使用紫外可见分光光度计时需要注意哪些方面?
1、使用的吸收池必须洁净,并注意配对使用。量瓶、移液吸管均应校正、洗净后使用。
2、取吸收池时,手指应拿毛玻璃面的两侧,装盛样品以池体的4/5为度,使用挥发性溶液时应加盖,透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净,检视应无溶剂残留。吸收池放入样品室时应注意方向相同。用后用溶剂或水冲洗干净,晾干防尘保存。
3、供试品溶液浓度除各该品种已有注明外,其吸收度以在0.3~0.7之间为宜。
4、测定时除另有规定外,应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照,采用1cm石英吸收池,在规定的吸收峰±2nm以内,测几个点的吸收度或由仪器在规定的波长附近自动扫描测定,以核对供试品的吸收峰位置是否正确,并以吸收度MAX的波长作为测定波长,除另有规定外吸收度MAX波长应在该品种项下规定的测定波长±2nm以内。
5、供试品应取2份,如为对照品比较法,对照品一般也应取2份。平行操作,每份结果对平均值的偏差应在±0.5%以内。
6、选用仪器的狭缝宽度应小于供试品吸收带的半宽度,否则测得的吸收度值会偏低,狭缝宽度的选择应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准,对于大部分被测品种,可以使用2nm缝宽。 选择可见和紫外可见的分光光度计所关注的关键的指标有三点。可靠紫外可见分光光度计排名
当仪器经过长途搬运、受过机械振动或更换光源灯泡后,必须进行波长准确度的检查与校正。粗检同上,其校正方法有:干涉滤光片或镨钕滤光片校正法、利用氘灯的特征发射线校正法。具体步骤可参考仪器使用说明书。关于波长准确度的检查与校正日常在使用分光光度计时,是否要经常进行仪器波长准确度的检查?答案是否定的。当在日常测定中发现仪器测定灵敏度下降,这时才应进行波长准确度的检查,简易的检查方法(粗检)是:仪器开机后,调节波长为580nm,在吸收池座的通光道中插入一张白色卡片纸,若能观察到一长方形的黄色光斑,说明波长准确度属正常范围,否则就应进行波长校正。紫外可见分光光度计单价紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。
紫外可见分光光度计的基本结构紫外可见分光光度计的工作原理是由光源发出连续辐射光,经单色器按波长大小色散为单色光,单色光照射到吸收池,一部分被样品溶液吸收,未被吸收的光经检测器的光电管将光强度变化转变为电信号变化,并经信号显示系统调制放大后,显示或打印出吸光度A(或透射比T),完成测定。
钨灯是常用的可见光光源,它可发射的波长为325~2500nm的连续光谱,其中适宜的使用波长范围为320~1000nm,因此,也可用做近红外光源。电能将钨灯加热到白炽时,发出的光强度在各波段的分布随灯丝温度而变化。灯丝的温度取决于电源电压。电源电压的微小波动都会引起钨光强度的很大变化。因此必须使用稳压电源供电,钨灯工作电压为12V,也可以使用12V的直流电源供电。钨灯的寿命一般可达10000小时以上。
目前很多光度计采用卤钨灯代替钨灯,如7230G型、752PLUS型分光光度计等。卤钨灯具有较高的发光效率和较长的使用寿命。
如何正确使用752N紫外可见分光光度计
A:在使用紫外可见分光光度计时候,设备仪器使用之前,一定需要能够把样品室内存放的防潮剂给拿出来,且在设备正常运转检查时候也不能开启样品室盖;在检查时候需注意比色皿当中的液体要能占总体积的百分之六十六到百分之八十比较好,千万不能让液体太多以至于液体外泄直接腐蚀仪器设备。
当然在进行正常检测时候,也要能确保比色皿干净,当发现内壁上有液滴就许使用专业的纸张给擦拭干净,建议大家千万不要使用手直接擦拭,以免造成对手的伤害。
B:在使用紫外可见分光光度计时,仪器设备在正常运转的时候,一定要严禁把液体溶剂给直接放置于仪器的表层上,如果发现有溶剂液体出现外泄的情况,一定要进行及时的清洁和处理。
C:当使用紫外可见分光光度计检测完毕后,还需要能够及时把比色皿内的液体给妥善处理掉,并还需要能够使用蒸馏水给彻底清洁干净,同时将比色皿进行倒置晾干处理;全部工作完成后还需把设备仪器电源给关闭,再将防潮剂放入到样品室内并做好防尘处理才好。在操作紫外可见分光光度计时,操作人员需要留意一下机器的干燥剂。
紫外吸收光谱能测定化合物中含有微量的具有紫外吸收的杂质。如果化合物的紫外可见光区没有明显的吸收峰,而它的杂质在紫外区内有较强的吸收峰,就可以检测出化合物中的杂质。
不同的极性溶剂产生氢键的强度也不同,这可以利用紫外光谱来判断化合物在不同溶剂中氢键强度,以确定选择哪一种溶剂。
金属离子常与有机物形成络合物,多数络合物在紫外可见区是有吸收的,我们可以用分光光度法来研究其组成。根据吸收光谱图上的一些特征吸收,特别是MAX吸收波长λmax和摩尔吸收系数ε,是检定物质的常用物理参数。
将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中,在同一条件下分别测定紫外可见吸收光谱。若两者是同一物质,则两者的光谱图应完全一致。如果没有标样,也可以和现成的标准谱图对照进行比较。
由于紫外吸收光谱只含有2~3个较宽的吸收带,而紫外光谱主要是分子内的发色团在紫外区产生的吸收,与分子和其它部分关系不大。具有相同发色团的不同分子结构,在较大分子中不影响发色团的紫外吸收光谱,不同的分子结构有可能有相同的紫外吸收光谱,但它们的吸收系数是有差别的。如果分析样品和标准样品的吸收波长相同,吸收系数也相同,则可认为分析样品与标准样品为同一物质。 分光光度法可以得出一些化学反应速度常数,并从两个或两个以上温度条件下得到的速度数据,得出反应活化能。暗箱紫外可见分光光度计报价
在选择紫外可见分光光度计之前,需要了解仪器的基础构架,有哪些地方是消耗品,有想哪些需要维修保养。可靠紫外可见分光光度计排名
使用紫外可见分光光度计进行定量和定性分析需注意以下一些问题:1吸光度读数范围:吸光度测量误差在透过率过大或过小时都会变大,为了满足定量分析的误差要求(<5%),在定量分析时要求吸光度应在一定的范围内,这个范围的具体值与仪器性能有关,主要是与紫外可见分光光度计检测系统噪声大小有关,但通常都在0.1~1.0范围内,如果仪器的档次更低,则范围更窄。根据朗伯比尔定律,影响吸光度大小的因素主要是样品摩尔吸光系数,浓度和比色皿光程。实验中吸光度过大的样品可通过稀释样品使吸光度到所需范围内。如果样品不能稀释,可以改用光程较小的比色皿减小吸光度。吸光度过小的样品可使用光程较大的比色皿以增大吸光度。可靠紫外可见分光光度计排名
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