高效液相色谱法介绍----
高效液相色谱仪的构造:
高效液相色谱系统主要是由流动相储液瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录仪组成的,高效液相色谱系统的整体组成类似于气相色谱,但是针对高效液相色谱系统流动相为液体的特点作出很多的调整。高效液相色谱的输液泵要求输液量恒定平稳,进样系统要求进样便利、切换严密。同时,由于液体流动相黏度远远高于气体,为了减低柱压,高效液相色谱的色谱柱一般比较粗,长度也远小于气相色谱柱。 Vanquish 系统的分流进样器 HT 模块的单瓶容量可满足 208 次进样,开箱即用。安徽进口液相色谱系统优惠价格
高效液相色谱法有“四高一广”的特点:
①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。
②高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。
③高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到比较好分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。
④高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。
⑤应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势。
⑥柱子可反复使用:用一根柱子可分离不同化合物
⑦样品量少、容易回收:样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备。
山东专业高效液相色谱系统使用适合可获取更高投资回报的双 LC 工作流程的 Vanquish Duo系统,样品通量倍增。
双 LC 的 Vanquish Duo 系统更多细节
Vanquish Duo 系统可采用多种分析检测器,包括质谱(MS)、二极管阵列检测(DAD)、电雾式检(CAD)、可变波长检测(VWD)和荧光检测(FLD)。
提供强大的分离性能
采用两个相似的或者不同的色谱柱运行样品以提高通量或尽可能提**析效率。也可以额外选配一个柱温箱,以分别进行色谱柱的温度控制。
简化操作
受**保护的Thermo Scientific™ Viper™ 免除工具手拧接头,接近零死体积并且符合人体工程学的设计。
Vanquish 系统谱写了**UHPLC的新篇章 该系统不论是单独使用还是与更新的质谱仪联用都具有更高的性能、生产率和易用性。其设计以色谱柱和用户为中心,系统耐压22,000 psi,整机兼具一体式系统的耐用性和模块化系统的灵活性,便于维修,是赛默飞所有知识和热情的结晶,能够满足色谱工作者对于**UHPLC的分析需求。值得一提的是,Vanquish系统的高度比原有的模块化系统降低了25%,从而更加方便亚洲人的操作。此外,Vanquish UHPLC 系统还是一套整合的、生物兼容的系统。使用***法规依从的 Chromeleon CDS,可从单一用户界面控制两个**的梯度流路。
Vanquish Duo 系统
无需额外的工作 - 自动梯度转换
Chromeleon CDS 自动识别反梯度仪器配置并启动**方法向导。该向导结合所有内部体积,引导用户计算反梯度并将其应用于反梯度 Vanquish Duo 系统的第二个泵上,从而为您提供比较高的定量精密度,并比较大限度地提高了易用性。
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液相色谱中的大多数检测选项都需要通过某些物理化学性质来检测某一物质,例如用于紫外线吸收检测的发色团或用于质谱检测的离子化。电雾式检测技术可检测所有不同化学结构的非挥发性分析物,同时提供一致的响应、出色的灵敏度和较宽的线性范围。
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高效液相色谱分离原理
液-液分配
(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶(极性不同,避免固定液流失),有一个明显的分界面。当试样进入色谱柱,溶质在两相间进行分配。达到平衡时,服从于高效液相色谱计算公式:
式中,cs—溶质在固定相中浓度;cm—溶质在流动相中的浓度; Vs—固定相的体积;Vm—流动相的体积。LLPC与GPC有相似之处,即分离的顺序取决于K,K大的组分保留值大;但也有不同之处,GPC中,流动相对K影响不大,LLPC流动相对K影响较大。
a.正相液-液分配色谱法(Normal Phase liquid Chromatography): 流动相的极性小于固定液的极性。
b.反相液-液分配色谱法(Reverse Phase liquid Chromatography): 流动相的极性大于固定液的极性。
c.液-液分配色谱法的缺点:尽管流动相与固定相的极性要求完全不同,但固定液在流动相中仍有微量溶解;流动相通过色谱柱时的机械冲击力,会造成固定液流失。上世纪70年代末发展的化学键合固定相(见后),可克服上述缺点。
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