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紫外-可见吸收光谱为什么有些化合物是有色的，而另一些化合物却没有？共轭与颜色有什么关系？我们必须对光谱中可见光部分和附近的不同波长处的光吸收进行精确测量。商业光谱仪可对光谱中近紫外和可见部分光吸收进行精确测量。

可见光区域的光子能量为36-72kcal/mol，近紫外线区域（至200nm）的能量范围扩展至143kcal/mole。波长小于200nm的紫外线辐射难以处理，因此很少用作结构分析的常规工具。

当一束光照射物质时，上述能量会激发分子电子至更高能量的轨道。下图显示了有机分子中发生的各种电子激发的示意图，其包含六个跃迁。通常，只有三个低能量跃迁是通过200至800nm光的能量实现的，也就是说，能够吸收200-800nm区域光的分子应具有π电子系统和具有未成对电子对的杂原子。这种吸光基团称为生色团。

当样品分子暴露于具有与分子内可能的电子跃迁相匹配能量的光时，电子受光子激发从高的占据分子轨道（HOMO）跃迁到低的未占据分子轨道（LUMO），一些光能将被吸收，所产生的物质称为激发态物质。光谱仪记录吸收波长以及每个波长的吸收程度，所得光谱用吸光度（A）与波长的关系图表示。吸光度通常在0（无吸收）到2（99％吸收）的范围内。 选择可见和紫外可见的分光光度计所关注的关键的指标有三点。教学紫外可见分光光度计经销商

使用紫外可见分光光度计时需要注意哪些方面？

1、使用的吸收池必须洁净，并注意配对使用。量瓶、移液吸管均应校正、洗净后使用。

2、取吸收池时，手指应拿毛玻璃面的两侧，装盛样品以池体的4/5为度，使用挥发性溶液时应加盖，透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净，检视应无溶剂残留。吸收池放入样品室时应注意方向相同。用后用溶剂或水冲洗干净，晾干防尘保存。

3、供试品溶液浓度除各该品种已有注明外，其吸收度以在0.3～0.7之间为宜。

4、测定时除另有规定外，应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照，采用1cm石英吸收池，在规定的吸收峰±2nm以内，测几个点的吸收度或由仪器在规定的波长附近自动扫描测定，以核对供试品的吸收峰位置是否正确，并以吸收度MAX的波长作为测定波长，除另有规定外吸收度MAX波长应在该品种项下规定的测定波长±2nm以内。

5、供试品应取2份，如为对照品比较法，对照品一般也应取2份。平行操作，每份结果对平均值的偏差应在±0.5%以内。

6、选用仪器的狭缝宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度值会偏低，狭缝宽度的选择应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准，对于大部分被测品种，可以使用2nm缝宽。 空气紫外可见分光光度计排名在选择紫外可见分光光度计之前，需要了解仪器的基础构架，有哪些地方是消耗品，有想哪些需要维修保养。

紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长，通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。VarianofPaloAlto公司的CaryDeepUV和HitachiHighTechnologiesofTokyo的U-7000AutomatedVacuumUVSystem就是这样的仪器。

一些仪器具有多种光源供选择：紫外光、可见光和甚至红外光（780nm至3,000nm）。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分（大约380nm到800nm）。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。光源和检测方法（LIGHTSOURCESANDDETECTION）分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。例如AmershamBiosciencesofPiscataway公司的GeneQuantII能在230、260、280、320、595和600nm的波长下测量样品。果果需要更大的灵活性，研究者可以考虑一种更高性能的宽光谱仪器，可以程序性地进行ELISAs分析和比色分析。

吸收池是用于盛装待测液并决定待测溶液透光液层厚度的器皿，又称比色皿。吸收池一般为长方体，也有圆形或其它形状的。其底及两侧为毛玻璃，另两面为光学透光面。根据光学透光面的材质，吸收池又可分为玻璃吸收池和石英吸收池两种。玻璃吸收池用于可见光区测定，石英吸收池用于紫外光区的测定。吸收池的规格以光程为标志。常用的吸收池规格有0.5cm、1.0cm、2.0cm、3.0cm、5.0cm等。光栅实现上就是一系列等宽、等距离的平行狭缝，它是利用光的衍射与干涉作用制成的。光栅作为色散元件具有不少独特的优点，光栅单色器的分辨率比棱镜单色器的分辨率高，可精确到0.2nm，而且可用的波长范围也比棱镜单色器的范围宽。所以，目前生产的紫外可见分光光度计大多采用光栅作为色散元件。 大部分单机型的分光光度计包含了驱动仪器运行和管理数据的软件。与PC机一起联用，需要从制造商购买软件。

紫外-可见分光光度计（UV）引用新型技术，其功能强大，采用单色器技术，波长范围190-1100nm，是各种涉及水和废水分析领域的通用仪器，应用范围包括市政和工业废水，饮用水，加工过程用水，地表水，冷却水和锅炉补给水等。

在水和废水监测中的应用，对于一个水系的监测分析和综合评价，一般包括水相（溶液本身）、固相（悬浮物、底质）、生物相（水生生物）。在水质的常规监测中，紫外可见分光光度法占有较大的比重。由于水和废水的成分复杂多变，待测物的浓度和干扰物的浓度差别很大，在具体分析时必须选择好分析方法。

在农产品和食品分析中可用于检测的组分或成分有蛋白质、赖氨酸、葡萄糖、维生素C、硝酸盐、亚硝酸盐、砷、汞等;

在植物生化分析中可用于检测叶绿素、全氮和酶的活力等；

在饲料分析中可用于检测烟酸、棉酚、磷化氢和甲酯等。原理紫外可见吸收光谱主要产生于分子价电子在能级间的跃迁。利用一定频率的紫外--可见光照射被分析的物质，引起分子中价电子的跃迁，它将有选择地被吸收。吸收光谱可以反映出物质的特征。它对物质进行定性分析、定量分析及结构分析,所依据的光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。 紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。单光束型主要是依赖单束光进行测量。国产紫外可见分光光度计代理

紫外可见分光光度计使对难溶元素的测定灵敏度还不够理想。教学紫外可见分光光度计经销商

在分光元器件方面，经历了棱镜、机刻光栅和全息光栅的过程，商品化的全息闪耀光栅已迅速取代一般刻划光栅。在仪器控制方面，随着单片机、微处理器的出现以及软硬件技术的结合，从早期的人工控制进步到了自动控制。在显示、记录与绘图方面，早期采用表头(电位计)指示、绘图仪绘图，后来用数字电压表数字显示，如今更多地采用液晶屏幕或计算机屏幕显示。在检测器方面，早期使用光电池、光电管，后来更普遍地使用光电倍增管甚至光电二极管阵列。阵列型检测器和凹面光栅的联合应用，使仪器的测量速度发生了质的飞跃，且性能更加稳定可靠，受到仪器用户的青睐，在仪器构型方面，从单光束发展为双光束，现在几乎所有高级分光光度计都是双光束的，有些高精度的仪器采用双单色器。紫外可见分光光度计的发展分光光度法在分析领域中的应用已经有数十年的历史，至今仍是应用常用的分析方法之一。随着分光元器件及分光技术、检测器件与检测技术、大规模集成制造技术等的发展，以及单片机、微处理器、计算机和DSP技术的应用，分光光度计的性能指标不断提高，并向自动化、智能化、高速化和小型化等方向发展。 教学紫外可见分光光度计经销商