FAM并不是一种特定的荧光定量PCR仪品牌或型号,而是一种在荧光定量PCR中常用的荧光染料。FAM(Fluoresceinamidite)即羧基荧光素,具有高量子产率,在被特定波长的光激发后会发出强烈的绿色荧光,其激发波长通常在495nm左右,发射波长在520nm左右。由于其荧光特性稳定且灵敏,被广泛应用于荧光定量PCR实验中,作为报告分子来对目标DNA或RNA进行定量检测。很多荧光定量PCR仪都可以使用FAM染料进行检测,例如赛默飞世尔的QuantStudio系列、ABIStepOnePlus等。这些仪器通常配备有能激发FAM染料发光的光源以及能检测其发射荧光的光学系统。以QuantStudio™1Plus实时荧光定量PCR仪为例,它配备4种常用的激发和发射滤光片,包括FAM、VIC、ROX和Cy5,其激发光源为白光LED,激发范围为455至530nm,可满足FAM染料的激发需求。一些先进的 TET 荧光定量 PCR 仪采用了冷 CCD(电荷耦合器件)或 PMT(光电倍增管)作为荧光探测器;镇江荧光定量PCR仪检测

荧光定量 PCR 仪的检测结果会受到多种因素的影响,包括仪器设备、试剂质量、样本处理以及实验操作等方面,以下是具体介绍:引物和探针:引物和探针的特异性、纯度及浓度对检测结果影响明显。若引物特异性不好,可能会与非目标序列结合,产生非特异性扩增,干扰目标基因的定量。探针的质量和标记效率也会影响荧光信号的强度和稳定性,进而影响检测的准确性。酶的活性:Taq 酶等聚合酶的活性和稳定性是保证 PCR 反应顺利进行的关键。酶活性过低会导致扩增效率低下,产量不足;而酶的稳定性差可能在反应过程中失活,使扩增反应中断,影响结果的重复性和准确性。反应缓冲液:反应缓冲液的成分和 pH 值等条件对 PCR 反应有重要影响。不合适的缓冲液条件可能影响酶的活性、引物与模板的结合以及 DNA 的稳定性,从而导致扩增效果不佳,检测结果不准确。扬州FAM荧光定量PCR仪功能TET 荧光定量 PCR 仪配备了高灵敏度的光学检测系统,包括高性能的激发光源和高灵敏度的荧光探测器。

ROX原理:主要用于荧光定量 PCR 中的校正和归一化。在反应体系中,ROX 的荧光强度相对稳定,不受 PCR 反应过程的影响。通过检测 ROX 的荧光信号,可以对其他荧光染料的信号进行校正,消除由于加样误差、反应体积差异、仪器波动等因素引起的荧光信号变化,提高定量结果的准确性和可靠性。特点:激发波长约为 570nm,发射波长约为 590nm,荧光颜色为红色。ROX 通常与其他荧光染料如 FAM、VIC 等配合使用,在多重荧光定量 PCR 中,为每个反应孔提供一个稳定的内参荧光信号,以便对不同孔之间的荧光信号进行标准化处理。
荧光定量PCR仪具有高灵敏度、高特异性和精确定量等特点,被广泛应用于多个行业,以下是一些主要的应用行业:农业育种行业作物基因检测:用于检测作物中的转基因成分,确保转基因作物的安全性和合规性。同时,可对作物的优良基因进行筛选和鉴定,如抗病虫害基因、抗逆基因、质量品质基因等,加速作物品种改良和选育进程。种子纯度鉴定:通过分析种子的 DNA 指纹图谱,准确鉴定种子的纯度和真实性,防止假冒伪劣种子流入市场,保障农业生产的质量和效益。植物病害监测:快速检测植物病原体,如病毒、细菌、等,及时发现植物病害的发生和流行趋势,为制定有效的病害防治措施提供依据,减少农作物损失。在多重 PCR 反应中对不同的目标序列进行特异性标记和检测。

荧光定量 PCR 仪是一种精密的仪器,正确的维护和保养可以延长其使用寿命,保证仪器的性能和检测结果的准确性。定期维护:光路系统校准:根据仪器的使用频率和厂家建议,定期对光路系统进行校准,以确保荧光信号检测的准确性。校准过程通常需要使用标准荧光样品和专业的校准工具,由专业技术人员进行操作。温度校准:荧光定量 PCR 仪的温度准确性对实验结果至关重要。定期使用标准温度计或温度校准设备对反应模块的温度进行校准,确保各个孔位的温度均匀性和准确性符合要求。一般建议每 3 - 6 个月进行一次温度校准。更换耗材和部件:根据仪器的使用情况,定期更换易损耗材,如反应板、密封垫、移液器吸头等。对于一些关键部件,如荧光检测模块的灯泡、滤光片等,按照厂家规定的使用寿命进行更换,以保证仪器的性能稳定。软件更新:及时更新仪器的控制软件和数据分析软件,以获得更好的性能和功能,同时修复可能存在的软件漏洞。在更新软件前,要备份好重要的实验数据,防止数据丢失。而荧光定量 PCR 技术可以在数小时内得出结果,提高了诊断效率。苏州VIC荧光定量PCR仪有哪些
通过检测药物处理后相关基因表达水平的变化,了解药物的作用机制,为药物的筛选和优化提供依据。镇江荧光定量PCR仪检测
荧光定量 PCR 仪是一种通过荧光染料或荧光标记的特异性探针,对 PCR 产物进行标记跟踪,实时监测反应过程的仪器。仪器特点:高灵敏度和特异性:能检测极低拷贝数的核酸模板,对目标序列具有高度特异性,可减少假阳性和假阴性结果。准确 quantification:通过实时监测荧光信号,实现对核酸模板的准确定量,结果准确可靠。高 throughput:可同时检测多个样品,大幅提高检测效率,节省时间和成本。高度自动化:具备自动进样、反应程序设置、数据采集和分析等功能,操作简便,减少人为误差。镇江荧光定量PCR仪检测