企业商机
数字PCR基本参数
  • 产地
  • 中国
  • 品牌
  • 永诺
  • 型号
  • MicroDrop-100
  • 是否定制
数字PCR企业商机

每种PCR方法对比如下:

数字PCR

实时荧光定量PCR

传统PCR

概述

测量阴性平行样的比例以确定***拷贝数

在发生PCR扩增时进行测量

在PCR循环结束时测量积聚的PCR产物的量

是否定量

是,阴性PCR反应的比例适合泊松统计算法

是,因为在PCR的指数期内采集数据,在此期间PCR产物的数量与核酸模板量成正比

否,但是比较凝胶上的扩增条带的强度与已知浓度的标准品可进行半定量

应用

***载体***定量

核酸标准品***定量

下一代测序文库***定量

稀有等位基因检测

基因表达***定量

混合物富集和分类

基因表达定量

质量控制和检测验证

病原体检测

SNP基因分型

拷贝数变异

microRNA分析

***定量

siRNA/RNAi实验

DNA扩增

基因分型

分子克隆 双通道荧光检测,支持EvaGreen染料及探针法。宁波广东数字PCR正规代理

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研究方向

病原微生物的检测(***、细菌等)

疾病预防控制中心、出入境检验检疫局系统的实验室目前主要采用基于TaqMan探针法的定量PCR体系对病原微生物进行核酸水平的检测,而这些目前正在使用着的检测体系可以无缝地转移到QX200上,从而满足该类实验室对于检测结果的要求:灵敏度更高、重复性更好、无需依赖标准曲线的***定量结果,同时操作简便。

对于其他类型的研究实验室,也可以利用ddPCR灵敏度高的特点,对各种样品中的病原微生物展开***的研究。如HIV抗逆转录***治疗过程中***残留量的监控;HBV耐药突变的检测;HCV的分子分型;抗甲氧西林金黄色葡萄球菌的院内***监控;环境微生物不同功能基因之间的连锁分析等等。 数字PCR品牌采用主流可靠的解决方案,由微滴生成仪、微滴检测仪、数据分析软件组成。

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总结

数字 PCR 的优点:

  • 无需依赖参考物或标准品
  • 通过增加 PCR 平行样的总数可实现所需的精度
  • 高度耐受***剂
  • 能够分析复杂混合物
  • 与传统 qPCR 不同,数字 PCR 对出现的拷贝数呈线性反应,可以检测到较小倍数变化的差异。

实时荧光定量 PCR 的优点:

  • 提高检测的动态范围
  • 无需 PCR 后处理
  • 检测能够覆盖低至 2 倍的变化
  • 在 PCR 的指数期内采集数据
  • 报告基团荧光信号的增加与生成的扩增子数量成正比
  • 裂解探针提供扩增子的长久裂解记录

传统 PCR 的缺点:

  • 精确度差
  • 灵敏度低
  • 动态范围小 < 2 logs
  • 分辨率低
  • 非自动化
  • ***基于规格的区别分析
  • 结果未表示为数字
  • 使用溴化乙锭染色不足以定量
  • PCR 后处理

研究方向

无创产前筛查

无创伤的产前诊断, 如21号染色体为3倍体的唐氏综合征、已知父母基因型的胎儿地贫检测或已知父母基因型的其它核酸病检测(孟德尔相关遗传疾病)。目前标本来源主要为血液,而待检测的胎儿DNA受到母体DNA的干扰,影响了检测的准确性。而QX200检测系统独特的微滴化技术完全可以作为二代测序法的补充来进行的无创伤产前诊断,从而提高工作效率及节约成本。

转基因食品或成分的检测

目前在确定转基因作物或成分的含量时采取定量PCR的标准曲线法,这种方法需要依赖于已知浓度的标准品(Certified Reference Materials Calibrants, CRMCs)。ddPCR***定量的方式可以彻底解决这些标准物质的定标工作。 关于甲基化含量的鉴定。

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相对于二代测序、基因芯片和定量PCR而言,数字PCR具备以下优势:

· 灵敏度可达到单个核酸分子:检测限低至0.001%,主要系为数字PCR可以实现靶标DNA/RNA的生物浓缩;

· 无需标准曲线活参照基因进行对比来测定核算量,可对靶分子起始量进行***定量,直接独处DNA分子的个数;

· 适合环境复杂样品的检测:终点PCR检测,不依赖Ct值,不依赖扩增效率,能克服PCR***剂的影响,避免样品间的交叉***问题,适合各类复杂环境中的样本进行***定量,如动血样、粪便、尿液、痰液、水样、土壤、植物等; MicroDrop™数字PCR是拥有完全自主知识产权的微滴式数字PCR仪。上海数字PCR原理

检测灵敏度高达万分之一。宁波广东数字PCR正规代理

同时,从公式也可以看出,随着反应阳性体系数(X)的增加,体系中目标分子的拷贝数相对于X会有较大的差距,随着X的持续增加,数字PCR结果的不确定度也随着提高,总体来说,数字PCR阳性体系的数量不得超过总体系数量的80%。另一个方面,N的增加会使整个数字PCR体系具有较大的线性范围,并可以提高反应的灵敏度、稳定性以及可重复性。因此,目前dPCR都需要在成本可控的情况下,增加分配的腔室数和液滴数。

商业化dPCR平台及其特点

发展到现在,市面上常见的dPCR主要有两种:微滴式dPCR(droplet dPCR,ddPCR)和芯片式dPCR(chip dPCR,cdPCR)技术。由于芯片式dPCR制造芯片的成本较高,目前微滴式dPCR正越来越受到企业的认可。 宁波广东数字PCR正规代理

浚和(上海)仪器有限公司致力于仪器仪表,以科技创新实现***管理的追求。浚和作为仪器仪表、电气设备、环保设备、机械设备及配件、化工产品及原料(除危险化学品、监控化学品、民用物品、易制毒化学品)的销售,从事货物及技术的进出口业务,从事电子科技领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让,机械设备的维修。 【依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动】的企业之一,为客户提供良好的真空泵,喷雾干燥机,培养箱,等离子清洗机。浚和致力于把技术上的创新展现成对用户产品上的贴心,为用户带来良好体验。浚和始终关注仪器仪表市场,以敏锐的市场洞察力,实现与客户的成长共赢。

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