紫外-可见分光光度计是基于紫外可见分光光度法原理,利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射吸收来进行分析的一种分析仪器。主要由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。其工作原理为分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量,这就是分光光度定性和定量分析的基础。本文介绍的是日立U-3010型号紫外分光光度计的使用方法。日立U-3010型号紫外分光光度计的使用1.开电源,先开U-3010电源,再启动电脑2.点击桌面上UV,启动程序3.点击method窗口,将会出现GeneralQuantitationinstrumentMonitorReport五个对话框,如下图所示:4.设置(1)General对话框;(2)Quantitation对话框,如果测波长选择wavelength,数量可选多个,比如测定:260nm,280nm,230nm,则选择3个;如图所示:(3)Instrument对话框,将你要测定的波长值依次输入框内;(4)设置好后,点确定键5.放入空白对照。上海元析的光度计质量可靠吗?云南火焰分光光度计型号
一些仪器具有多种光源供选择:紫外光、可见光和甚至红外光(780 nm 至3,000 nm)。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分(大约380 nm 到800 nm)。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。分光光度计的带宽(bandwidth)很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。为了测量吸光值,分光光度计制造商通常使用光电倍增管(photo-multiplier tubes,PMTs)和光敏二极管。重庆元析光度计原理光度计有什么特点?上海元析告诉您。
并更换干燥剂。d.电路故障。解决方法:检修电路。2、仪器不能调“100%”。可能原因:a.光能量不够。解决方法:增加灵敏度倍率档位,或更换光源灯(尽管灯还亮)。b.比色皿架未落位。解决方法:调整比色皿架使其落位。c.光电转换部分老化。解决方法:更换部件。d.电路故障。解决方法:调修电路。3、测量过程中,“100%”点经常变动。可能原因:a.比色皿在比色皿架中放置的位置不一致,或其表面有液滴。解决方法:用擦镜纸擦干净比色皿表面,然后将其安放在比色槽的左边,上面用定位夹定位。b.电路故障(电压、光电接收、放大电路)。解决方法:送修。4、数显不稳。可能原因:a.预热时间不够。解决方法:延长预热时间至30分钟左右(部分仪器由于老化等原因,长时间处于工作状态时,也会工作不稳)。b.光电管内的干燥剂失效,使微电流放大器受潮。解决方法:烘烤电路,并更换或烘烤干燥剂。c.环境振动过大、光源附近空气流速大、外界强光照射等。解决方法:改善工作环境。d.光电管、电路等其它原因。小结综上所述,以下几个问题应引起仪器操作人员注意:1、比色皿架及比色皿在使用中的正确到位问题。有些使用者对这个问题不够重视,因操作不当造成偶然误差,严重影响分析结果。
罗丹明B的标准溶液的荧光光谱如图4所示。短波长侧的荧光被再次吸收,导致标准溶液的浓度变高的同时峰顶向长波长侧变化。根据577nm的荧光强度值创建的标准曲线如图5以及图6所示。如图5所示,在ug/ml(Abs)或更高的高浓度区域,标准曲线是弯曲的,但在图6的低浓度区域,可获得线性度良好的标准曲线。3比较结果、定量下限值来比较灵敏度与应用报告,使用标准曲线和10次空白测定中计算得的标准偏差σ,计算出了定量下限值(10σ)和检测下限值(3σ)。另外,采用了线性度较高的标准曲线。UV-2600i和RF-6000的定量下限值和检测下限值如表3所示。从通过本实验算出的定量下限值的比可知,RF-6000的灵敏度较高,是UV-2600i的400倍以上。即使对图3和图6的低浓度区域的标准曲线进行比较,图6(RF-6000)的结果中得到了离散较小的标准曲线。与对未被样品吸收的照射光进行检测的吸光光度法不同,荧光光度法以零为标准检测荧光,因此噪声水平低,可得到较高的灵敏度。UV-2600i和RF-6000的标准曲线的相关系数的平方值与浓度范围的关系如表4所示。另外,使用UV-2600i时,低于空白以外的定量下限值的点除外。即使在未达到UV-2600i的定量下限值的区域(0~)。上海元析光度计值得推荐。
在前面几期《聚创环保小科普》中,小聚从光度计的原理到紫外可见分光光度计的使用说明,再到适用领域给各位看官介绍的明明白白,本期小聚给大家重点介绍一下“为什么光度计分为红外的?紫外的?原子荧光的?超微量的?火焰的?”是不是在选购上很是迷茫呢?不要着急,下面重点给大家介绍。首先:什么是光度计?简单说,光度计是将成分复杂的光,分解成光谱线的科学检测仪器。一、紫外可见分光光度计和红外分光光度计的原理不同:紫外可见分光光度计的原理:物质的吸收光谱本质上是物质中的分子和原子吸收了光中的光波能量,相应地发生了分子振动级跃迁和电子能级跃迁的结果,由于各种物质具有不同的分子原子和分子结构,所以在吸收光能量的情况也各不相同,仪器通过各种物质特有的吸光光谱的曲线,来判定被检测物质的含量,这就是紫外可见分光光度计定性和定量的基础,紫外可见分光光度计就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分,结构。红外分光光度计的原理:由光源发出的光,被分为能量相同的两束光线,其中一束通过样品,另外一束作为参考光作为参照基准。这两束光通过样品进入红外分光光度计后,被扇形镜以一定的频率调制,形成交变信号,两束光合为一束。上海元析光度计值得信赖。贵州元析光度计型号
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并交替通过入射狭缝进入单色器中,经离轴抛物镜将光束平行地投射在光栅上,色散并通过出射狭缝之后,被滤光片滤除高级次光谱,再经椭球镜聚焦在探测器的接收面上。探测器将上述交变的信号转换为相应的电信号,经放大器进行电压放大后,转入A/D转换单位,计算机处理后得到从高波数到低波数的红外吸收光谱图。JC-HW30A双光束红外分光光度计二、紫外可见分光光度计和红外分光光度计的概述不同:1、紫外分光光度计的概述:根据吸收光谱图上的一些特征吸收,特别是比较大吸收波长λmax和摩尔吸收系数ε是检定物质的常用物理参数。这在药物分析上就有着很***的应用。在国内外的药典中,已将众多的药物紫外吸收光谱的比较大吸收波长和吸收系数载入其中,为药物分析提供了很好的手段。2、红外分光光度计的概述:由光源发出的光,被分为能量均等对称的两束,一束为样品光通过样品,另一束为参考光作为基准。这两束光通过样品室进入光度计后,被扇形镜以一定的频率所调制,形成交变信号。三、紫外可见分光光度计和红外分光光度计的应用不同:1、紫外分光光度计的应用:将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中,在同一条件下分别测定紫外可见吸收光谱。若两者是同一物质。云南火焰分光光度计型号
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