北京数字PCR

无创产前检查

       镰状细胞贫血（sickle cell anemia）是HBB基因突变引起的常染色体显性遗传病，有严重的危害，可以导致高达5%的胎儿死亡率及4.62%的孕妇死亡率。而精细有效的无创产前诊断是预防镰状细胞贫血患儿出生的有效方法。研究人员采用dPCR技术检测孕妇胎儿游离DNA（cff-DNA）HBB基因突变。结果显示，dPCR技术能够确定87%的男性胎儿（n=45）和75%的女性胎儿（n=20）HBB基因的突变状态。当cff-DNA浓度大于7%时，可以**的检测出HBB基因突变[3]，可以说是相当厉害了。

适用复杂样品的检测。北京数字PCR

       数字PCR检测及分析原理在上世纪90年代就被提出来了，但是无奈受限于当时的技术条件，样本稀释及分配都是靠手工来完成的，受到很多因素的干扰和限制；并且结果分析对于研究者来说也十分枯燥与繁琐，因此在很长一段时间dPCR发展停滞不前。后来由于微流控技术与微纳集成制造工艺的发展解决了dPCR过程中的几个关键技术问题，推动了dPCR的研究与商业化的发展。

       目前根据dPCR样本稀释分配的方式，基本可分为三大类，一种是基于大规模集成微流控芯片；第二种是使用微反应室/孔板；第三种是微滴式。但不论是走芯片式还是微滴式，其基本原理都是将大量稀释后的核酸溶液分散至芯片的微反应器或者微滴当中，每个反应器的核酸模板数少于1或者等于1。经过PCR扩增之后，有一个核酸分子的模板的反应器就会给出荧光信号，没有模板的反应器没有荧光信号。根据相对比例和反应器的体积，可以推算出原始溶液的核酸浓度。 无锡微滴式数字PCR哪家好全封闭体系，自动化流程操作。

       微滴式数字PCR系统为微流控微滴生成技术，采用原创性的油液，单个样本在微米级流道中利用气压驱动在3分钟内生成10万微滴，单次运行生成80万微滴，微滴体积达皮升级，检测线性范围达到6个数量级，各项指标均超越国内外主流产品。

       在液滴生成数上，MicroDrop™能达到国外同级别产品的5倍。与此同时，设备制作成本只有国外同类产品的一半。这减低了精细医疗的成本，打破了国外厂商在微滴式数字PCR领域的垄断。这意味着在未来，采用外周血、唾液、尿液、脑脊液等样本进行低成本、高灵敏、快速的无创检测成为可能。

       数字PCR可以直接计算目标序列的拷贝数，因此无需依赖于对照样品和标准曲线就可以进行精确的***定量检测；此外，由于数字PCR在进行结果判读时*判断有/无两种扩增状态，因此也不需要检测荧光信号与设定阈值线的交点，完全不依赖于Ct值的鉴定，因此数字PCR的反应受扩增效率的影响**降低，对PCR反应***物的耐受能力**提高；数字PCR实验中标准反应体系分配的过程可以极大程度上降低与目标序列有竞争性作用的背景序列浓度，因此数字PCR技术也特别适合在复杂背景中检测稀有突变。MicroDrop™数字PCR可广泛应用于科研、医疗、出入境检验检疫等领域。

       数字PCR也叫Digital PCR（dPCR），是近几年发展起来的一种核酸定量分析技术。相较于传统荧光定量PCR来说，数字PCR对结果的判定不依赖于扩增曲线循环Ct值，不受扩增效率的影响，能够直接读出DNA的分子个数，能够对起始样本核酸分子***定量。

       数字PCR基本原理是将一个样本分成几十到几万份，然后再将其分配到不同的反应单元中，使每个微滴单元包含一个或多个拷贝的核酸分子（即DNA模板），每个单元都会对目标分子进行扩增，然后再对每个单元进行荧光信号的统计并计算。相对而言，传统PCR或qPCR反应都是发生于同一体系当中，这也是数字PCR与其比较大的区别。

国内拥有完全自主知识产权的微滴式数字PCR仪。无锡微滴式数字PCR哪家好

可使用第三方PCR反应液，配备PCR A300（温度范围4°C-98°C，扩增模块温控精度±0.2°C）。北京数字PCR

       微滴式数字PCR系统在传统的PCR扩增前对样品进行微滴化处理，即将含有核酸分子的反应体系分成成千上万个纳升级的微滴，其中每个微滴或不含待检核酸靶分子，或者含有一个至数个待检核酸靶分子。经PCR扩增后，逐个对每个微滴进行检测，有荧光信号的微滴判读为1，没有荧光信号的微滴判读为0，根据泊松分布原理及阳性微滴的个数与比例即可得出靶分子的起始拷贝数或浓度。

与传统PCR相比所具有的优势

       不依赖Ct值或内参基因，即可确定低至单拷贝的待检靶分子的***数目。微滴技术让数字PCR更低成本，且更实用。

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