精子手工计数原理及操作方法
1.原理:将精液用适当的稀释液作一定量稀释后,混匀注入计数池内计数,再算出每毫升精液中精子数。2.方法(按照***版第四版《全国临床检验操作规程》)1).于小试管内加精子稀释液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀释液内混匀。2).充分摇匀后,滴入改良Neubauer计数板的计数池内,静置1~2分钟,待精子下沉后,以精子头部作为基准进行计数。
3.计算1).如每个**中方格内精子少于10个,应计数所有25个中方格内的精子数。2).如每个**中方格内精子在10~40个,应计10个中方格内的精子数。3).如每个**中方格内精子多于40个,应计数5个中方格内的精子数。公式:精子数=计数结果/计数中方格×25×1/计数池高度×20×103/ml=计数结果/计数中方格×1/计数池高度×5×103/ml 精子分析仪与人工方法相比具有客观,高效,高精度的优点。香港全自动化精子分析精子动力分析
CASA系统虽然有诸多优点,但是很多因素都会影响到CASA仪器的使用及准确性。CASA系统进行**分析应注意以下几点:3.1标本的采集与制作(1)采集前禁欲2�7天,禁欲时间过长、过短对**质量都有一定影响。(2)容器要清洁。(3)特殊情况下,*可使用专门为采集**设计的无毒性避孕套,普通的乳胶避孕套因含有损害精子活力的物质不可使用。(4)注意保温(20�37℃),并于30分钟内送检验科。(5)标本置于37℃水浴.精子运动参数具有温度敏感性,因此要求计数池应于分析仪恒温板上预温。(6)密切注意**液化的情况,确保液化时间准确,因**样本随放置时间的延长,精子活动力及活动率有减少的趋势。标本液化后取混匀样本**1滴滴在样品池中间,然后进行分析。(7)检测精子活动力,标本密度应控制在2×106/ml到50×106/ml之间。具有高密度(如高于50×106/ml)精子的标本,通常会增加碰撞的频率,并可能由此出现错误的结果。在这种情况下,建议用同源精浆稀释标本。上海濒危物种精子分析VAP计算机辅助精子分析(computer- assisted sperm analysis)是2014年公布的泌尿外科学名词。
精液检查前有什么注意事项?
一、留精液前,病人应停止**4~7天。检查前1周不能用丙酸睾丸酮、**睾丸酮、苯丙酸诺龙。采取精液时,可用软皂或石蜡油做**按摩,将标本收集在无菌的试管中;也可用避孕套(冲洗干净,不含杀精子药物)或采用**中断法收集精液,但这样收集的量往往不多。如用上述方法采不到精液,可经直肠内按摩精囊及输精管末端、压迫采尿,检查沉渣中有无精子。不要将精液暴露在过热和过冷的环境中。及时交给医生备查,不得超过30分钟。冷天要注意保暖,送检时可放在内衣口袋里保温。
二、如果要进行细菌培养,应先冲洗、消毒尿道口,再将精液收集在无菌试管中。夫妻同居3年以上,没有采取任何避孕措施而未能受孕的称不孕症。如果是不孕症,在双方未进行检查前,不能盲目怀疑某一方,更不能认为不孕的原因是女方。妊娠是夫妻双方的事。实现受孕,男方的精液含量应正常,形态和动力也应正常。女方能正常排卵,精子和卵子能结合成受精卵,这种受精卵能在子宫内膜种植。上述的几个环节中的某一个环节发生障碍,都可引起不孕。
三、如果上述检查结果精液是正常的,女方也应去医院检查,包括全身情况、生殖***、卵巢排卵功能、输卵管通畅否、免疫检查。
CASA系统也可用于精子形态学评估。CASA系统可用来定量分析精子头部形态学、中段甚至主段的形态,可以把精子头部和中段分类为正常或者不正常,还可以给出头部和中段尺度、头部椭圆率和匀称性的均数、标准差和中位数,以及对染色的精子顶体区进行测量[3]。
与人工操作相比,自动化系统更具客观性,精确度和重复性的潜力[4]。精确度和重复性不低于7%[5],这优于有经验的技术人员的手工评估。两个研究已经提示在CASA结果与生育力之间存在***联系。Coetzee等发现自动分析的正常精子形态的结果是预示体外受精率和妊娠率的有意义指标[6]。Garrett等发现**中能与透明带结合的、具有某些头部形态特征的精子所占的百分比(Z%),和直线速度(VSL)的精子的百分比,与大样本的低生育力夫妇的自然妊娠率是有***且**的关系。Z%和VSL与生育力间的关系显示是连续的,而且没有显示临界值;高于临界值,妊娠率也不会进一步增加[7]。 IVOS和CEROS集成了智能化的分析软件,能够自动识别和计算精子的各项参数,减少了人工操作的误差。
精液显微镜检查
(1)精子存活率:排精后30~60分钟,正常精子存活率应为80%~90%,精子存活率降低是导致不育的重要原因。(2)精子活动力:指精子活动状态,也是指活动精子的质量。世界卫生组织(WHO)推荐将精子活动力分为4级:①精子活动好,运动迅速,活泼有力,直线向前运动;②精子活动较好,运动速度尚可,游动方向不定,呈直线或非直线运动,带有回旋;③精子运动不良,运动迟缓,原地打转或抖动,向前运动能力差;④死精子,精子完全不活动。正常精子活动力应在③级以上,若>40%的精子活动不良(③、④)级,常是导致男性不育的重要原因。精子活动力低,主要见于精索静脉曲张、泌尿生殖系统非特异性***,应用某些药物如抗疟药、雄***等所致。 全自动精子分析仪在临床Z疗中展现了明显的优势。北京鱼精子分析负相差
HAMILTON THORNE精子分析仪可分析参数,前向性(STR):平均路径的直线性。香港全自动化精子分析精子动力分析
扩展性检查:可以在某些情况下由实验室选择或根据临床医生的特殊要求而使用的项目。手册增加了精子DNA损伤、遗传学和炎症细胞等相关检查项目。提出了基因突变是导致不育和精液常规检查异常的原因。新增了精液相关细胞因子、趋化因子等检测的方法、试剂、检测步骤等内容。在精液参数异常的男性中普遍存在精子DNA损伤,并且已有报道指出其与精液参数正常男性的不育有关。由于与精液质量相关,精子DNA损伤检测是男性不育检查中的重要补充内容,已成为男科学基础和临床中论述**多、**有前景的精子损伤分子标志物之一。本版手册增加了大量篇幅对其原理和检测方法进行了描述。新增了基因和基因组测序内容。临床上,越来越多的人意识到染色体异常[数量异常、结构异常(包括微缺失和微重复)]和基因突变是导致各种男性不育症的基础病因,而这正是在精液分析中观察到的许多异常的原因。尽管基因和基因组测序常规在医学遗传学实验室进行,但一些男科实验室也在做同样的检测。为明确生殖道炎症对于男性不育的影响,泌尿男科医生可能提出对精液中的趋化因子和细胞因子进行评估。本手册纳入了精液中白细胞介素检测方法。香港全自动化精子分析精子动力分析
[临床意义]1. 若数日未**、且精液量少于1.5ml者为不正常,说明精囊或前列腺有病变;若精液量减...
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【详情】男科实验室中通常所指的质量包含三个方面:实验室内部质量、医生处置的质量以及结果的质量[3]。1.实验...
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