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半定量与定量：在测定一般正常体液中存在而在疾病时升高的物质时，如单以超过正常参考值上限为阳性界限往往不能满足临床要求。胶体金显色深浅与被测物浓度有一定相关性，因此可对被测物进行定量检测。金标定量：1、DIGFA：膜上斑点免疫金标显色终点时用光电比色2、DIGCA：由于反应在NC膜上呈横流推进，测定线上反应出现的颜色逐渐加深，液流速度、反应温度等为可变因素，很难在规定时间得到恒定结果。金标半定量：1.DIGFA2、2.DIGCA。可应用于海关检验检疫、环境监测、食品安全、临床诊断、药物筛选、重大疾病诊断检测等。广西金标免疫层析读数仪代理商

提到胶体金快速诊断技术，不得不首先提到POCT。在临床医学检测技术中，POCT（point of care testing，简称 POCT）是指任何由医院专业人士或非专业人员，在检测中心以外进行的检测，简称为即时检验。它使烦琐的检验过程得以简化，取代了需要较高维护成本的传统仪器设备。近年来，随着微加工技术的发展和生物学领域的要求，发展易于操作、检测信号易于判断、试剂消耗量少、反应时间、自动化程度更高、仪器小型易携带、可实现高通量、大规模的检测的POCT快速诊断技术已成为国内外研究的热点。宁夏多通道胶体金读数仪报价**的光电一体化解决方案，保障了优良的检测重复性。

胶体金免疫层析技术：90年代初在金标渗滤技术的基础上建立起了一种简易快速的免疫学检测技术，即金标免疫层析技术。其技术原理是：将金标抗体固化在玻璃纤维或无纺布上，同时在硝酸纤维素膜上包被一条检测线及一条控制线，随后一同和样品垫、吸水垫及不干胶一起组合粘贴在塑料垫板上，再按一定规格切成检测条。检测时，样品首先吸附在样品垫，样品在水平流动过程中将固化金标抗体溶解，并随之通过硝酸纤维素膜向吸水滤纸端继续水平流动，吸水滤纸会帮助样品流动。若样品中存在被检测物质，测硝酸纤维素膜上包被的检测线和对照线会同时显色。否则，反应膜上只出现一条对照线。金标免疫层析技术快速、简便、稳定性好，有效期可长达2-3年。Beggs等于1990年将此技术用于HCG检测。随后由胶体金代替胶体硒用于乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）等检测，目前已多方面应用于病毒、细菌及各种蛋白质的检测，是目前临床检验应用次于ELISA的一种重要的检测试剂，但是检测时间却比酶免缩短近5倍，这促进了该方法的普及应用。

    标记：胶体金与蛋白质（IgG）的结合：将胶体金和IgG溶液分别以，电磁搅拌IgG溶液，加入胶体金溶液，继续搅拌10min，加入一定量的稳定剂以防止抗体蛋白与胶体金聚合发生沉淀。常用稳定剂是5％胎牛血清（BSA）和1％聚乙二醇（分子量20KD）。加入量：5％BSA使溶液终浓度为1％；1％聚乙二醇加至总溶液的1／10.在接近并略为高于蛋白质等电点的条件下标记是比较合适的，在此情况下蛋白质分子在金颗粒表面的吸附量大。步骤：①用0、1mol/LK2CO3或(标记ＳＰＡ时调到)。②于100ml金溶胶中加入合适标记量的蛋白质溶液（体积为２～３ml），搅拌２～３分钟。③加入5ml１％PEG20000溶液。④于10000～100000g离心30～60分钟（根据粒径大小选择不同离心条件），小心吸去上清液（切忌倾倒）。⑤将沉淀悬浮于一定体积含～，离心沉淀后，再用同一缓冲液恢复，浓度以Ａ1cm/540nm=，以，置4℃保存。⑥包被后的金溶胶也可浓缩后于SephadexG-200柱进行凝胶层析分离纯化，以含％ＢＳＡ的缓冲溶液洗通常用IgG包被的金溶胶洗脱液pH为。 采用现代光电技术，用光电传感器测量反射光强度，定量或定性分析金标试纸颜色深浅，计算被测物含量或浓度。

胶体金标记蛋白质的分离纯化：各种方法所得到的胶体金颗粒直径，是大多数颗粒的平均直径。实际工作中所得到的胶体金，是各种近似直径颗粒的混合体，标记过程中，并不是所有金颗粒都可以得到稳定。因此，胶体金标记蛋白质后，必须进行分离纯化，以除去未参与标记的过量蛋白质、未稳定的金颗粒及各种可能形成的聚合物。在胶体金标记蛋白质过程中，除严格控制胶体金的制备工艺外，标记后选择合适的纯化方法十分关键。金标蛋白质的分离纯化与同位素、荧光素、发光剂及酶标抗体的纯化方法不同，其主要特点是金标蛋白质的质量大，并以溶胶形式存在，对纯化过程中的pH值、离子强度变化及某些杂质等因素较为敏感，不易采用盐析、离子交换、亲合层析等常规方法进行分离。目前主要采用超速离心和凝胶过滤两种纯化方法。CRP项目，有证参考物质浓度范围在5μg/mL～9μg/mL时，相对偏差≤±10%。海南胶体金快速检测读数仪市场价

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    免疫胶体金的制备1、制备胶体金标记蛋白质应注意的问题（1）蛋白质的预处理。蛋白质应先对低离子强度的水透析，去除盐类成分。用微孔滤膜或超速离心除去蛋白质溶液中的细小微粒。（2）低盐浓度的缓冲液。过量盐可使金颗粒发生凝集。（3）当PH接近于蛋白质等电点或略偏碱性。蛋白质所处溶解状态较适合偶联，蛋白质分子在金颗粒表面的吸附量较大。（4）蛋白质适用量的选择：能使胶体金稳定的合适蛋白量再加10％即为*佳标记蛋白量。（5）胶体金与蛋白质偶联后，加入稳定剂，以避免产生凝集。一般选用PEG（分子量为20000）和牛血清白蛋白作稳定剂。2、常见方法（1）用。（2）加入*佳标记量的蛋白质溶液，搅拌2～3分钟。（3）加入5ml1％PEG20000溶液。（4）于10000～100000g离心，小心吸去上清液。（5）将沉淀悬浮于一定的缓冲液中，离心沉淀后，再用同一缓冲液恢复，浓度以Ａ1cm/540nm=，置4℃保存。 广西金标免疫层析读数仪代理商

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