分析紫外可见分光光度计

为了保障在190～1100nm区域内的高信噪比，目前的仪器均采用两只光源灯互补使用，即在紫外区采用氘灯，而在可见区使用钨灯，两只灯的选择采用旋转光源镜来切换。

众所周知，紫外可见分光光度计的光源部需要经常更换光源灯（钨灯或氘灯），一般来说这种工作均由仪器厂家的工程师来进行；如果仪器用户自己可以掌握这种更换和调整技术，既能节约等待时间又能节省维修费用，可谓一举两得。

虽然有些用户也曾经自行尝试过这种工作，但往往效果不太理想，究其原因则是没有掌握要领，他们将这种更换光源灯的工作看做与更换室内照明灯泡的性质一样，认为只要换上的光源灯被亮即万事大吉；为此，我谈谈这方面的调整要领。

一般简易型分光光度计的光源室**设计了一支钨灯来涵盖整个波长区域的使用，由于钨灯的能量在紫外区很弱，因此、此类仪器在紫外区的测量信号的噪声较大。

也有**的紫外分光光度计，同理、光源灯就改用一支氘灯了。 在大部分的样品类型中，分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。分析紫外可见分光光度计

紫外分光光度计--注意事项

1．该仪器应放在干燥的房间内，使用时放置在坚固平稳的工作台上，室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风，防止灯泡灯丝发亮不稳定。

2．使用本仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理，以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前，应该对仪器的安全性能进行检查，电源接线应牢固，通电也要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再按通电源开关。

3．在仪器尚未接通电源时，电表指针必须于“0”刻线上，若不是这种情况，则可以用电表上的校正螺丝进行调节。 车载紫外可见分光光度计初次使用紫外可见分光光度计的人员，一般来说，一定要详细阅读仪器安全操作手册。

紫外可见分光光度计条件设定

可通过控制被测物浓度或改变吸收池厚度来实现吸光度合理的范围，以尽量减小测量误差。一般吸光度尽量控制在0.1-0.8范围。

空白溶液是用来调节吸光度测量工作零点即A=0，T=100%的溶液，以消除溶液中其它基体组分以及吸收池和溶剂对入射光的反射和吸收所带来的误差。根据情况不同，常用空白溶液有如下几种选择。

在定量分析中，为了提高测定的灵敏度，入射光的波长应选择被测物的MAX吸收波长λmax，如果λmax有干扰，可选择另一条灵敏度稍低、但能避免干扰的谱线，所以，适当选择入射光的波长，不仅能提高测定的灵敏度，还能提高测定的准确度。

狭缝宽度过大，入射光的单色性差；狭缝宽度太小，入射光的强减弱。狭缝宽度过大或过小均会造成灵敏度降低，选择是产生MIN误差情下的MAX狭缝。一般选用仪器的狭缝宽琶度应小于待测样品吸收带的半宽度，否则测得的吸光度值会偏低，狭缝宽度的选择应以减少狭缝宽度时供试品的吸光度不再；加为准，对于大部分被测品种，可以使用2nm缝宽。

波长的准确性：*有16种偏差超过1nm，其余大多在01～1之间。其中突出的是Varian的Cary100/300，它们在6561nm处的波长准确性达到了002nm的水平。波长重复性大于05nm的*7种，01～05nm之间的占了多数，共有68种，还有相当数量的产品达到了优于01nm的水平。如Agilent的8453(002)、Beckman的DU7000series(005)、Camspec的M400T/PC(005)、GBC的Centra10/20/40(004)、Hitachi的U3010/3310(005)、PerkinElmer的Lambda系列(002～005)、ScincoCO的S-1100/3130/3150(002)、Shimadzu的MS1500(001)和UV1201(003)、Varian的Cary系列(0008～0025)等。虽然从原理上，固定光栅型的设计结构固定、简单，易于实现好的波长准确性和重复性，但扫描光栅的设计制造工艺已十分成熟。光谱范围紫外可见光谱区通常指190nm～780nm的波长范围，但实际的分光光度计设计中，经常将波长向长波方向拓展，进入短波近红外区。在120多种国外产品中，有52种波长≤900nm，其中≤800nm的*11种。而>900nm的有72种，占了多数。固定光栅型受硅阵列探测器的限制，1100nm是其波长的上限。扫描光栅型使用分立光电器件，波长的扩展更为灵活。

紫外—可见分光光度计根据测定波长的范围可分为可见分光光度定量分析法和紫外分光光度计定量分析法。

重要性能指标的考察，包括：光度准确度，杂散光，光谱带宽，稳定性，噪声，波长的准确度和重复性是几个重要指标。各指标间相互独立有相互影响，需要综合考量选购目标紫外可见光分光光度计。

使用前，阅读仪器使用说明书和做好仪器使用前的工程师培训。使用过程中，正确操作、认真了解仪器指标的物理意义和测试方法以及结合仪器使用中的相关设备的调试。掌握仪器的基本保养维护知识，建立相关指标与分析测试结果之间的误差影响条件，经常检测和调试仪器，确保仪器处在合适的工作状态。

分光光度计元器件方面，经历了棱镜、机刻光栅和全息光栅，商品化的全息闪耀光栅已迅速取代一般刻划光栅。上海紫外可见分光光度计

紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。分析紫外可见分光光度计

在使用紫外可见分光光度计时候，设备仪器使用之前，一定需要能够把样品室内存放的防潮剂给拿出来，且在设备正常运转检查时候也不能开启样品室盖；在检查时候需注意比色皿当中的液体要能占总体积的百分之六十六到百分之八十比较好，千万不能让液体太多以至于液体外泄直接腐蚀仪器设备。

当然在进行正常检测时候，也要能确保比色皿干净，当发现内壁上有液滴就许使用专业的纸张给擦拭干净，建议大家千万不要使用手直接擦拭，以免造成对手的伤害。

在使用紫外可见分光光度计时，仪器设备在正常运转的时候，一定要严禁把液体溶剂给直接放置于仪器的表层上，如果发现有溶剂液体出现外泄的情况，一定要进行及时的清洁和处理。

当使用紫外可见分光光度计检测完毕后，还需要能够及时把比色皿内的液体给妥善处理掉，并还需要能够使用蒸馏水给彻底清洁干净，同时将比色皿进行倒置晾干处理；全部工作完成后还需把设备仪器电源给关闭，再将防潮剂放入到样品室内并做好防尘处理才好。 分析紫外可见分光光度计

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