江苏赛默飞世尔Vanquish液相色谱系统供应商

高效液相色谱分离原理

离子对

(Ion Pair Chromatography)

离子对色谱法是将一种 ( 或多种 ) 与溶质分子电荷相反的离子 ( 称为对离子或反离子 ) 加到流动相或固定相中，使其与溶质离子结合形成疏水型离子对化合物，从而控制溶质离子的保留行为。其原理可用下式表示：X水相Y-水相 === X Y-有机相

式中：X 水相--流动相中待分离的有机离子（也可是阳离子）；Y-水相--流动相中带相反电荷的离子对（如氢氧化四丁基铵、氢氧化十六烷基三甲铵等）；X Y---形成的离子对化合物。

当达平衡时：

KXY = [X Y-]有机相/[ X ]水相[Y-]水相

根据定义，分配系数为：

DX= [X Y-]有机相/[ X ]水相= KXY [Y-]水相

[讨论：DX与保留值的关系]

离子对色谱法（特别是反相）解决了以往难以分离的混合物的分离问题，诸如酸、碱和离子、非离子混合物，特别是一些生化试样如核酸、核苷、生物碱以及药物等分离。

并不是在现有的UHPLC基础上进行改进，而是完全从头开始设计了这一全新的系统。江苏赛默飞世尔Vanquish液相色谱系统供应商

高效液相色谱综述

HPLC的出现不过三十多年的时间，但这种分离分析技术的发展十分迅猛，应用十分***。其仪器结构和流程多种多样。典型的高效液相色谱仪结构和流程可用下列方框图表示(See Fig.3-4)。高效液相色谱仪一般都具备贮液器、高压泵、梯度洗提装置（用双泵）、进样器、色谱柱、检测器、恒温器、记录仪等主要部件。

高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质，因而广泛应用于核酸、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、药物、人体代谢产物、表面活性剂，抗氧化剂、杀虫剂、除锈剂的分析等物质的分析。

山东进口液相色谱系统厂家供应在设备高度上，Vanquish系统比类似的模块化系统要矮25%，这**提高了实验室的安全性和仪器使用的便利性。

赛默飞高效液相色谱业务副总裁兼总经理Fraser McLeod表示：“在整个生物制药的流程中，从药物研发到质控的批次放行，数据完整性对于决策是必不可少的。为快速获取可靠结果，灵敏度和通量非常关键。我们开发出的这套系统展示出在复杂分析应用时的**辨分离和重复性。”

• Vanquish Flex UHPLC系统采用独特设计，即便在高通量的情况下，仍可以保证分析物色谱峰拥有尖锐峰形，实现在较短时间内分析更多样品。该系统良好的稳定性和重复性为数据质量提供了可靠保障，确保能够分析大量的样品，以供质控分析比较。其重要特点如下：

• 新型四元梯度泵模块，设计稳健，性能良好，保证高通量的前提下依然可提供方法开发的灵活性。

• 泵比较大耐压 1000 bar，性能***，流速高达 8 mL/min，应用灵活，可实现**辨分离。

• 新型荧光检测器模块灵敏度高，与高灵敏度、宽线性范围的UV、DAD检测器和针对非挥发性化合物的电雾式检测器互为补充。

液相色谱理论

发展简况

液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相，称为经典液相色谱法，此方法柱效低、时间长（常有几个小时）。高效液相色谱法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)是在经典液相色谱法的基础上，于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。

它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱法(High Pressure Liquid Chromatography，HPLC)。又因分析速度快而称为高速液相色谱法(High Speed Liquid Chromatography，HSLP)。也称现代液相色谱。

高效液相色谱相关术语

峰面积(peak area，A)—峰与峰底所包围的面积。

保留时间(retention time，tR)——从进样开始到某个组分在柱后出现浓度极大值的时间。

理论塔板数(theoretical plate number，N)——用于定量表示色谱柱的分离效率（简称柱效）。

分离度(resolution，R)——相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。也叫分辨率，表示相邻两峰的分离程度。R≥1.5称为完全分离。

《中国药典》规定R应大于1.5。

拖尾因子(tailing factor，T)——T=，用以衡量色谱峰的对称性。也称为对称因子(symmetry factor)或不对称因子(asymmetry factor)。

《中国药典》规定T应为0.95~1.05。

T1.05为拖尾峰。

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