每种PCR方法对比如下:
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数字PCR |
实时荧光定量PCR |
传统PCR |
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概述 |
测量阴性平行样的比例以确定***拷贝数 |
在发生PCR扩增时进行测量 |
在PCR循环结束时测量积聚的PCR产物的量 |
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是否定量 |
是,阴性PCR反应的比例适合泊松统计算法 |
是,因为在PCR的指数期内采集数据,在此期间PCR产物的数量与核酸模板量成正比 |
否,但是比较凝胶上的扩增条带的强度与已知浓度的标准品可进行半定量 |
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应用 |
***载体***定量 核酸标准品***定量 下一代测序文库***定量 稀有等位基因检测 基因表达***定量 混合物富集和分类 |
基因表达定量 质量控制和检测验证 病原体检测 SNP基因分型 拷贝数变异 microRNA分析 ***定量 siRNA/RNAi实验 |
DNA扩增 基因分型 分子克隆 检测灵敏度高达万分之一。广州MicroDrop-100数字PCR品牌 |


与常规PCR方法相比,数字PCR有如下优势:
能够***定量:常规PCR定量需要制定已知拷贝数的标准DNA曲线,但是由于待检样本与标准曲线不在统一体系,条件上会存在差异,另外加上PCR扩增效率的差异从而影响定量结果的准确性。而数字PCR不受标准曲线和扩增动力学影响,可进行***定量。
样本需求量低:适用于珍贵样本或核酸降解严重的样本
灵敏度高:数字PCR是将传统PCR反应体系分割成数万个**PCR反应,这些反应可以精确地检测很小的目的片段差异、单拷贝甚至低浓度的混杂样本。且能避免非同源异质双链的形成。
高耐受性:由于目的序列被分配到多个**反应体系中,***降低了背景信号和***物对反应的干扰,扩增基质效应大大减小。
相对于二代测序、基因芯片和定量PCR而言,数字PCR具备以下优势:
· 灵敏度可达到单个核酸分子:检测限低至0.001%,主要系为数字PCR可以实现靶标DNA/RNA的生物浓缩;
· 无需标准曲线活参照基因进行对比来测定核算量,可对靶分子起始量进行***定量,直接独处DNA分子的个数;
· 适合环境复杂样品的检测:终点PCR检测,不依赖Ct值,不依赖扩增效率,能克服PCR***剂的影响,避免样品间的交叉***问题,适合各类复杂环境中的样本进行***定量,如动血样、粪便、尿液、痰液、水样、土壤、植物等; CRISPR-Cas9基因编辑结果验证。

国内拥有完全自主知识产权的微滴式数字PCR仪。广州MicroDrop-100数字PCR品牌
相对于二代测序、基因芯片和定量PCR而言,数字PCR具备以下优势:
· 能够有效区分浓度差异微小的样品:更好的准确度、精密度和重复性,可以用于精确测定靶基因的相对表达,基因拷贝数变异分析等。
· 数字PCR可开发针对不同**、不同样本以及不同的样本环境提供检测解决方案,该技术的应用范围广,尤其在液体活检领域,已开发针对肺*、乳腺*、肠*、胃*等上百个位点检测试剂盒,可精细指导临床***的诊断,以便患者在后续得到更及时并且适当的***方案提供。 广州MicroDrop-100数字PCR品牌
浚和(上海)仪器有限公司成立于2018-10-09,注册资本:700-1000万元。该公司贸易型的公司。公司是一家私营独资企业企业,以诚信务实的创业精神、质量高速的管理团队、精悍的职工队伍,努力为广大用户提供***的产品。公司目前拥有优异员工5~10人人,具有真空泵,喷雾干燥机,培养箱,等离子清洗机等多项业务。浚和以创造***产品及服务的理念,打造高指标的服务,引导行业的发展。
定量PCR和数字PCR的特点:1.在20多年的使用和发展中,定量PCR作为一种技术平台,已经产出海量的数据,在工业界和分子检测的某些应用上,定量PCR已经成为“金标准”。基础研究方面,则形成了被称为MIQE的“定量PCR标准实验指南”。2.在定量PCR的各种应用中,基因表达分析(geneexpressionanalysis)的应用比重约占七成,综合各种因素来看,眼下定量PCR还是进行基因表达研究的理想手段。3.上述的“各种因素”具体展开,主要包括:通量、自动化程度、各种检测探针与染料、检测通道、成本和可参考文献与protocol的数目等等。4.就目前市场上已有的数字PCR设备来看,定量PCR在...