使用可选择性移除保护基团的丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸残基可以实现选择性磷酸化。一些磷酰化试剂也可通过后修饰在多肽中引入磷酸基团[5]。近年来，有学者使用化学选择性的Staudinger-亚磷酸酯反应实现了赖氨酸的位点特异性磷酸化（图3）4、豆蔻酰化和棕榈酰化用脂肪酸酰化N末端可以让多肽或蛋白质与细胞膜结合。N末端上豆蔻酰化的序列可以使Src家族的蛋白激酶和逆转录酶Gaq蛋白靶向结合细胞膜。利用标准的偶联反应即可将豆蔻酸连接到树脂-多肽的N末端，生成的脂肽可在标准条件下解离并通过RP-HPLC纯化。5、糖基化糖肽类如万古霉素和***拉宁是***耐药细菌传染的重要***，其他糖肽常被用于刺激免疫系统。另外，由于很多微生物抗原是糖基化的，因此研究糖肽对提高传染的***效果具有重要意义。另一方面，有研究发现**细胞细胞膜上的蛋白质表现出异常的糖基化，这使得糖肽在**和**免疫防御研究中也发挥着重要作用。糖肽的制备一般利用Fmoc/t-Bu方法。糖基化残基，比如苏氨酸和丝氨酸常通过五氟苯酚酯活化的Fmoc保护糖基化氨基酸引入到多肽中。6、异戊二烯化异戊二烯化发生在C末端附近侧链上的半胱氨酸残基。蛋白质的异戊二烯化可以提高细胞膜亲和性，形成蛋白质-蛋白质相互作用。TritylOffAuto是仪器的原始状态若打算以5，—DMT基团连接纯化寡核苷酸，将其转变为TritylOnAuto结束状态。南京正规RNA合成仪价烙
11、为了确保合成仪上合成柱处于正确的位置，运行StartColumn步骤对每一个柱的位置进行检查。12、对是否充满连接在合成仪上的溶剂残留(废液瓶)进行检查。13、保证试管充分清洁干净，保证DMT废液管路通向分部收集器。14、将循环启动，运行开始程序对试剂管路进行清洗，将原来的试剂除去。日常维护1．流路节流阀应该1个月清洗1次节流阀，以避免阻塞，清洗时，先在水中煮沸15min，然后再在甲醇中超声波清洗。2．储液瓶需要保持氩气压力以及管路清洁。瓶子在亚磷酰胺及储液瓶位置上放置。3．瓶塞“O”形环zhi少对“O”形环一月检查一次，1年更换1次。比较仪器上的“O”形环与新的备用“O”形环，若有白色沉淀出现在“O”形环上，用棉花蘸取乙腈进行清洗。南京正规RNA合成仪价烙软件是“菜单驱动”，通过按适当的键，可选择一项，给予指令。
它们可在多肽合成中通过保护的氨基酸衍生物而引入。已经发展的氨基酸衍生物有赖氨酸、半胱氨酸、丝氨酸和酪氨酸。而门冬氨酸和谷氨酸衍生物由于在多肽合成和解离过程中很容易环化，因此并不常用。11、多聚抗原肽（MAP）短肽通常不具有免疫性，必须和载体蛋白耦合才能产生抗体。多聚抗原肽（MAP）由多个连接到赖氨酸核的相同多肽构成，能特异性表达***免疫原，可用来制备肽-载体蛋白耦联体。MAP多肽可以在MAP树脂上利用固相合成法分步合成。然而，不完整的耦合会在一些分支上产生遗失或截断肽链，因而表现不出原本MAP多肽的性质。作为替代性的方法，多肽可以单独制备和纯化然后再耦联到MAP上[14]。连接到多肽**上的多肽序列是明确的，并且很容易通过质谱表征。结语：多肽修饰是一种设计多肽的重要手段，经过化学修饰的多肽不仅可以维持较高的生物活性,而且能够有效地避免免疫原性和毒性方面的缺点，同时化学修饰可以赋予多肽一些新的优良性能。近年来，利用C-H活化的手段对多肽进行后期修饰的方法也得到了迅猛的发展，并取得了许多重要成果。
通常在多肽和生物素之间使用6-氨基己酸作为纽带，纽带能够灵活结合底物，并且在有空间位阻的情况下能结合地更好。9、荧光标记荧光标记可用于追踪活细胞内多肽，也可用于研究酶和作用机制。色氨酸（Trp）带有荧光，因此可以被用于内在标记。色氨酸的发射光谱取决于**环境，随着溶剂极性降低而降低，这种性质对于检测多肽结构和受体结合很有用处[12]。色氨酸荧光可以被质子化的门冬氨酸和谷氨酸淬灭，这可能会限制其使用。丹磺酰氯基团（Dansyl）与氨基结合时具有高度荧光，也常被用于氨基酸或蛋白质的荧光标记。荧光共振能量转换（FRET）对酶的研究十分有用，应用FRET时，底物多肽常含有一个荧光标记基团和一个荧光淬灭基团。标记的荧光基团会被淬灭剂通过非光子能量传递淬灭。当多肽从所研究的酶上解离下来，标记基团就会发射荧光。10、笼形多肽笼形多肽有光学移除性的保护基，光学移除性保护基可以屏蔽多肽与受体的结合。当受到UV照射时，多肽会被活化，恢复与受体的亲和力。由于这种光学活化可以根据时间、振幅或者位置来控制，因而笼形多肽可以被用于研究细胞内发生的反应[13]。**常用于笼形多肽的保护基是2-硝基苄基及其衍生物。以代码代替相应的DNA序列标记每一个收集瓶。
对合成的引物先进行稀释，现将方法简单叙述如下：：OligoDNA中的每个脱氧核苷酸碱基的平均分子量近似为，则一条OligoDNA的分子量=碱基数×。例：您得到一管标为5OD260的20merOligoDNA分子量=20×质量数=5×33=165μg摩尔数=165/6490=μmol=25nmol若加除菌双蒸水400μl溶解，则浓度为25nmol/400μl=μ，这是指在1ml体积1cm光程标准比色皿中，260nm波长下吸光度为1A260的Oligo溶液定义为1OD260单位，根据此定义，1OD260单位相当于33μg的OligoDNA，您可以根据此数据和您的OligoDNA分子量，计算得到摩尔数以计算不同摩尔浓度的溶液。3.引物序列的分子量计算公式如下：MW=（A碱基数×312）+（C碱基数×288）+（G碱基数×328）+（T碱基数×303）-61例如：引物TGGGCGGCGGTTGGTGTTACGA=1C=3G=11T=6MW=（1×312）+（3×328）+（6×303）-61=65414.装有引物的eppendorf管一般保存于-20℃，临用前稀释。5.由于OligoDNA呈很轻的干膜状附在管壁上，打开时极易散失，所以打开管子前请先离心10,000rpm,1min,然后再慢慢打开管盖。6.在装有引物的eppendorf管内加入100-500μl双蒸水，盖上管盖，充分上下振荡5-10分钟，再次离心10,000rpm,1min。7.计算原引物管primer的浓度。以亚磷酰胺寡核苷酸合成为例介绍该类仪器的一般操作步骤。南京正规RNA合成仪价烙
按产物承载容器分，可分为需要一次性合成柱，无需一次性合成仪两类。南京正规RNA合成仪价烙
13)如果分部收集器用来收集每个DMT脱保护步骤的流出物，确保试管充分清洁干净，并打开分部收集器，确保DMT废液管路通向分部收集器。14)启动循环，运行开始程序清洗试剂管路，除去原来的试剂。注意：TritylOnAuto表示在合成寡核苷酸的5’端核苷酸带有一个DMT，并将其从固相载体上切下来，储存在收集瓶中；TritylOffAuto表示在合成寡核苷酸的5，端核苷酸没有保护基团，将其从固相载体上切下来，储存在收集瓶中；TritylOnManual表示合成寡核苷酸的5’端核苷酸带有一个DMT，寡核苷酸没有从固相载体上切下来，而是保留在合成柱中；TritylOffManual表示在合成寡核苷酸的5，端核苷酸没有保护基团，寡核苷酸没有从固相载体上切下来，而是保留在合成柱中。DNA合成仪日常维护编辑1．瓶塞“O”形环一月检查一次“O”形环，**少1年更换1次。将新的备用“O”形环与仪器上的相比较，如果在“O”形环上出现白色沉淀，用棉花蘸取乙腈，进行清洗。更换“O”形环的步骤如下：用止血钳夹住“O”形环，从槽中取下(或用牙签钩下)，注意不要损坏托住“O”形环的白色聚氟乙烯插塞(tefloninsert)；确保插塞上没有颗粒后，用手指将新“O”形环推进槽，进行压力实验。南京正规RNA合成仪价烙
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