分光光度计的带宽(bandwidth)很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。
为了测量吸光值,分光光度计制造商通常使用光电倍增管(photo-multipliertubes,PMTs)和光敏二极管。PMTs提供快速的反应时间和良好的灵敏度,并且可以在紫外光谱调节至特定的范围。但一些制造商依赖于光敏二极管的动态范围在数秒内行使所有的光谱测量。 实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。紫外可见分光光度计排名
使用紫外可见分光光度计进行定量和定性分析需注意以下一些问题:1吸光度读数范围:吸光度测量误差在透过率过大或过小时都会变大,为了满足定量分析的误差要求(<5%),在定量分析时要求吸光度应在一定的范围内,这个范围的具体值与仪器性能有关,主要是与紫外可见分光光度计检测系统噪声大小有关,但通常都在0.1~1.0范围内,如果仪器的档次更低,则范围更窄。根据朗伯比尔定律,影响吸光度大小的因素主要是样品摩尔吸光系数,浓度和比色皿光程。实验中吸光度过大的样品可通过稀释样品使吸光度到所需范围内。如果样品不能稀释,可以改用光程较小的比色皿减小吸光度。吸光度过小的样品可使用光程较大的比色皿以增大吸光度。三用紫外可见分光光度计销售厂家紫外可见分光光度计,可以通过更换光源分别形成可见和紫外光区,测定的波长在200~1000nm。
紫外可见分光光度计使用中常见问题解析在一般分光光度计的使用说明书上,要求仪器预热时间约20分钟;若是带微处理器的分光光度计,开机后仪器自动进入自检(初始化)状态,约需1O分钟左右。在分光光度计预热这个环节上,很多使用者或多或少存在问题,如开机只预热电路系统(不调节波长、打开吸收池暗箱盖预热等)或认为初始化过程就是预热等等。对带微处理器有自检功能的分光光度计,开机后仪器自检(初始化)结束后,在测定窗口上,设置所需波长值,用一个吸收池装上纯净水置于光路上,调“0000A”后,预热仪器,当仪器显示读数不再变化后即可进行测定。
对于紫外可见分光光度计,由于有双光源(钨灯与氘灯),为了延长灯的使用寿命,开机自检完成后可以关掉测定时不用的光源灯。
使用紫外可见分光光度计时需要注意哪些方面?
1、使用的吸收池必须洁净,并注意配对使用。量瓶、移液吸管均应校正、洗净后使用。
2、取吸收池时,手指应拿毛玻璃面的两侧,装盛样品以池体的4/5为度,使用挥发性溶液时应加盖,透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净,检视应无溶剂残留。吸收池放入样品室时应注意方向相同。用后用溶剂或水冲洗干净,晾干防尘保存。
3、供试品溶液浓度除各该品种已有注明外,其吸收度以在0.3~0.7之间为宜。
4、测定时除另有规定外,应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照,采用1cm石英吸收池,在规定的吸收峰±2nm以内,测几个点的吸收度或由仪器在规定的波长附近自动扫描测定,以核对供试品的吸收峰位置是否正确,并以吸收度MAX的波长作为测定波长,除另有规定外吸收度MAX波长应在该品种项下规定的测定波长±2nm以内。
5、供试品应取2份,如为对照品比较法,对照品一般也应取2份。平行操作,每份结果对平均值的偏差应在±0.5%以内。
6、选用仪器的狭缝宽度应小于供试品吸收带的半宽度,否则测得的吸收度值会偏低,狭缝宽度的选择应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准,对于大部分被测品种,可以使用2nm缝宽。 现在的许多紫外分光光度计装的是“长寿”型灯源,据说氘灯可达2000小时,钨灯3000小时。
杂散光:典型值是0.01~0.05%T,在国外的产品中有65种产品的杂散光指标在这一范围中。杂散光超过0.05%T的产品有31种,小于0.01%T的产品有19种。。从其光学设计看,都采用了双单色器。与扫描光栅型产品相比,固定光栅的分光光度计少了出射狭缝,实现低杂散光的难度更大。从性能指标来看,范围是0.01~1%T。26种固定光栅型产品中杂散光在0.01~0.05%T之间的有13种,也已达到半数,但是能够低于0.01%T的很少。波长准确性,国外的典型水平是0.1~1nm。国内产品中,处于此范围的有16种,基本达到同一水平,但没有优于0.1nm的产品。国内产品的光度准确性大多以透过率表示,水平比较接近,均在0.3~0.5%T之间。在10%T处,也就是吸光度为1A处,将光度准确性以吸光度表示,则数值为0.013~0.021A。与国外产品有比较明显的差距。国内产品的光度重复性基本在0.1~0.3%T范围,同样在吸光度1A处换算,数值为0.004~0.013A,也存在距离。比较国外与国内产品的杂散光的典型值,两者几乎相差了一个数量级。但是已有一些较新研发的产品,可以达到国外产品的普遍水准。 在大部分的样品类型中,分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。高校紫外可见分光光度计选择
为了选择合适的狭缝宽度,应以减少狭缝宽度时紫外分光光度计试样的吸光度不再增加为准。紫外可见分光光度计排名
当你什么都不了解的情况下,只选贵的,准没错。在某种程度上,这句话具有一定的适用性。但是,新型仪器一般价格较贵,如果过度放宽仪器预算,而追加经费采购不需要的配件也是一种浪费。如何快速简单的掌握紫外可见分光光度计的特性,从而进行合适的采购定位,小编将所需要的知识点总结如下。
认识紫外可见光分光光度计使用范围。任何一台仪器都不是解决所有问题的同一把钥匙。多问自己几个问题:需要一台什么样的仪器,要用它来做什么,分析的样品的形态、所需要的测试范围以及精度要求在哪里等等。理清楚这些,仪器的基本轮廓就画出来了。
紫外可见光分光光度计作为一种常规的实验室分析仪器,可以常用于无机物、有机物的定性定量分析,所使用的科研领域包括:科研、制药、化工、环保、卫生等需要分析的关键领域。 紫外可见分光光度计排名
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