紫外可见分光光度计的工作原理是由光源发出连续辐射光,经单色器按波长大小色散为单色光,单色光照射到吸收池,一部分被样品溶液吸收,未被吸收的光经检测器的光电管将光强度变化转变为电信号变化,并经信号显示系统调制放大后,显示或打印出吸光度A(或透射比T),完成测定。
一、光源
光源是提供符合要求的入射光的装置,紫外可见分光光度计可见光区常用的光源为钨灯,紫外光区常用的光源为氢灯或氘灯。
1.1.钨灯
钨灯是常用的可见光光源,它可发射的波长为325~2500nm的连续光谱,其中适宜的使用波长范围为320~1000nm,因此,也可用做近红外光源。电能将钨灯加热到白炽时,发出的光强度在各波段的分布随灯丝温度而变化。灯丝的温度取决于电源电压。电源电压的微小波动都会引起钨光强度的很大变化。因此必须使用稳压电源供电,钨灯工作电压为12V,也可以使用12V的直流电源供电。钨灯的寿命一般可达10000小时以上。
目前很多光度计采用卤钨灯代替钨灯,如7230G型、752PLUS型分光光度计等。卤钨灯具有较高的发光效率和较长的使用寿命。 紫外可见分光光度计主要由光源系统、单色器系统、样品室、检测系统组成。建材紫外可见分光光度计卖价
定性定量。利用特定的吸收峰,快速对待测样品进行定性和定量分析。如聚六亚甲基双胍盐酸盐的检测。利用双波长,以很快的速度辨别是单胍还是双胍,并进行粗略定量。这是液相色谱无论如何也做不到的。
测定透过率。透光率是一个物理词汇,是表示光线透过介质的的能力,是透过透明或半透明物体的光通量与其入射光通量的百分率。吸光度与透过率的换算公式
透过率对于某些原料检测是非常实用的,可对此类原料品质进行总体把控。
杂质的检测。通过前处理将杂质与主成分分离后,进行紫外分光光度测定,可很快得到该杂质的含量。以桑普实验室这十几年对苯氧乙醇中杂质苯酚的测定方法改进过程为例:
之后建立了4-氨基安替比林比色法,可实现对苯氧乙醇含量20、40、60、80、100ppm的区分;紫外分光光度法
期间同时采用EP中紫外分光光度法,并将其进行适当改进,作为修订后的企标。该方法便利快速,可实现50ppm以上的定量检测。HPLC-DAD
近两年,桑普对产品品质把控更严格,希望能实现几个ppm的定量检测。所以采用了HPLC-DAD作为企标对其检测。 食品安全紫外可见分光光度计销售厂家紫外分光光度计仪器使用一定周期后,由维修工程师或在工程师指导下定期开启仪器外罩对内部进行除尘工作。
关于吸光度测定重复性的问题分光光度计在测定过程中,发现同一个溶液在不同时问里其测定结果不同,即重复性不好,其原因是什么?排除测定错误因素外,可能原因有:(1)仪器预热时间不够或预热方法不对所造成,应延长预热时间或采用正确的预热方法。
(2)光电转换器(如光电管)因长时间使用其光电转换效率发生了变化导致。这时标准溶液与待测溶液的吸光度都同样变低,在相对定量时对结果影响很小。但是对这类仪器,一般建议连续使用时间不应超过3h,若需长时间使用,间歇30min。
紫外-可见分光光度计(UV)引用新型技术,其功能强大,采用单色器技术,波长范围190-1100nm,是各种涉及水和废水分析领域的通用仪器,应用范围包括市政和工业废水,饮用水,加工过程用水,地表水,冷却水和锅炉补给水等。
在水和废水监测中的应用,对于一个水系的监测分析和综合评价,一般包括水相(溶液本身)、固相(悬浮物、底质)、生物相(水生生物)。在水质的常规监测中,紫外可见分光光度法占有较大的比重。由于水和废水的成分复杂多变,待测物的浓度和干扰物的浓度差别很大,在具体分析时必须选择好分析方法。
在农产品和食品分析中可用于检测的组分或成分有蛋白质、赖氨酸、葡萄糖、维生素C、硝酸盐、亚硝酸盐、砷、汞等;
在植物生化分析中可用于检测叶绿素、全氮和酶的活力等;
在饲料分析中可用于检测烟酸、棉酚、磷化氢和甲酯等。原理紫外可见吸收光谱主要产生于分子价电子在能级间的跃迁。利用一定频率的紫外--可见光照射被分析的物质,引起分子中价电子的跃迁,它将有选择地被吸收。吸收光谱可以反映出物质的特征。它对物质进行定性分析、定量分析及结构分析,所依据的光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。 初次使用紫外可见分光光度计的人员,一般来说,一定要详细阅读仪器安全操作手册。
当以空白试剂为参比调节仪器零点时,比色皿窗材料的吸收、内外窗面的散射以及溶剂的吸收等都被抵消,所得吸光度值完全由显色溶液中待测离了浓度所决定。此时吸光度值与试液浓度一般呈线性关系。吸光度值与测定浓度不成直线关系,发生向下弯曲(负偏离)或向上弯曲(正偏离)的现象而偏离朗伯一比尔定律的主要原因如下。
(1)非单色光的影响:紫外一可见分光光度讣使用连续光源和分光器分光,不可能得到真正理想的单色光;为保证在测量中能得到充分的光强,仪器必须保持一定的狭缝宽度。由狭缝射出后投射到被测物质上的光,是一个有限宽度的谱带——光谱通带。随光谱通带宽度的增大,吸收光谱的分辨率降低,并偏离朗伯一比尔定律。
(2)非吸收光的影响:当来自出射狭缝的光的光谱通带宽度大于吸收光谱谱带时,投射在被测物质上的光就含有非吸收光。这不仅能使灵敏度降低,且能使校准曲线向横坐标轴弯曲而偏离朗伯一比尔定律。 分光光度计的氘灯和汞灯是在不同波长的时候有程序控制自动变换的,一般是在360nm处变换。材料紫外可见分光光度计对比
分光光度计元器件方面,经历了棱镜、机刻光栅和全息光栅,商品化的全息闪耀光栅已迅速取代一般刻划光栅。建材紫外可见分光光度计卖价
原子吸收分光光度计与紫外可见分光光度计的区别介绍
原理:
原子吸收观察的是构成物质的元素(原子)中的电子在原子轨道中的跃迁,属于原子吸收.
紫外可见光吸收观察的是构成物质的分子中的电子在分子轨道中的跃迁,属于分子吸收.
能量:
两者有所同,又有所不同。定量分析的原则同,而测量所需的光能量不同:
原子吸收为X射线,能量大,可激发电子从低的原子轨道向高的原子轨道跃迁.
紫外可见吸收为紫外光及可见光,能量小,只能激发电子从分子轨道向MAX低(或次低)的空的分子轨道跃迁。
通俗的说,原子吸收分光光度计是用较高的温度来燃烧分子,使之原子化(变为基态原子),再通过特征辐射,把基态原子激发,并吸收能量,通过这个能量差(透过率)来计算出浓度。而紫外—可见分光光度计是通过显色剂(一种能和我们被测元素产生络合反应的分子),与我们的被测元素产生反应,并且反应物分子带有特定的颜色,经过分子吸收氘灯(紫外区)或钨灯(可见区)的照射,吸收灯发射的能量,通过能量差(透过率)来计算出浓度。 建材紫外可见分光光度计卖价
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