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数字PCR基本参数
  • 产地
  • 中国
  • 品牌
  • 永诺
  • 型号
  • MicroDrop-100
  • 是否定制
数字PCR企业商机

总结

数字 PCR 的优点:

  • 无需依赖参考物或标准品
  • 通过增加 PCR 平行样的总数可实现所需的精度
  • 高度耐受***剂
  • 能够分析复杂混合物
  • 与传统 qPCR 不同,数字 PCR 对出现的拷贝数呈线性反应,可以检测到较小倍数变化的差异。

实时荧光定量 PCR 的优点:

  • 提高检测的动态范围
  • 无需 PCR 后处理
  • 检测能够覆盖低至 2 倍的变化
  • 在 PCR 的指数期内采集数据
  • 报告基团荧光信号的增加与生成的扩增子数量成正比
  • 裂解探针提供扩增子的长久裂解记录

传统 PCR 的缺点: 样本多样性,样本通量可达96个样本,支持灵活设定。杭州数字PCR价格

  • 精确度差
  • 灵敏度低
  • 动态范围小 < 2 logs
  • 分辨率低
  • 非自动化
  • ***基于规格的区别分析
  • 结果未表示为数字
  • 使用溴化乙锭染色不足以定量
  • PCR 后处理
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MicroDrop-100数字PCR系统具有如下优点:

1、JUE对定量,结果判读不需要依赖标准曲线;

2、突破局限,检测灵敏度可低至万分之一;

3、专利设计的具有高精度复杂三维微纳防污染结构的微流控芯片,单张可同时处理1-8个样本;

4、一键式自动操作,20uL PCR体系可生成100,000微滴,8个样本单次微滴生成*需2分钟;

5、FAM、HEX(VIC)双荧光通道,半导体激光器做为激发光源相比LED光源,稳定性高,功率稳定不影响检测灵敏度,单色性能优异降低对检测特异性的影响,且方向性好;

6、检测器为2个光电倍增管,灵敏度及增益优于MPCC或CCD,普通的硅光子计数器,增益为10^5,光电倍增管增益可以达到10^9;

7、**知识产权的软件系统可直接计算拷贝数、拷贝数浓度,CNV 值,突变丰度;阈值线可自动或手动完成,每个样本可单独设定阈值线;输出数据图标、直方图、一维图、二维图、浓度图、95%置信度不确定性区间等;软件可自动识别复杂微滴分簇四簇;软件具备数据质控功能,支持阳性微滴数、阴性微滴数、总微滴数统计及这些指标的任意组合;单个样本100,000微滴的反应体系以及高灵敏度的检测系统,配以独特的软件系统,可以实现高达20重的PCR分析;

8、单次检测通量96个样本,操作灵活;

无锡JUE对定量数字PCR解决方案液体活检:早筛、用药、监测、复发。

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数字PCR是一种核酸分子***值定量技术,能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的***值定量。该试剂盒采用创新的一步法逆转录数字PCR技术,将*****的RNA逆转录及数字PCR扩增整合到一个反应体系,单管双检同时测定*****的两个**基因,消除***变异带来的漏检风险。

MicroDrop-100全新微滴式数字PCR系统为永诺生物旗下子公司永诺医疗自主研发的检测设备,此系统检测无需依赖标准物质,可达到***定量,具有超高灵敏度,检测灵敏度高达1个拷贝,且具有较好的重复性,降低同样本不同批次的检测差异。数字PCR结果采取终点判读法,相比荧光定量PCR的过程性读取可有效降低对PCR 扩增效率的依赖、降低PCR***物对检测结果的影响,对于复杂样本也能提供稳定的检测结果等特点,在******临床实验及***患者的治疗过程中可发挥重要作用。

**个体化诊疗

通过检测T790M位点突变情况,可以更好地评估一代TKI***的疗效及耐药情况并指导第三代TKI靶向药Osimertinib的使用。然而,由于qPCR平台ARMS检测技术的灵敏度有限,没有办法在含大量EGFR基因野生型背景核酸中高效准确的检测到T790M突变。这个时候dPCR技术展现出了****的检测精度,此外,dPCR***定量的优势也能充分发挥出来了,可以监控突变含量变化,做到及早发现耐药。

2.)基因表达分析

伊马替尼(Imatinib)可以有效帮助很多慢性髓细胞白血病(CML)患者延长生存期,但是临床上发现,伊马替尼的疗效与BCR-ABL1融合基因的转录产物表达量有很大的关系。研究人员采用dPCR对CML患者的BCR-ABL1融合基因转录产物进行测定,结果检测下限可以达到0.001%,显示出dPCR在痕量核酸检测方面比qPCR具有无可比拟的优势 数字PCR技术是公认的液体活检领域灵敏度比较好的检测方法。

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研究方向

基因表达差异研究

检测时完全不依赖传统的Ct值即可实现真正意义上的***定量,从而提供了比实时荧光定量PCR更精确的基因差异表达研究,尤其对于那些靶基因表达差异微小的情况:microRNA、lncRNAs等的表达分析、等位基因的不平衡表达、单细胞基因表达分析、Exosome内核酸分子定量分析等。


拷贝数变异(CNV)研究

微滴化的样品处理及检测,这种摆脱Ct值的计算方法而直接获取目标基因的***拷贝数,为拷贝数变异的研究提供了***的检测精度。是其他诸如二代测序、芯片杂交等平台无法达到的,因此采用数字PCR能够有效对NGS、aCGH的实验结果进行验证,并具有成本低、通量高的特点。


高灵敏度——数字PCR的灵敏度与同体积反应体系的分割份数成正比。上海永诺数字PCR原理

动物源性的检测分析。杭州数字PCR价格

研究方向

低丰度及稀有序列的精确定量

目前对于低丰度目标序列的检测,定量PCR、杂交、毛细管测序及NGS等方法都因受到背景DNA的干扰,使得检测灵敏度及精确性都达不到精细定量的要求(如定量PCR检测中Ct值大于33的情况下,其重复性就不是很高), 而微滴式数字PCR系统通过**的微滴化处理,使得稀有的核酸序列从大量的背景DNA中分离出来,从而提高了检测的灵敏度及重复性。

此外,由于样品微滴化处理的同时,也将样品中可能存在的***剂进行了分装,提高了数字PCR扩增对于***剂的耐受程度,因此可具体应用于很多临床样品(血液、尿液、粪便、痰液、脑脊液等)中对**核酸标记物的检测。一般而言,毛细管电泳和定量PCR的检测灵敏度约在10%;NGS的灵敏度可达到1%;而ddPCR的检测下限为0.001%。 杭州数字PCR价格

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研究方向甲基化含量鉴定作为表观遗传学研究中重要的一个研究方向——甲基化程度分析,现阶段有不同的方法或技术来进行研究:如传统的亚硫酸氢盐处理后的克隆测序统计法、抗体检测法、定量PCR检测法等。这些方法皆因方法学的问题而不能获得精确的定量,而微滴式数字PCR系统通过对样品的微滴化处理及目标因子的***拷贝数定量,为甲基化程度的精确定量检测提供了一种全新 的技术。*****的伴随诊断常用体液来源(如血液,胸腹水,唾液及尿液等)的待检标本中的DNA,有正常脱落体细胞和病变脱落细胞两种来源,前者的量远大于后者。通过微液滴处理能在每个微液滴中有效减少正常体细胞DNA的干扰,实现**标记物的有效检测,如EG...

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