关于吸光度测定重复性的问题分光光度计在测定过程中,发现同一个溶液在不同时问里其测定结果不同,即重复性不好,其原因是什么?排除测定错误因素外,可能原因有:(1)仪器预热时间不够或预热方法不对所造成,应延长预热时间或采用正确的预热方法。
(2)光电转换器(如光电管)因长时间使用其光电转换效率发生了变化导致。这时标准溶液与待测溶液的吸光度都同样变低,在相对定量时对结果影响很小。但是对这类仪器,一般建议连续使用时间不应超过3h,若需长时间使用,间歇30min。 分光光度计的氘灯和汞灯是在不同波长的时候有程序控制自动变换的,一般是在360nm处变换。国产紫外可见分光光度计现货
光栅实现上就是一系列等宽、等距离的平行狭缝,它是利用光的衍射与干涉作用制成的。光栅作为色散元件具有不少独特的优点,光栅单色器的分辨率比棱镜单色器的分辨率高,可精确到0.2nm,而且可用的波长范围也比棱镜单色器的范围宽。所以,目前生产的紫外可见分光光度计大多采用光栅作为色散元件。
吸收池是用于盛装待测液并决定待测溶液透光液层厚度的器皿,又称比色皿。吸收池一般为长方体,也有圆形或其它形状的。其底及两侧为毛玻璃,另两面为光学透光面。根据光学透光面的材质,吸收池又可分为玻璃吸收池和石英吸收池两种。玻璃吸收池用于可见光区测定,石英吸收池用于紫外光区的测定。吸收池的规格以光程为标志。常用的吸收池规格有0.5cm、1.0cm、2.0cm、3.0cm、5.0cm等。 司法检测紫外可见分光光度计选择测量吸光度并不是测量透过吸收池的光强度,而是将光强度转换成电流进行测量,称为紫外分光光度计的检测器。
紫外分光光度计--注意事项
1.该仪器应放在干燥的房间内,使用时放置在坚固平稳的工作台上,室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风,防止灯泡灯丝发亮不稳定。
2.使用本仪器前,使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理,以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前,应该对仪器的安全性能进行检查,电源接线应牢固,通电也要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再按通电源开关。
3.在仪器尚未接通电源时,电表指针必须于“0”刻线上,若不是这种情况,则可以用电表上的校正螺丝进行调节。
光源和检测方法(LIGHTSOURCESANDDETECTION)分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。例如AmershamBiosciencesofPiscataway公司的GeneQuantII能在230、260、280、320、595和600nm的波长下测量样品。果果需要更大的灵活性,研究者可以考虑一种更高性能的宽光谱仪器,可以程序性地进行ELISAs分析和比色分析。
紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长,通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。VarianofPaloAlto公司的CaryDeepUV和HitachiHighTechnologiesofTokyo的U-7000AutomatedVacuumUVSystem就是这样的仪器。
一些仪器具有多种光源供选择:紫外光、可见光和甚至红外光(780nm至3,000nm)。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分(大约380nm到800nm)。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。紫外分光光度计可用于药品的鉴别、纯度检查及含量测定,既可以定性分析,又可以定量分析。
紫外分光光度计的单色器是将光源发出的连续光谱分解成单色光,并能准确方便地“取出”所需要的某一波长的光的光学装置,它是光度计的心脏。单色器主要由狭缝、色散元件和透镜系统组成。其中色散元件是单色器的主要部件。常用的色散元件是棱镜、光栅,或者是两者的组合。
棱镜单色器是利用不同波长的光在棱镜内折射率不同将复合光色散为单色光,这种现象称为棱镜的色散作用。常用的棱镜由玻璃或石英制成。可见光范围常采用玻璃棱镜,其色散力强,价格低廉,但是玻璃吸收紫外光,所以不宜用于紫外光区。紫外光范围常用石英作为材料,石英棱镜的工作波长范围为185~4000nm,在紫外光区有较好的分辨力,而且也适用于可见光区和近红外光区。棱镜单色器的特点是波长越短,色散程度越好。越趋向长波,色散程度越差,所以,单色器用棱镜的分光光度计,其波长刻度在紫外光区可达到0.2nm,而在长波段,只能达到5nm。 例如测试紫外区时则可关闭紫外分光光度计钨灯;反之关闭氘灯。这样就延长了那只不使用的光源灯的寿命。中端紫外可见分光光度计排行
因为增加了测量的速度,所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。国产紫外可见分光光度计现货
可见分光光度计,紫外分光光度计和紫外可见分光光度计有什么区别?
可见分光光度计和紫外分光光度计的区别是测定波长范围不同,一般可见光波长范围是400~1000nm,紫外光波长范围是200~400nm。所谓紫外可见分光光度计也就是说这个仪器可以通过更换光源形成紫外和可见的光区,能够测定吸收峰在紫外和可见光部分的化合物。一般测定波长在200~1000nm。
分光光度计的关键参数有哪些?
选择可见和紫外可见的分光光度计所关注的关键的指标有三点:一是波长范围,二是波长准确度,三是杂散光参数。波长范围的选择是由用户实验需要所定,波长范围越宽的价格越贵;波长准确度及杂散光参数的数值越低,表示性能越好。 国产紫外可见分光光度计现货
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