TET 荧光定量 PCR 仪针对基因组 DNA 甲基化检测的特殊性,开发了支持 TET 标记甲基化特异性探针的检测系统,其重要原理是通过亚硫酸氢盐处理将未甲基化的胞嘧啶(C)转化为尿嘧啶(U),而甲基化的 C 保持不变,再利用 TET 标记的特异性探针(结合甲基化 C 位点)检测靶标区域。该仪器通过荧光信号差值分析(处理后样本与未处理样本的荧光信号差),可精细量化甲基化水平(0-100%),解决了传统甲基化检测中定性或半定量的局限性。在表观遗传学研究中,例如乳腺中 BRCA1 基因启动子区甲基化检测,该仪器可检测到低至 5% 的甲基化水平变化,为发生机制研究提供精细数据。此外,该仪器配套的甲基化分析软件可自动计算甲基化率,并生成标准曲线和质控报告,简化了数据分析流程,同时支持与临床样本信息系统对接,实现数据的自动化管理和追溯。它们具有极低的噪声水平和较高的量子效率,能够检测到极少量的荧光光子,从而实现对低丰度核酸的检测。FAM荧光定量PCR仪有哪些

FAM 荧光定量 PCR 仪以 FAM(羧基荧光素,发射波长 520nm)为重要荧光报告染料,常与 TaqMan 探针技术结合实现特异性检测。其原理为:TaqMan 探针两端分别标记 FAM 报告染料与淬灭剂(如 TAMRA),未扩增时淬灭剂抑制 FAM 荧光;PCR 扩增中,Taq 酶的 5'-3' 外切酶活性切割与靶基因互补结合的探针,使 FAM 与淬灭剂分离并释放荧光,荧光强度随靶基因扩增呈指数增长。该技术的重要优势是 “高特异性”—— 当探针与靶基因序列完全互补时才会产生荧光,可有效避免引物二聚体等非特异性信号干扰。在病原体检测领域应用较广,例如检测中,针对 ORF1ab 基因设计 FAM 标记探针,样本中若存在该病毒,仪器可通过捕捉 FAM 荧光信号,在 30 个循环内检出阳性,Ct 值越小说明病毒载量越高,为临床诊疗提供精细依据。南通Cy5.5荧光定量PCR仪功能升降温速度慢则会使实验时间延长,也可能影响扩增效率。

VIC 荧光定量 PCR 仪通过兼容 VIC/FAM 双荧光通道,构建了高效的单核苷酸多态性(SNP)分型系统,可同步检测同一靶基因的两个等位基因位点。该仪器的双通道光学系统采用的激发光源(VIC:538nm,FAM:494nm)和检测通道,荧光信号采集互不干扰,可在同一反应体系中加入两种探针(VIC 标记野生型位点、FAM 标记突变型位点),通过两种荧光信号的强度对比实现 SNP 分型。在临床药物基因组学检测中,例如华法林用药剂量指导的 VKORC1 基因 SNP 分型,该仪器可快速区分 VKORC1 基因的 G/A 等位基因,根据分型结果确定患者的比较好用药剂量,避免因基因型差异导致的出血风险或药效不足。实验表明,该仪器对 SNP 分型的准确率达 100%,且检测过程无需电泳验证,相比传统分型方法,检测时间缩短至 1 小时,适合临床高通量样本检测。
FAM 荧光定量 PCR 仪是转基因作物检测的重要设备,其重要应用是通过 FAM 荧光信号定量分析外源基因插入拷贝数,满足农产品质量监管需求。检测原理为:针对转基因作物中的外源基因(如抗除草剂基因 EPSPS、抗虫基因 Cry1Ab)设计 FAM 标记探针,同时针对作物自身管家基因(如 Actin、UBQ)设计另一荧光标记探针(如 VIC)作为内参;PCR 扩增中,FAM 信号强度反映外源基因含量,内参信号用于校正样本 DNA 提取量差异,通过两者信号比值可计算外源基因的插入拷贝数。例如在转基因大豆检测中,若 FAM 与内参信号比值为 1:1,说明外源基因单拷贝插入;比值为 2:1 则为双拷贝插入。该检测符合国际通用标准(如 ISO 21572),可精细定量外源基因含量,例如中国规定转基因作物中外源基因含量超过 0.9% 需强制标识,仪器可通过定量分析判断是否达到标识阈值。在农产品进出口检测中,该仪器可快速筛查转基因成分,避免不符合进口国法规的产品流入市场,同时保障种子纯度,防止转基因种子混杂影响非转基因作物种植。能够准确地识别出微弱的荧光信号变化,从而实现对低水平核酸表达的检测。

Cy5.5 荧光定量 PCR 仪的重要优势在于其近红外荧光检测能力,该波长范围(675-730nm)可有效避开复杂组织样本中血红蛋白、黑色素等物质的可见光区荧光干扰,明显降低背景信号。其适配的 Cy5.5 标记探针具有优异的光稳定性,在长时间荧光采集过程中不易发生光漂白,确保信号稳定性。在实际应用中,对于组织样本中循环 DNA(ctDNA)等低丰度靶标检测,该仪器通过高灵敏度光电倍增管,可捕捉到低至数十拷贝的靶标核酸信号,解决了传统可见光荧光 PCR 仪在复杂样本中检测灵敏度不足的问题。例如在肺早期诊断中,可通过该仪器检测患者血液中微量的 EGFR 基因突变,为临床早期干预提供精细依据。YELLOW 荧光定量 PCR 仪适配黄色荧光基团,助力细菌耐药基因检测。CY3荧光定量PCR仪检测
能够准确检测食品中的转基因成分,通过对转基因作物中特定的基因序列进行定量分析;FAM荧光定量PCR仪有哪些
荧光定量 PCR 仪的梯度温控功能是提升实验可靠性的关键设计:仪器加热模块分为 8-12 个温控区域,每个区域可设置 1-10℃的温度梯度(如 55℃-65℃,间隔 1℃),可同时进行多个退火温度的 PCR 扩增实验。该功能的重要价值是 “优化引物退火温度”—— 引物退火温度过高会导致引物无法与模板结合,扩增效率骤降;温度过低则会引发引物非特异性结合,产生杂带。通过梯度温控,可一次性筛选出比较好退火温度:选择 Ct 值小、熔解曲线单一(无杂峰)的温度作为比较好条件,后续实验采用该温度可比较大化扩增效率,减少非特异性产物。例如在新引物验证实验中,若直接使用预估的退火温度,可能出现 “无扩增产物” 或 “杂带过多” 问题,而通过梯度温控需 1 次实验即可确定比较好温度,避免多次重复尝试。此外,该功能还能提升实验重复性:确定比较好退火温度后,不同批次实验采用统一条件,结果差异系数可控制在 3% 以内,为科研数据的可信度提供保障。FAM荧光定量PCR仪有哪些