杭州MicroDrop-100数字PCR原理

定量PCR和数字PCR的特点：

关于甲基化含量的鉴定。杭州MicroDrop-100数字PCR原理

MicroDrop-100微滴式数字PCR是具有国内自主知识产权的第三代JUE对定量PCR系统，整套系统由MicroDrop-100A微滴生成仪、 MicroDrop-100B微滴检测仪以及结果数据分析设备等构成。系统通过自主设计的微流控芯片，利用油水相不兼容的原理，在2分钟时间内将PCR体系分割成100,000油包水的体系，每个体系为**的PCR反应体系，体积约为0.2nL，单次实验一次可生成8个样本的油包水体系。由于油包水体系的分割效应，使得数字PCR受PCRYi制物的影响相对较小，有利于复杂环境样本的实验操作。区别于荧光定量PCR的过程性判读方法，数字PCR结果判读为终点法，故其对PCR扩增效率的依赖也相对较小。  

南京微滴式数字PCR报价您了解数字PCR仪的优势吗？

数字PCR采用的策略概括起来非常简单，就是“分而治之”（divide and conquer）［1］，这种做法非常类似于计算机科学中的“分治算法”，将一个标准PCR反应分配到大量微小的反应器中，在每个反应器中包含或不包含一个或多个拷贝的目标分子( DNA模板) ，实现“单分子模板PCR扩增”，扩增结束后，通过阳性反应器的数目“数出”目标序列的拷贝数。在实际的数字PCR实验中，事实上是通过呈现两种信号类型的反应器比例和数目进行统计学分析，计算出原始样本中的模板拷贝数。 

与常规PCR方法相比，数字PCR有如下优势：

1. 能够***定量：常规PCR定量需要制定已知拷贝数的标准DNA曲线，但是由于待检样本与标准曲线不在统一体系，条件上会存在差异，另外加上PCR扩增效率的差异从而影响定量结果的准确性。而数字PCR不受标准曲线和扩增动力学影响，可进行***定量。

2. 样本需求量低：适用于珍贵样本或核酸降解严重的样本

3. 灵敏度高：数字PCR是将传统PCR反应体系分割成数万个**PCR反应，这些反应可以精确地检测很小的目的片段差异、单拷贝甚至低浓度的混杂样本。且能避免非同源异质双链的形成。

4. 高耐受性：由于目的序列被分配到多个**反应体系中，***降低了背景信号和***物对反应的干扰，扩增基质效应大大减小。 CRISPR-Cas9基因编辑结果验证。

研究方向

甲基化含量鉴定

作为表观遗传学研究中重要的一个研究方向——甲基化程度分析，现阶段有不同的方法或技术来进行研究：如传统的亚硫酸氢盐处理后的克隆测序统计法、抗体检测法、定量PCR检测法等。这些方法皆因方法学的问题而不能获得精确的定量，而微滴式数字PCR系统通过对样品的微滴化处理及目标因子的***拷贝数定量，为甲基化程度的精确定量检测提供了一种全新的技术。

 *****的伴随诊断

常用体液来源(如血液，胸腹水，唾液及尿液等)的待检标本中的DNA，有正常脱落体细胞和病变脱落细胞两种来源，前者的量远大于后者。通过微液滴处理能在每个微液滴中有效减少正常体细胞DNA的干扰，实现**标记物的有效检测，如EGFR，ALK，ROS1，KRAS、BRAF等基因的突变检测、乳腺*/胃*的HER2基因扩增检测等，应用于**精细医学的伴随诊断。 转基因食品检测（国标）。宁波广东数字PCR代理商

MicroDrop™数字PCR是拥有完全自主知识产权的微滴式数字PCR仪。杭州MicroDrop-100数字PCR原理

MicroDrop-100数字PCR系统具有如下优点：

1、JUE对定量，结果判读不需要依赖标准曲线；

2、突破局限，检测灵敏度可低至万分之一；

3、专利设计的具有高精度复杂三维微纳防污染结构的微流控芯片，单张可同时处理1-8个样本；

4、一键式自动操作，20uL PCR体系可生成100,000微滴，8个样本单次微滴生成*需2分钟；

5、FAM、HEX（VIC）双荧光通道，半导体激光器做为激发光源相比LED光源，稳定性高，功率稳定不影响检测灵敏度，单色性能优异降低对检测特异性的影响，且方向性好；

6、检测器为2个光电倍增管，灵敏度及增益优于MPCC或CCD,普通的硅光子计数器，增益为10^5，光电倍增管增益可以达到10^9；

7、**知识产权的软件系统可直接计算拷贝数、拷贝数浓度，CNV 值，突变丰度；阈值线可自动或手动完成，每个样本可单独设定阈值线；输出数据图标、直方图、一维图、二维图、浓度图、95%置信度不确定性区间等；软件可自动识别复杂微滴分簇四簇；软件具备数据质控功能，支持阳性微滴数、阴性微滴数、总微滴数统计及这些指标的任意组合；单个样本100,000微滴的反应体系以及高灵敏度的检测系统，配以独特的软件系统，可以实现高达20重的PCR分析；

8、单次检测通量96个样本，操作灵活；

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