紫外可见分光光度法中的透光率标尺放大倍数,因为高浓度的样品透光率很小,引起较大的透光率读数误差,而示差分光光度法采用比
试样浓度较低的标准溶液作参比溶液,使透光率的读数标尺放大,其读数在透光率的适宜范围(15%~65%)内,可提高测定准确度。
可能是通过吸收定律以及透光率和吸光度的转化来计算。棱镜根据波长将光弯曲至不同程度,可将阳光分离成可见光的组成颜色。波长是光波相邻峰(或谷)之间的距离,可以以米,厘米或纳米(10-9米)表示。频率是每单位时间经过固定波的周期数,通常以每秒周期或赫兹(Hz)的形式表示。可见波长约400-800nm范围内。长的可见波长是红色,短的是紫色。 紫外可见分光光度计是由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。空气紫外可见分光光度计对比
波长小于200nm的紫外光会被空气吸收,只能在真空中传播,因此称为真空紫外(VUV)。因此,普通的UV-Vis吸收光谱仪不能测量200nm以下的信号。
如果要测量VUV波段光谱,需要保持光路真空,光谱仪结构会更加复杂,也更加昂贵。
①单光束UV:传统的紫外,单光源发射单光束,全程密闭,通过光栅,照射样品,由光电倍增管监测器检测。
缺点:测完空白再测试样品,全波段分析时间较长(一般2min)。
②比例双光束UV:单光源单光束,全程密闭,通过光栅,加入棱镜,把光分为两束,分别照射样品与空白,再合并光,进入光电倍增管检测器,通过差减法计算结果。
好处:空白样品同时检测。
缺点:灵敏度下降,全波段分析时间较长 氮气紫外可见分光光度计现货分光光度计元器件方面,经历了棱镜、机刻光栅和全息光栅,商品化的全息闪耀光栅已迅速取代一般刻划光栅。
使用紫外可见分光光度计进行定量和定性分析需注意以下一些问题:1吸光度读数范围:吸光度测量误差在透过率过大或过小时都会变大,为了满足定量分析的误差要求(<5%),在定量分析时要求吸光度应在一定的范围内,这个范围的具体值与仪器性能有关,主要是与紫外可见分光光度计检测系统噪声大小有关,但通常都在0.1~1.0范围内,如果仪器的档次更低,则范围更窄。根据朗伯比尔定律,影响吸光度大小的因素主要是样品摩尔吸光系数,浓度和比色皿光程。实验中吸光度过大的样品可通过稀释样品使吸光度到所需范围内。如果样品不能稀释,可以改用光程较小的比色皿减小吸光度。吸光度过小的样品可使用光程较大的比色皿以增大吸光度。
若大幅度改变测试波长,需稍等片刻,等灯热平衡后,重新校正“0”和“100%”点。然后再测量。
指针式仪器在未接通电源时,电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况,需进行机械调零。
比色皿使用完毕后,请立即用蒸馏水冲洗干净,并用干净柔软的纱布将水迹擦去,以防止表面光洁度被破坏,影响比色皿的透光率。
操作人员不应轻易动灯泡及反光镜灯,以免影响光效率。分光光度计作为一种精密仪器,在运行工作过程中由于工作环境、操作方法等种种原因,其技术状况必然会发生某些变化,可能影响设备的性能,甚至诱发设备故障及事故。因此,分析工作者必须了解分光光度计的基本原理和使用说明,并能及时发现和排除这些隐患,对已产生的故障及时维修才能保证仪器设备的正常运行。 通常我们所理解的单色光,只是存于理想状态下,实际上得到的“单色光”,是带有一定宽度和波长范围的谱带。
紫外可见分光光度计种类及优缺点对比
单光束UV:传统的紫外,单光源发射单光束,全程密闭,通过光栅,照射样品,由光电倍增管监测器检测。
缺点:测完空白再测试样品,全波段分析时间较长(一般2min)。2比例双光束UV:单光源单光束,全程密闭,通过光栅,加入棱镜,把光分为两束,分别照射样品与空白,再合并光,进入光电倍增管检测器,通过差减法计算结果。
好处:空白样品同时检测。
缺点:灵敏度下降,全波段分析时间较长。3双光束UV:单光源单光束,全程密闭,通过棱镜分出两道光,分别通过一光栅,分别进入各自的光点倍增管检测器。
好处:加强灵敏度,同时测量空白与样品。
缺点:全波段分析时间较长。4全波段UV:单光源单光束,样品与空白暴露在空气中,照射样品,开始进入密闭箱,通过光栅,进入DAD检测器。
好处:空白只需要检测一次,如果你愿意一辈子检测这一次都可以。检测样品不密闭,外界光线对其无影响,使用方便且精确。分析任何波段或全波段不到1s。
缺点:贵。(25W) 由于玻璃材质会吸收紫外线,所以目前市面上的紫外可见分光光度计都采用石英棱镜。实验室紫外可见分光光度计现货
在大部分的样品类型中,分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。空气紫外可见分光光度计对比
为了保障在190~1100nm区域内的高信噪比,目前的仪器均采用两只光源灯互补使用,即在紫外区采用氘灯,而在可见区使用钨灯,两只灯的选择采用旋转光源镜来切换。
众所周知,紫外可见分光光度计的光源部需要经常更换光源灯(钨灯或氘灯),一般来说这种工作均由仪器厂家的工程师来进行;如果仪器用户自己可以掌握这种更换和调整技术,既能节约等待时间又能节省维修费用,可谓一举两得。
虽然有些用户也曾经自行尝试过这种工作,但往往效果不太理想,究其原因则是没有掌握要领,他们将这种更换光源灯的工作看做与更换室内照明灯泡的性质一样,认为只要换上的光源灯被亮即万事大吉;为此,我谈谈这方面的调整要领。
一般简易型分光光度计的光源室**设计了一支钨灯来涵盖整个波长区域的使用,由于钨灯的能量在紫外区很弱,因此、此类仪器在紫外区的测量信号的噪声较大。
也有**的紫外分光光度计,同理、光源灯就改用一支氘灯了。 空气紫外可见分光光度计对比