测定精子密度和精子总数的方法主要包括显微镜计数和全自动分析。1.显微镜计数:这是传统的测定方法,需要收集精液,通常是使用量杯。收集后,应在实验室中尽快进行计数。应在光学显微镜下将精子进行分类,这一步非常重要,因为完整的精子才能被计数。然后,将剩余的精液样本通过自然沉降或离心的方法让精子下沉,通过显微镜观察并计数。这种方法需要一定的经验和技巧,而且受到许多因素的影响,如精子的活动性、浓度、形态等。2.全自动分析:随着科技的发展,现在有全自动的精子分析仪,可以快速准确地测定精子密度和总数。这种方法通过激光技术进行,可以测量大量精子,包括前向运动的精子。这些仪器通常可以提供更精确的结果,并且减少了人为错误。在进行精子计数前,男性应避免长时间禁欲,因为这可能会影响精子的数量和质量。同时,健康的饮食和生活方式也有助于提高精子的数量和质量。精子分析系统较传统的分析法比较,具有速度快、量比性好、准确性高、为临床和科研提供客观的检测依据。上海CASA精子分析重复性高
人类精子冷冻保存和储存:增加了冷冻样本的安全性、精液冷冻保存方案、快速液氮熏蒸冷冻、冷冻精液的解冻、玻璃化冷冻等内容,更具可操作性。本手册对人类精子的冷冻保存提出了具体建议:将样本分管分罐分开储存;对使用的材料和留存标本建立定期核验程序;所有储罐都应有液位监控报警系统,以监测温度和液氮液位,传感器应连接警报器,可通过实验室人员的终端进行提醒。新证据表明,玻璃化冷冻是冷冻保存精液的一种有价值的方法。该方法的原理是将小体积样本与无污染液氮直接接触并快速冷冻,可以防止冰晶的形成,并减少精子的渗透性损伤。在麦管玻璃化冷冻(无菌玻璃化冷冻)中,也可以使用封闭系统,不需要无菌的液氮。狗精子分析W.H.O 5精子分析仪的出现简化了检验流程,提高了诊断的可靠性,对于提升男性生殖健康领域的Z疗效果具有重要作用。
五、精子活动力检测[正常参考值]**后30-60分钟活动力为Ⅲ级以上的精子>0.80:**后120分钟内活动力为Ⅲ级以上的精子>0.60;**120分钟后0.25-0.60的精子仍能活动。[临床意义]活动不良或不活动的精子增多,是导致不育的重要原因之一。常见于精索静脉曲张、泌尿生殖系的非特异性***如大肠杆菌***,某些代谢药、抗疟药、雌***、氧化氮芥等,也可使精子活动力下降。六、精子计数[正常参考值](100-150)×109/L或一次排精总数为(4-6)×108。[临床意义]1.精子计数小于20×109/L或一次排精总数少于1×108为不正常,见于精索静脉曲张、铅金属等有害工业污染、大剂量放射线及某些药物影响。2.精液多次未查到精子为无精症,主要见于睾丸生精功能低下,先天性输精管、精囊缺陷或输精管阻塞。输精管结扎术2个月后精液中应无精子,否则说明手术失败。3.老年人从50岁开始精子数减少以至逐步消失。
精子分析仪工作原理
以灰度识别CASA为例,采用高分辨率的摄影技术与显微镜结合,**标本液化后吸入计数,通过显微镜放大后,用图像采集系统获取精子动、静态图像后输入计算机。根据设定的精子大小和灰度、精子运动移位及运动参数,对采集图像进行精子密度、活动力、活动率、运动特征等几十项检验项目动态分析,由计算机处理后,打印出“**分析检查报告以及精子动态特征分布图”。一次能对1000个精子进行动态检测分析,2-3分钟即可完成检测 [1]。
优点:
操作简便,用量少,检测速度快,重复性优于人工检测,并且能够快速、准确的测定精子密度、活力、精子分级等,还可提供精子运动状态的多种参数等。
缺点:
影响分析结果的因素较多,除**本身性质所含的固有误差外,不同的精子计数池的相对准确性和精确性可产生明显不一致的效果。 在精子研发的历程中,计算机辅助精子检测经历了黑白图像机、彩色图像检测。目前先进的是荧光精子图像检测。
精液一般检查
(1)精液量:正常人一次排精2~5ml。(2)颜色和透明度:正常刚射出的精液呈乳白色或灰白色,液化后呈半透明乳白色,久未排精者可呈淡黄色。鲜红色或暗红色的血精见于生殖系统炎症、结核、和**,黄色脓样精液,见于精囊炎或前列腺炎。(3)粘稠度和液化:正常新鲜的精液排出后数秒呈粘稠胶冻状,在精液中纤溶酶的作用下30分钟后开始液化。如果粘稠度降低呈米汤样,可能是精子数量减少,见于生殖系统炎症,精液不凝固见于精囊阻塞或损伤;如果精液1小时后不液化,可能是由于炎症破坏纤溶酶所致,如前列腺炎,精子不液化可以抑制精子活动力而影响受孕。(4)酸碱度:pH值。正常精液呈弱碱性pH7.2~8.0,以利于中和酸性的阴道分泌物,pH值小于7或大于8都能影响精子的活动和代谢,不利于受孕。 CASA系统操作简便,检测速度快,且重复性优于人工检测。北京山羊精子分析高准确率
IVOS和CEROS集成了智能化的分析软件,能够自动识别和计算精子的各项参数,减少了人工操作的误差。上海CASA精子分析重复性高
CASA系统也可用于精子形态学评估。CASA系统可用来定量分析精子头部形态学、中段甚至主段的形态,可以把精子头部和中段分类为正常或者不正常,还可以给出头部和中段尺度、头部椭圆率和匀称性的均数、标准差和中位数,以及对染色的精子顶体区进行测量[3]。
与人工操作相比,自动化系统更具客观性,精确度和重复性的潜力[4]。精确度和重复性不低于7%[5],这优于有经验的技术人员的手工评估。两个研究已经提示在CASA结果与生育力之间存在***联系。Coetzee等发现自动分析的正常精子形态的结果是预示体外受精率和妊娠率的有意义指标[6]。Garrett等发现**中能与透明带结合的、具有某些头部形态特征的精子所占的百分比(Z%),和直线速度(VSL)的精子的百分比,与大样本的低生育力夫妇的自然妊娠率是有***且**的关系。Z%和VSL与生育力间的关系显示是连续的,而且没有显示临界值;高于临界值,妊娠率也不会进一步增加[7]。 上海CASA精子分析重复性高
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