据质量控制的要求,对新精子分析系统进行性能验证后,应与旧系统进行一致性评价,从而保证检测结果的准确性。方法:选用原有Hamilton Thorne精子分析仪IVOSⅠ为参比仪器,新购仪器IVOSⅡ为实验仪器,对精子分析系统的主要参数(精子浓度、前向运动精子百分率、总活力)进行分析比对。结果:两台仪器的方法内和方法间离群值检验、偏倚图和散点图的线性关系和离群值检测所有参数均能符合比对要求,检测结果具有相关性;对实验仪器的检测结果适合范围的检验,当其精子浓度r=0.988,前向运动精子百分率r=0.975,总活力r=0.981,r均≥0.975,表明取值范围合适;对预期偏倚(Bc)的接受性评价表明当精子浓度在12×10~6/ml,允许总误差(TEa)为6.67%;当前向运动精子百分率<31%,TEa为2.34%,两项检测的Bc上限<1/2允许误差(Ea),实验仪器经比对分析显示符合质控要求。结论:通过比对分析,得出两台精子分析系统的主要参数(精子浓度、前向运动精子百分率、总活力)结果具有可比性,检测结果一致,可同时用于临床标本的检测。 精子分析仪与人工方法相比具有客观,高效,高精度的优点。上海Hamilton Thorne精子分析DSL
全自动精子分析仪极大提高临床检验水平,广泛应用于泌尿科,男性科以及计划生育、优生优育研究等。人精子分析W.H.O 6
七、精子形态检查[正常参考值]畸形精子:<10%-15%; 凝集精子:<10%;未成熟精细胞:<1%。[临床意义]1.精索静脉曲张病人的畸形精子增多,提示精子在不成熟时已进入精液,或静脉回流不畅造成阴囊内温度过高和睾丸组织缺氧,或血液带有毒性代谢产物从肾或肾上腺静脉逆流至睾丸,上述原因均有损于精子形态。2. 精液中凝集精子增多,提示生殖道***或免疫功能异常。3. 睾丸曲细精管生精功能受到药物或其他因素影响或伤害时,精液中可出现较多病理性未成熟精细胞。
八、精液细胞检查[正常参考值]白细胞(WBC):<5个/HP(高倍镜视野);红细胞(RBC):0-偶见/HP。[临床意义]1.精液中白细胞增多,常见于精囊炎、前列腺炎及结核等。2.精液中红细胞增多,常见于精囊结核、前列腺*等。3. 精液中若查到*细胞,对生殖系*有诊断意义。 人精子分析W.H.O 6
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