dPCR的基本原理目前dPCR主要有两种形式,芯片式和液滴式,但基本原理都是将大量稀释后的核酸溶液分散至芯片的微反应器或微滴中,每个反应器的核酸模板数少于或者等于1个。这样经过PCR循环之后,有一个核酸分子模板的反应器就会给出荧光信号,没有模板的反应器就没有荧光信号。根据相对比例和反应器的体积,就可以推算出原始溶液的核酸浓度。可以使用几种不同的方法来分配样品,包括微孔板,毛细管,油乳剂和带有核酸结合表面的小型化腔室阵列。样品的分配使人们可以通过假设分子种群遵循泊松分布来估计不同分子的数量,根据泊松分布的原理,反应体系中目标分子的拷贝数可以通过公式A=-ln[(N-X)/N]*N计算,从而解决了多个目标分子存在于单个液滴中的可能性。数字PCR ,就选浚和(上海)仪器科技有限公司,让您满意,欢迎您的来电!湖南精密数字PCR定制
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数字PCR采用的策略概括起来非常简单,就是“分而治之”(divideandconquer)[1],这种做法非常类似于计算机科学中的“分治算法”,将一个标准PCR反应分配到大量微小的反应器中,在每个反应器中包含或不包含一个或多个拷贝的目标分子(DNA模板),实现“单分子模板PCR扩增”,扩增结束后,通过阳性反应器的数目“数出”目标序列的拷贝数。在实际的数字PCR实验中,事实上是通过呈现两种信号类型的反应器比例和数目进行统计学分析,计算出原始样本中的模板拷贝数。
在定量PCR时,我们常常纠结一个问题,究竟是相对定量还是***定量呢?如今,你无需纠结了,因为数字PCR(digitalPCR)来了。尽管这两种技术有些类似,都是估计起始样品中的核酸量,但它们有一个重要的区别。定量PCR是依靠标准曲线或参照基因来测定核酸量,而数字PCR则让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的***定量。因此特别适用于依靠Ct值不能很好分辨的应用领域:拷贝数变异、突变检测、基因相对表达研究(如等位基因不平衡表达)、二代测序结果验证、miRNA表达分析、单细胞基因表达分析等。数字PCR ,就选浚和(上海)仪器科技有限公司,让您满意,欢迎您的来电哦!

数字PCR为juedui定量,qPCR为相对定量,数字PCR较qPCR更精细、更灵敏。所以说,未来数字PCR将成为qPCR的重要补充,在部分领域逐步替代荧光定量PCR。未 来这些领域将广泛应用到数字PCR:科研:高校(生命科学学院、环境学院、医学院、药学院)等。医院:病理科、血液科、妇产科、心血管科、检验科、转化医学中心:研究院单位、疾控中心、海关(出入境检验检疫)、质监局、环境/环保局等。企业:第三方检测机构、IVD(分子体外诊断试剂)、生物制药等。浚和(上海)仪器科技有限公司为您提供数字PCR ,有想法可以来我司咨询!广州流式数字PCR品牌
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产品特点无需依赖传统荧光定量PCR的标准曲线即可实现核酸的***定量。全封闭防污染设计,一键式自动化操作。采用主流可靠的解决方案,系统由微滴生成仪、微滴检测仪、数据分析软件组成,并可选配同品牌封膜仪、PCR仪等微滴生成采用油包水乳化微滴技术,在微管道中利用气压驱动,2mins生成高达10万个皮升级的微滴,高效高产,支持多重数字PCR的开发。微滴生成芯片为高精度微流控芯片设计,三维微纳防污染结构,一张芯片可同时处理8个样本。微滴检测使用双通道荧光,支持EvaGreen染料法及探针法。检测线性范围达到6个数量级,基因突变检测灵敏度高达0.01%。检测通量高,可一次检测高达96个样本,支持灵活设定。...