高效液相色谱分离原理
离子对
(Ion Pair Chromatography)
离子对色谱法是将一种 ( 或多种 ) 与溶质分子电荷相反的离子 ( 称为对离子或反离子 ) 加到流动相或固定相中，使其与溶质离子结合形成疏水型离子对化合物，从而控制溶质离子的保留行为。其原理可用下式表示：X水相Y-水相 === X Y-有机相
式中：X 水相--流动相中待分离的有机离子（也可是阳离子）；Y-水相--流动相中带相反电荷的离子对（如氢氧化四丁基铵、氢氧化十六烷基三甲铵等）；X Y---形成的离子对化合物。
当达平衡时：
KXY = [X Y-]有机相/[ X ]水相[Y-]水相
根据定义，分配系数为：
DX= [X Y-]有机相/[ X ]水相= KXY [Y-]水相
[讨论：DX与保留值的关系]
离子对色谱法（特别是反相）解决了以往难以分离的混合物的分离问题，诸如酸、碱和离子、非离子混合物，特别是一些生化试样如核酸、核苷、生物碱以及药物等分离。
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高效液相色谱
高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“**离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术应用。 上海赛默飞世尔Vanquish高效液相色谱系统厂家直销用获奖 Thermo Scientific™ Dionex™ Chromeleon™ 色谱分析数据系统 (CDS) 软件控制和监测您的实验。
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“该仪器在同时运行两种相同化学分离或者同时运行两种不同化学分离时，极大地提高了分析通量，使我们能够快速从同一样品中获取大量表征数据。”--Jonathan Bones 博士 国家生物加工研究和培训研究所（NIBRT）
高效液相色谱相关术语
色谱图(chromatogram)——样品流经色谱柱和检测器，所得到的信号-时间曲线，又称色谱流出曲线(elution profile)。
基线(base line)——经流动相冲洗，柱与流动相达到平衡后，检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。
噪音(noise)——基线信号的波动。通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。
漂移(drift)——基线随时间的缓缓变化。主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起，柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。
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液相色谱与气相色谱的比较
液相色谱所用基本概念：保留值、塔板数、塔板高度、分离度、选择性等与气相色谱一致。液相色谱所用基本理论：塔板理论与速率方程也与气相色谱基本一致，但由于在液相色谱中以液体代替气相色谱中气体作为流动相，而液体和气体的性质不相同。此外，液相色谱所用的仪器设备和操作条件也与气相色谱不同，所以，液相色谱与气相色谱有一定的差别。
主要有以下几力‘面：
①操作条件及应用范围不同
②液相色谱能完成难度较高的分离工作
③由于液体的扩散性比气体的小105倍，因此，溶质在液相中的传质速率慢，柱外效应就显得特别重要；而在气相色谱中，由色谱柱外区域引起的扩张可以忽略不计。
④液相色谱中，制备样品简单，回收样品也比较容易，而且回收是定量的，适合于大量制备，但液相色谱尚缺乏通用的检测器，一起比较复杂，价格昂贵。在实际应用中，这两种技术是相互补充的。
综上所述，液相色谱具有柱效高，选择性高，灵敏性**析速度快，重复性好，应用范围广等优点，该法已成为现代分析技术的主要手段之一。目前在化学，化工，医药，生化，环保，农业等科学领域获得***的应用。
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在设备高度上，Vanquish系统比类似的模块化系统要矮25%，这**提高了实验室的安全性和仪器使用的便利性。广东Vanquish液相色谱系统厂家供应
高效液相色谱法之实例：
高效液相色谱法，只要求试样能制成溶液，而不需要气化，因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量**于400以上）的有机物（这些物质几乎占有机物总数的75%～80%）原则上都可以应用高效液相色谱法来进行分离、分析。据统计，在目前已知的化合物中，能用气相色谱分析的大约占20%，而能用液相色谱分析的大约占70～80%。
1、环境中有机氯农药残留量分析；
2、稠环芳烃的分析；
3．阴离子分析。 广东Vanquish液相色谱系统厂家供应
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