什么是紫外可见分光光度计?紫外可见分光光度计是一类很重要的分析仪器,无论在物理学、化学、生物学、医学、材料学、环境科学等科学研究领域,还是在化工、医药、环境检测、冶金等现代化生产与管理部门,紫外可见分光光度计都有重要的应用。
分光光度计是杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人在1854年将朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律应用于定量分析化学领域,并且设计了第1台比色计。到1918年,美国国家标准局制成了第1台紫外可见分光光度计。此后,紫外可见分光光度计经不断改进,又出现自动记录、自动打印、数字显示、微机控制等各种类型的仪器,使光度法的灵敏度和准确度也不断提高,其应用范围也不断扩大。紫外可见分光光度法从问世以来,在应用方面有了很大的发展,尤其是在相关学科发展的基础上,促使分光光度计仪器的不断创新,功能更加齐全,使得光度法的应用更拓宽了范围。目前,分光光度法已为工农业各个部门和科学研究的各个领域所采用,成为人们从事生产和科研的有力测试手段。目前市场上有两类主流产品:扫描光栅式分光光度计和固定光栅式分光光度计。
分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。紫外可见分光光度计排行
关于波长准确度的检查与校正日常在使用分光光度计时,是否要经常进行仪器波长准确度的检查?答案是否定的。当在日常测定中发现仪器测定灵敏度下降,这时才应进行波长准确度的检查,简易的检查方法(粗检)是:仪器开机后,调节波长为580nm,在吸收池座的通光道中插入一张白色卡片纸,若能观察到一长方形的黄色光斑,说明波长准确度属正常范围,否则就应进行波长校正。当仪器经过长途搬运、受过机械振动或更换光源灯泡后,必须进行波长准确度的检查与校正。粗检同上,其校正方法有:干涉滤光片或镨钕滤光片校正法、利用氘灯的特征发射线校正法。具体步骤可参考仪器使用说明书。工厂紫外可见分光光度计代理光学构造和光源、探测方法、样品类型和数据处理等都是要考虑的因素。
掌握紫外可见光分光光度计基本工作原理:一定频率紫外可见光照射所需要分析的目标样品,引起目标样品中价电子发生跃迁,从而变现随着吸收波长变化而引起光谱变化,形成可供分析数据。
以朗伯-比耳定律(Lambert-beer)为理论基础,特定波长吸收中,吸收程度正比于试样成分浓度,因此,可进行光谱的定性分析。且根据吸收与已知浓度标样比较,能进行定量分析。
紫外可见光分光光度计种类及优缺点对比:传统机型:单光束UV、全程密闭、以光栅进行分光,标样和测试样品分别测试,全波段扫描时间至多2min;比例双光束UV:单光束UV,全程密闭、经光栅再经棱镜,全程密闭、标样和测试样品分别测试、测试灵敏度降低,全波段分析时间长。
光源和检测方法(LIGHTSOURCESANDDETECTION)分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。例如AmershamBiosciencesofPiscataway公司的GeneQuantII能在230、260、280、320、595和600nm的波长下测量样品。果果需要更大的灵活性,研究者可以考虑一种更高性能的宽光谱仪器,可以程序性地进行ELISAs分析和比色分析。
紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长,通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。VarianofPaloAlto公司的CaryDeepUV和HitachiHighTechnologiesofTokyo的U-7000AutomatedVacuumUVSystem就是这样的仪器。
一些仪器具有多种光源供选择:紫外光、可见光和甚至红外光(780nm至3,000nm)。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分(大约380nm到800nm)。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。按所吸收光的波长区域不同,分为紫外分光光度法和可见分光光度法,合称为紫外-可见分光光度法。
紫外可见分光光度计的比色皿的洗涤方法
1分光光度法中比色皿洁净与否是影响测定准确度的因素之一。因此,必须重视选择正确的洗净方法。
俺的经验是:要是你测定溶液是酸,如果不干净,就用弱碱溶液洗,要是你测定溶液是碱,如果不干净,就用弱酸溶液洗,要是你测定溶液是有机物质,如果不干净,就用有机溶剂,比如酒精等溶液洗。
2选择比色皿洗涤液的原则是去污效果好,不损坏比色皿,同时又不影响测定。
2.1分析常用的铬酸洗液不宜用于洗涤比色皿,这是因为带水的比色皿在该洗液中有时会局部发热,致使比色皿胶接面裂开而损坏。同时经洗液洗涤后的比色皿还很可能残存微量铬,其在紫外区有吸收,因此会影响铬及其他有关元素的测定。
一般主张使用硝酸和过氧化氢(5:1)的混合溶液泡洗,然后用水冲洗干净。对一般方法难以洗净的比色皿,还可以采取以下两种方法。
2.2先将比色皿侵入含有少量阴离子表面活性剂的碳酸钠(20克/升)溶液泡洗,经水冲洗后,再于过氧化氢和硝酸(5:1)混合溶液中侵泡半小时。 紫外分光光度计的光栅是一系列等宽、等距离的平行狭缝,以光的衍射现象和干涉现象为基础。国产**紫外可见分光光度计经销商
紫外-可见分光光度法是利用某些物质的分子吸收200--800nm光谱区的辐射来进行分析测定的方法。紫外可见分光光度计排行
原子吸收分光光度计与紫外可见分光光度计的区别介绍
原理:
原子吸收观察的是构成物质的元素(原子)中的电子在原子轨道中的跃迁,属于原子吸收.
紫外可见光吸收观察的是构成物质的分子中的电子在分子轨道中的跃迁,属于分子吸收.
能量:
两者有所同,又有所不同。定量分析的原则同,而测量所需的光能量不同:
原子吸收为X射线,能量大,可激发电子从低的原子轨道向高的原子轨道跃迁.
紫外可见吸收为紫外光及可见光,能量小,只能激发电子从分子轨道向MAX低(或次低)的空的分子轨道跃迁。
通俗的说,原子吸收分光光度计是用较高的温度来燃烧分子,使之原子化(变为基态原子),再通过特征辐射,把基态原子激发,并吸收能量,通过这个能量差(透过率)来计算出浓度。而紫外—可见分光光度计是通过显色剂(一种能和我们被测元素产生络合反应的分子),与我们的被测元素产生反应,并且反应物分子带有特定的颜色,经过分子吸收氘灯(紫外区)或钨灯(可见区)的照射,吸收灯发射的能量,通过能量差(透过率)来计算出浓度。 紫外可见分光光度计排行
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