紫外-可见分光光度计(UV)引用新型技术,其功能强大,采用单色器技术,波长范围190-1100nm,是各种涉及水和废水分析领域的通用仪器,应用范围包括市政和工业废水,饮用水,加工过程用水,地表水,冷却水和锅炉补给水等。
在水和废水监测中的应用,对于一个水系的监测分析和综合评价,一般包括水相(溶液本身)、固相(悬浮物、底质)、生物相(水生生物)。在水质的常规监测中,紫外可见分光光度法占有较大的比重。由于水和废水的成分复杂多变,待测物的浓度和干扰物的浓度差别很大,在具体分析时必须选择好分析方法。
在农产品和食品分析中可用于检测的组分或成分有蛋白质、赖氨酸、葡萄糖、维生素C、硝酸盐、亚硝酸盐、砷、汞等;
在植物生化分析中可用于检测叶绿素、全氮和酶的活力等;
在饲料分析中可用于检测烟酸、棉酚、磷化氢和甲酯等。原理紫外可见吸收光谱主要产生于分子价电子在能级间的跃迁。利用一定频率的紫外--可见光照射被分析的物质,引起分子中价电子的跃迁,它将有选择地被吸收。吸收光谱可以反映出物质的特征。它对物质进行定性分析、定量分析及结构分析,所依据的光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。 紫外可见分光光度计计算机数据处理系统使整个分析实现自动化。可靠紫外可见分光光度计设备
重要性能指标的考察,包括:光度准确度,杂散光,光谱带宽,稳定性,噪声,波长的准确度和重复性是几个重要指标。各指标间相互独立有相互影响,需要综合考量选购目标紫外可见光分光光度计。
使用前,阅读仪器使用说明书和做好仪器使用前的工程师培训。使用过程中,正确操作、认真了解仪器指标的物理意义和测试方法以及结合仪器使用中的相关设备的调试。掌握仪器的基本保养维护知识,建立相关指标与分析测试结果之间的误差影响条件,经常检测和调试仪器,确保仪器处在合适的工作状态。
综合评价紫外可见光分光光度计仪器:根据使用领域进行初步筛选,科研、制药领域注重选择光谱可调的紫外可见光分光光度计。其中,制药中药检仪器要符合药典规定,光谱带宽要求为2nm以下。
民用紫外可见分光光度计比较紫外可见分光光度计是由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。
波长小于200nm的紫外光会被空气吸收,只能在真空中传播,因此称为真空紫外(VUV)。因此,普通的UV-Vis吸收光谱仪不能测量200nm以下的信号。
如果要测量VUV波段光谱,需要保持光路真空,光谱仪结构会更加复杂,也更加昂贵。
①单光束UV:传统的紫外,单光源发射单光束,全程密闭,通过光栅,照射样品,由光电倍增管监测器检测。
缺点:测完空白再测试样品,全波段分析时间较长(一般2min)。
②比例双光束UV:单光源单光束,全程密闭,通过光栅,加入棱镜,把光分为两束,分别照射样品与空白,再合并光,进入光电倍增管检测器,通过差减法计算结果。
好处:空白样品同时检测。
缺点:灵敏度下降,全波段分析时间较长
原子吸收分光光度计(AAS):分析定量金属原子(除冷原子),利用高温使原子获得能量变为激发态,当原子回归到基态时用相应的我阴极灯照射来检测含量。主要分火焰法、石墨炉法和氢化物发生器法。
红外:红外分近红外、中红外和远红外三种仪器。
近红外:用来定性不对称的官能团,从而定性某种化学物质。红外的原理是红外光所产生高能给予分子,分子产生震动,从振幅来检测官能团。所以,不对称,是前提。对称了就看不出振幅了。一般多为手持式。
中红外:俗称的红外,用来定性或定量不对称官能团,从而定性或定量某种化学物质。相比于近红外增加了可以定量的技能!尤其是对同分异构体的定量由为明显!原理还是震动。没有手持式。
远红外:实验室一般没有。 按所吸收光的波长区域不同,分为紫外分光光度法和可见分光光度法,合称为紫外-可见分光光度法。
紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长,通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。VarianofPaloAlto公司的CaryDeepUV和HitachiHighTechnologiesofTokyo的U-7000AutomatedVacuumUVSystem就是这样的仪器。
一些仪器具有多种光源供选择:紫外光、可见光和甚至红外光(780nm至3,000nm)。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分(大约380nm到800nm)。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。光源和检测方法(LIGHTSOURCESANDDETECTION)分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。例如AmershamBiosciencesofPiscataway公司的GeneQuantII能在230、260、280、320、595和600nm的波长下测量样品。果果需要更大的灵活性,研究者可以考虑一种更高性能的宽光谱仪器,可以程序性地进行ELISAs分析和比色分析。 紫外-可见分光光度法是利用某些物质的分子吸收200--800nm光谱区的辐射来进行分析测定的方法。材料紫外可见分光光度计经销商
目前市场上有两类主流紫外分光光度计产品:扫描光栅式分光光度计和固定光栅式分光光度计。可靠紫外可见分光光度计设备
(1)非单色光的影响:紫外一可见分光光度讣使用连续光源和分光器分光,不可能得到真正理想的单色光;为保证在测量中能得到充分的光强,仪器必须保持一定的狭缝宽度。由狭缝射出后投射到被测物质上的光,是一个有限宽度的谱带——光谱通带。随光谱通带宽度的增大,吸收光谱的分辨率降低,并偏离朗伯一比尔定律。
(2)非吸收光的影响:当来自出射狭缝的光的光谱通带宽度大于吸收光谱谱带时,投射在被测物质上的光就含有非吸收光。这不仅能使灵敏度降低,且能使校准曲线向横坐标轴弯曲而偏离朗伯一比尔定律。当以空白试剂为参比调节仪器零点时,比色皿窗材料的吸收、内外窗面的散射以及溶剂的吸收等都被抵消,所得吸光度值完全由显色溶液中待测离了浓度所决定。此时吸光度值与试液浓度一般呈线性关系。吸光度值与测定浓度不成直线关系,发生向下弯曲(负偏离)或向上弯曲(正偏离)的现象而偏离朗伯一比尔定律的主要原因如下。
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