仪器操作设置放置样品板：将密封好的 96 孔板平稳放入 qPCR 仪的样品槽，确保孔位对齐，盖紧仪器舱门。程序设置（通过仪器软件）：预变性：通常 95℃，30 秒 - 5 分钟（热启动酶，使模板完全变性）。循环阶段（变性→退火→延伸，同时采集荧光）：变性：95℃，5-15 秒（使 DNA 解链）。退火 / 延伸：根据引物 Tm 值设置温度（一般 55-65℃），20-30 秒（引物结合并延伸，荧光染料 / 探针在此阶段发光）。循环次数：通常 35-40 次（根据模板浓度调整）。溶解曲线（可选）：用于验证扩增产物特异性，程序为 95℃ 15 秒→60℃ 1 分钟→缓慢升温至 95℃，同时连续采集荧光（观察是否有单一峰，排除非特异性扩增或引物二聚体）。荧光通道选择：根据使用的荧光染料 / 探针类型选择（如 SYBR GreenⅠ 对应 FAM 通道，TaqMan 探针根据标记荧光选择）。样本信息录入：在软件中标记样品类型（如标准品、未知样本、阴性对照、空白对照）及孔位对应关系。RePure-(D)B可通过远程监控和数据传输功能，随时随地查看实验进展和数据变化。荧光基因扩增仪PCR仪市场报价
性能指标温度控制准确性：指样品孔温度与设定温度的一致性，直接关系到实验的成败，一般要求温度准确性在±0.1℃-±0.2℃之间。均匀性：指样品孔间的温度差异，关系到不同样品孔进行反应结果的一致性，良好的温度均匀性可使实验结果更具重复性，通常温度均匀性应在±0.2℃-±0.5℃范围内。升降温速度：更快的升降温速度可以缩短反应时间，提高实验效率，同时减少非特异性结合的机会，一般PCR仪的升降温速率在3℃/s-6℃/s左右。模块规格：常见的有96孔、48孔、32孔等，可根据实验需求选择合适的模块规格。此外，一些PCR仪还兼容0.2ml、0.5ml管以及96标准微孔板等不同类型的反应容器。程序设置：包括可记忆程序数目、比较大程序段数、比较大温阶步数、比较大循环次数、比较大保温时间等。丰富的程序设置功能可以满足不同实验的需求。江苏48孔基因扩增仪PCR仪直销价柏恒RePure系列PCR仪进行PCR扩增可以获得高度特异性和稳定性的扩增产物。
实时荧光定量 PCR 仪（qPCR 仪）的使用需严格遵循操作流程，以确保实验结果的准确性和重复性。实验前准备试剂与样本准备：根据实验需求配制qPCR反应体系（通常包括模板DNA/RNA逆转录产物、引物、探针/荧光染料、qPCRMix酶、无菌水等），需在冰上操作，避免酶失活。模板：确保核酸提取纯度（OD260/280在1.8-2.0之间），避免蛋白、盐类等杂质污染。引物/探针：需验证特异性，避免引物二聚体或非特异性结合。仪器与耗材检查：检查qPCR仪电源、触摸屏/软件是否正常启动，清洁样品槽（去除灰尘或液滴，避免影响温度传导）。准备无菌的PCR管或96孔板（建议使用光学级耗材，确保荧光信号穿透性）、移液器（校准合格）、滤芯吸头（防止交叉污染）。
检测常见过敏原：花生、牛奶、鸡蛋、大豆等是常见的食物过敏原，对过敏体质的人群可能引发严重的过敏反应。利用 PCR 仪检测食品中的过敏原基因，如花生中的 Ara h 1、Ara h 2 等基因，牛奶中的 β- 乳球蛋白基因等，可准确判断食品中是否含有这些过敏原成分，为食品标签标注和过敏人群的饮食安全提供保障。保障特殊人群饮食安全：对于患有食物过敏症的人群，准确的过敏原检测至关重要。PCR 仪在食品过敏原检测中的应用，能够帮助食品生产企业严格控制产品中的过敏原成分，确保特殊人群的饮食安全，减少过敏事件的发生。RePure-A即时获取实时数据，增强了实验的可控性和数据可靠性。
引物设计与条件优化场景：新引物开发时，需测试不同退火温度（Tm 值）以避免非特异性扩增。例：针对某基因设计 5 对引物，通过梯度 PCR 同时测试每对引物在 55℃~65℃范围内的比较好退火温度，直接筛选出特异性条带**亮的组合。优势：传统方法需多次**实验，梯度 PCR *需 1 次运行即可完成多条件验证。复杂模板的扩增优化场景：扩增富含 GC 碱基对（>70%）的模板、长片段 DNA（>5kb）或存在二级结构的序列时，需精细优化温度参数。例：扩增某病毒全基因组（约 15kb）时，通过梯度功能测试不同延伸温度（如 68℃~72℃）对产物完整性的影响，确定比较好延伸条件。RePure-(D)B在梯度功能下，可以同时在不同温度进行PCR反应，优化反应条件。南京单槽基因扩增仪PCR仪品牌
杭州柏恒荧光定量PCR仪Q9604是一款高性能的实验室设备，专注实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）解决方案。荧光基因扩增仪PCR仪市场报价
反应体系配制与加样体系配制：按比例在离心管中混合各组分（先加非模板试剂，***加模板，避免污染），轻轻混匀（勿剧烈震荡），短暂离心（1000-2000 rpm，10-20 秒）使液体沉底。示例（20μL 体系）：qPCR Mix 10μL + 上游引物（10μM）0.8μL + 下游引物（10μM）0.8μL + 模板 2μL + 无菌水 6.4μL（探针法需额外加探针）。加样：将配制好的体系逐一加入 96 孔板的对应孔中，避免产生气泡（若有气泡，用吸头刺破）。加样后用封板膜密封（确保无褶皱、无漏液），短暂离心（500-1000 rpm，30 秒），使液体聚集在孔底，避免挂壁。荧光基因扩增仪PCR仪市场报价
