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蛋白质的标记：在体外诊断应用领域，通常采用抗原或抗体与免疫金结合制备免疫金结合物。采用单克隆抗体或多克隆抗体，是影响抗体标记的因素之一。虽然诊断产品中大多数抗体标记采用IgG抗体，但IgM、IgE和IgA抗体也可以成功标记上胶体金。标记时，进一步必须考虑抗体的亚型。在鼠抗IgG亚型中，例如IgG1亚型成功率高，而IgG3亚型被证实有技术难度。将抗原标记胶体金也面临技术难题。将常见的抗原标记上胶体金比较容易。但是受抗原与胶体金结合方式的影响，金标记覆盖的蛋白反应决定簇小于50%时才能高成功率制备出标记物。因此，考虑蛋白结合金的方式对标记开发人员非常重要。 CRP项目，有证参考物质浓度范围在5μg/mL～9μg/mL时，相对偏差≤±10%。宁夏金标读数仪厂家直销

胶体金免疫层析是当前新兴的一种结合免疫分析技术、侧向层析技术、胶体金标记技术的快速检测手段。胶体金免疫层析试纸条主要根据抗原或抗体与胶体金特异性结合后所呈现出的颜色深浅而得出待检测液浓度，从而实现定性和定量检测。

胶体金免疫层析的实现得益于胶体金的显色。胶体金是金氯酸(HAuCl4)被还原后形成的金颗粒，在弱碱性环境下因表面吸附了AuCl4-和H+等离子而带有负电荷。这些负电荷与蛋白质分子中的正电荷基团结合形成免疫胶体金。 吉林自动化读数仪品牌内置条形码识别模块，支持试剂条项目自动识别功能。

快速诊断技术（侧向层析和渗滤测试盒）。对于该应用方向，常用的胶体金颗粒是40nm.在标记IgG时，40nm的胶体金颗粒提供较大的可视性和较小的空间位阻。分子量为160kDa的IgG分子，长度大约为8nm.40-100nm间的胶体金颗粒比较顺利标记到IgG抗体上。比40nm大的颗粒有较大的可视性，但较大胶体金颗粒在1ml溶液时520nm吸光度较小，因此较少在检测线处被捕获。综上所述，同40nm或60nm胶体金标记的抗体相比，较大颗粒的胶体金结合物对1-10ng/ml分析物具有较低的灵敏度。60nm胶体金颗粒非推荐使用，但可以应用于快速诊断分析。其不同于40nm胶体金颗粒，颜色偏浅。高质量的40nm胶体金为樱桃红色，而60nm胶体金为深粉红色。在某种情况下，样品类型可使膜上残留背景底色，这种轻微的颜色差异可以使信号容易识别。比如，含有胆红素的样本将留下的背景底色，相对褐色，粉红色较红色容易被识别。如果用于标记分子的分子量小于160kDa，20nm胶体金颗粒更适合。20nm胶体金颗粒通常用于标记链霉亲和素、A蛋白和抗原，这些被标记蛋白的分子量小于60kda.灵敏度随着快速诊断技术进步使胶体金结合物的灵敏度得到提高。

金标免疫试验的原理将氯金酸(HAuCl4)用还原法制成一定直径的金溶胶颗粒(胶体金)标记抗体，(或金黄色葡萄球菌A蛋白SPA)。金标为一种催化剂，经还原剂(如对苯二酸)处理，将显影剂中的银离子还原成不溶性金属银，沉淀在每个金颗粒的周围，银沉淀在光镜下可清楚地显示。滴金免疫实验原理同一般免疫斑点实验，也是用已知抗原或抗体包被硝酸纤维素膜，再用金标记抗体或抗原进行快速测定。临床应用的有两种方法：金标一步法(层析法)和金标二步法(斑点渗漏法)。具体讲即用两个人HCG—β单克隆抗体，一个抗体吸附于硝酸纤维素薄膜(NC膜)上，另一抗体结合于金溶胶颗粒表面。尿中HCG先与NC膜上的抗体-结合，然后再与金标单抗溶液反应，形成抗体一HCG一金标抗体的加心式复合物．红色的金斑点．功能丰富，支持 急诊插入检测。

半定量与定量：在测定一般正常体液中存在而在疾病时升高的物质时，如单以超过正常参考值上限为阳性界限往往不能满足临床要求。胶体金显色深浅与被测物浓度有一定相关性，因此可对被测物进行定量检测。金标定量：1、DIGFA：膜上斑点免疫金标显色终点时用光电比色2、DIGCA：由于反应在NC膜上呈横流推进，测定线上反应出现的颜色逐渐加深，液流速度、反应温度等为可变因素，很难在规定时间得到恒定结果。金标半定量：1.DIGFA2、2.DIGCA。内置4G模块，支持远程质控，远程标曲升级等云端通讯。甘肃读数仪批发价

通过仪器辨别试纸条颜色变化，能够避免人为判读所造成的主观误差。宁夏金标读数仪厂家直销

蛋白质的处理：胶体金标记蛋白的制备：胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值，在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下，二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的pH值低于蛋白质的等电点时，则会聚集而失去结合能力。除此以外胶体金颗粒的大小、离子强度、蛋白质的分子量等都影响胶体金与蛋白质的结合。待标记蛋白溶液的制备将待标记蛋白预先对0.005Mol/LpH7.0NaCl溶液中4℃透析过夜，以除去多余的盐离子，然后100000g4℃离心1h，去除聚合物。待标胶体金溶液的准备以0.1Mol/LK2CO3或0.1Mol/LHCl调胶体金液的pH值。标记IgG时，调至9.0；标记McAb时，调至8.2；标记亲和层析抗体时，调至7.6；标记SPA时，调至5.9～6.2；标记ConA时，调至8.0；标记亲和素时，调至9～10.由于胶体金溶液可能损坏pH计的电板，因此，在调节pH时，采用精密pH试纸测定为宜。由于盐类成分能影响金溶胶对蛋白质的吸附，并可使溶胶聚沉，故致敏前应先对低离子强度的水透析。必须注意，蛋白质溶液应确保澄清无细小微粒，否则应先用微孔滤膜或超速离心除去。一般情况下应避免磷酸根离子和硼酸根离子的存在，因为它们都可吸附于颗粒表面而减弱胶体金对蛋白质的吸附。宁夏金标读数仪厂家直销

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