紫外可见分光光度计条件设定
可通过控制被测物浓度或改变吸收池厚度来实现吸光度合理的范围,以尽量减小测量误差。一般吸光度尽量控制在0.1-0.8范围。
空白溶液是用来调节吸光度测量工作零点即A=0,T=100%的溶液,以消除溶液中其它基体组分以及吸收池和溶剂对入射光的反射和吸收所带来的误差。根据情况不同,常用空白溶液有如下几种选择。
在定量分析中,为了提高测定的灵敏度,入射光的波长应选择被测物的MAX吸收波长λmax,如果λmax有干扰,可选择另一条灵敏度稍低、但能避免干扰的谱线,所以,适当选择入射光的波长,不仅能提高测定的灵敏度,还能提高测定的准确度。
狭缝宽度过大,入射光的单色性差;狭缝宽度太小,入射光的强减弱。狭缝宽度过大或过小均会造成灵敏度降低,选择是产生MIN误差情下的MAX狭缝。一般选用仪器的狭缝宽琶度应小于待测样品吸收带的半宽度,否则测得的吸光度值会偏低,狭缝宽度的选择应以减少狭缝宽度时供试品的吸光度不再;加为准,对于大部分被测品种,可以使用2nm缝宽。
初次使用紫外可见分光光度计的人员,一般来说,一定要详细阅读仪器安全操作手册。生产紫外可见分光光度计生产厂家
双光束型则是通过一个斩光轮(mirroredchopperwheel)将一束光分成两束,分别测量对照样品和实际样品。可MIN光漂移(lampdrift)和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮,而是利用一种光束分光器来代替,将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度,所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。光学构造(OPTICALCONFIGURATION)一般来说,紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。顾名思义,单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物,然后再通过实际样品溶液,就能得到吸光结果。 氮气紫外可见分光光度计仪器光学构造和光源、探测方法、样品类型和数据处理等都是要考虑的因素。
紫外可见光分光光度计的体积大小以及外观美学性。紫外可见分光光度计的仪器体积大小,会牵扯仪器所需要的摆放位置以及仪器使用的方便程度。
仪器的外形美观,给人以大气、上档次、舒适、新鲜的感觉。首先,会让使用仪器者对仪器分外的爱护、维护和保养,有利于延长仪器的使用寿命。同时,也会让仪器使用者的工作环境更舒适、优美,也有利于提高工作效率。
紫外可见光分光光度计仪器使用范围。紫外可见光分光光度的使用范围是有仪器的性能指标所决定。采购紫外可见光分光光度计根据测试样品的具体要求,参考仪器的使用范围,满足即可,不必苛求。当然,土豪可以忽略。
双光束UV:经棱镜分光后通过光栅,加强了灵敏度,同时测量空白样品与目标样品的优点,全波段分析时间长。全波段UV:样品与空白样品可以暴露在空气中,照射样品后,进入密闭箱,通过光栅,进入DAD检测器检测。检测样品不需要密闭,外界光线对测试无影响,使用方便准确且空白只需要检测一次,全波段分析时间小于1s。
对于紫外可见分光光度计,由于有双光源(钨灯与氘灯),为了延长灯的使用寿命,开机自检完成后可以关掉测定时不用的光源灯。紫外可见分光光度计使用中常见问题解析在一般分光光度计的使用说明书上,要求仪器预热时间约20分钟;若是带微处理器的分光光度计,开机后仪器自动进入自检(初始化)状态,约需1O分钟左右。在分光光度计预热这个环节上,很多使用者或多或少存在问题,如开机只预热电路系统(不调节波长、打开吸收池暗箱盖预热等)或认为初始化过程就是预热等等。对带微处理器有自检功能的分光光度计,开机后仪器自检(初始化)结束后,在测定窗口上,设置所需波长值,用一个吸收池装上纯净水置于光路上,调“0000A”后,预热仪器,当仪器显示读数不再变化后即可进行测定。
紫外-可见分光光度法是利用某些物质的分子吸收200--800nm光谱区的辐射来进行分析测定的方法。
紫外吸收光谱能测定化合物中含有微量的具有紫外吸收的杂质。如果化合物的紫外可见光区没有明显的吸收峰,而它的杂质在紫外区内有较强的吸收峰,就可以检测出化合物中的杂质。
不同的极性溶剂产生氢键的强度也不同,这可以利用紫外光谱来判断化合物在不同溶剂中氢键强度,以确定选择哪一种溶剂。
金属离子常与有机物形成络合物,多数络合物在紫外可见区是有吸收的,我们可以用分光光度法来研究其组成。根据吸收光谱图上的一些特征吸收,特别是MAX吸收波长λmax和摩尔吸收系数ε,是检定物质的常用物理参数。
将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中,在同一条件下分别测定紫外可见吸收光谱。若两者是同一物质,则两者的光谱图应完全一致。如果没有标样,也可以和现成的标准谱图对照进行比较。
由于紫外吸收光谱只含有2~3个较宽的吸收带,而紫外光谱主要是分子内的发色团在紫外区产生的吸收,与分子和其它部分关系不大。具有相同发色团的不同分子结构,在较大分子中不影响发色团的紫外吸收光谱,不同的分子结构有可能有相同的紫外吸收光谱,但它们的吸收系数是有差别的。如果分析样品和标准样品的吸收波长相同,吸收系数也相同,则可认为分析样品与标准样品为同一物质。 目前市场上有两类主流紫外分光光度计产品:扫描光栅式分光光度计和固定光栅式分光光度计。工业紫外可见分光光度计排行
在操作紫外可见分光光度计时,操作人员需要留意一下机器的干燥剂。生产紫外可见分光光度计生产厂家
紫外分光光度计狭缝的大小会影响到仪器的信噪比和标准曲线的线性范围。狭缝过大,通常会使线性范围变小,特别是当不在MAX吸收波长位置测定时更是如此。狭缝过小,信噪比变差,基线平直度和测量数据的重复性会变差。此外,还需要考虑样品吸收峰宽度的影响。通常单波长测定时,一般选择在MAX吸收波长位置,线性范围容易满足,可选择较宽的狭缝(1~2nm)多波长测定时,很难同时在所有波长都满足线性范围要求,应选择比较小的狭缝。进行单波长测量时,需要考虑朗伯比尔定律对入射光单色性的要求和测定灵敏度的要求。没有干扰时,一般选择在吸收峰的MAX吸收波长位置处,如果有干扰,选择在没有干扰且吸光度变化较平缓的位置。进行多波长校正时,除尽量满足单波长测定的波长要求外,还要求多个组分间的吸收光谱间线性无关。
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