使用紫外可见分光光度计进行定量和定性分析需注意以下一些问题:1吸光度读数范围:吸光度测量误差在透过率过大或过小时都会变大,为了满足定量分析的误差要求(<5%),在定量分析时要求吸光度应在一定的范围内,这个范围的具体值与仪器性能有关,主要是与紫外可见分光光度计检测系统噪声大小有关,但通常都在0.1~1.0范围内,如果仪器的档次更低,则范围更窄。根据朗伯比尔定律,影响吸光度大小的因素主要是样品摩尔吸光系数,浓度和比色皿光程。实验中吸光度过大的样品可通过稀释样品使吸光度到所需范围内。如果样品不能稀释,可以改用光程较小的比色皿减小吸光度。吸光度过小的样品可使用光程较大的比色皿以增大吸光度。紫外可见光的范围内,对于一个特定的波长,吸收的程度正比于试样中该成分的浓度,可以进行定性分析。民用紫外可见分光光度计比较
紫外分光光度计做不准?比色皿出错了呗。一文了解比色皿的正确使用,配对,洗涤。
比色皿(cuvette)是一种用于光谱分析的装备仪器。常用的主要是由石英粉烧制的石英比色皿和普通硅酸盐光学玻璃制成的透光面比色皿。
当然也有微量、半微量、荧光等比色皿出现。
石英比色皿(Q/S):适用波长范围在190nm-2500nm(适用于紫外、可见、近红外光区)价格较玻璃比色皿较贵
玻璃比色皿(G):适用波长范围320nm-2500nm(不适用于紫外光区),价格相对便宜
由上述数据可以看出石英比色皿完全可以代替玻璃比色皿使用,如果不用紫外区的话,用普通玻璃比色皿就行了,一则浪费没必要,二则,嘿嘿,摔碎了也不心疼。至于微量、半微量、荧光等比色皿不常用就不在说了。 浙江紫外可见分光光度计在分光光度计的使用或检定中,透射比(吸光度)的准确度直接关系到所测数据的可信性及科学性。
光学构造(OPTICAL CONFIGURATION)一般来说,紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。顾名思义,单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物,然后再通过实际样品溶液,就能得到吸光结果。
双光束型则是通过一个斩光轮(mirrored chopper wheel)将一束光分成两束,分别测量对照样品和实际样品。可MIN光漂移(lamp drift)和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮,而是利用一种光束分光器来代替,将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度,所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。
常见的可见分光光度计和紫外可见分光光度计的型号有哪些?
可见分光光度计常见的有721系列,722系列和723系列。721系列可见分光光度计有721/721-100型,测定波长为360-800nm,分为分指针和数显式两种方式的显示器。其中721-100型相对于721是型将测试样品室加宽,可用10cm的比色皿,为糖厂**检测仪器。722系列可见分光光度计有722/722S/722N型,测定波长为330-1000nm/325-1000nm。722型波长是330-1000nm,722S与722N的波长范围325-1000nm,其中722N是自动调节波长。723系列可见分光光度计有723/723N/723PC/723PCS型四种,测定波长为320-1000nm,其中723是手动调整波长,723N是自动调波长,723PC配有扫描软件,723PCS带有扫描软件和打印机。紫外可见分光光度计常见的是UV752/UV752N,波长范围是195nm-1020nm。二者主要区别是UV752N可以选配打印机将数据输出,其中在杂散光参数,光谱带宽等方面还有细微的差别。 自从60年前紫外分光光度计出现在实验室的工作台之后,已经形成了一种能解决大多数难题的仪器。
定性定量。利用特定的吸收峰,快速对待测样品进行定性和定量分析。如聚六亚甲基双胍盐酸盐的检测。利用双波长,以很快的速度辨别是单胍还是双胍,并进行粗略定量。这是液相色谱无论如何也做不到的。
测定透过率。透光率是一个物理词汇,是表示光线透过介质的的能力,是透过透明或半透明物体的光通量与其入射光通量的百分率。吸光度与透过率的换算公式
透过率对于某些原料检测是非常实用的,可对此类原料品质进行总体把控。
杂质的检测。通过前处理将杂质与主成分分离后,进行紫外分光光度测定,可很快得到该杂质的含量。以桑普实验室这十几年对苯氧乙醇中杂质苯酚的测定方法改进过程为例:
之后建立了4-氨基安替比林比色法,可实现对苯氧乙醇含量20、40、60、80、100ppm的区分;紫外分光光度法
期间同时采用EP中紫外分光光度法,并将其进行适当改进,作为修订后的企标。该方法便利快速,可实现50ppm以上的定量检测。HPLC-DAD
近两年,桑普对产品品质把控更严格,希望能实现几个ppm的定量检测。所以采用了HPLC-DAD作为企标对其检测。 紫外可见分光光度计应安装在太阳不能直接晒到的地方,以免“室光” 太强,影响仪器的使用寿命。全自动紫外可见分光光度计怎么样
为了测量吸光值,分光光度计制造商通常使用光电倍增管(photo-multiplier tubes,PMTs)和光敏二极管。民用紫外可见分光光度计比较
分光光度计作为一种精密仪器,在运行工作过程中由于工作环境、操作方法等种种原因,其技术状况必然会发生某些变化,可能影响设备的性能,甚至诱发设备故障及事故。因此,分析工作者必须了解分光光度计的基本原理和使用说明,并能及时发现和排除这些隐患,对已产生的故障及时维修才能保证仪器设备的正常运行。
紫外可见分光光度计--使用经验
若大幅度改变测试波长,需稍等片刻,等灯热平衡后,重新校正“0”和“100%”然后再测量。
指针式仪器在未接通电源时,电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况,需进行机械调零。
比色皿使用完毕后,请立即用蒸馏水冲洗干净,并用干净柔软的纱布将水迹擦去,以防止表面光洁度被破坏,影响比色皿的透光率。
操作人员不应轻易动灯泡及反光镜灯,以免影响光效率。
1900型等分光光度计,由于其光电接收装置为光电倍增管,它本身的特点是放大倍数大,因而可以用于检测微弱光电信号,而不能用来检测强光。否则容易产生信号漂移,灵敏度下降。
针对其上述特点,在维修、使用此类仪器时应注意不让光电倍增管长时间暴露于光下,因此在预热时,应打开比色皿盖或使用挡光杆,避免长时间照射使其性能漂移而导致工作不稳。 民用紫外可见分光光度计比较
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