紫外可见分光光度计之比色皿的选择与使用小技巧比色皿透光面是由能够透过所使用的波长范围的光的材料制成。在200-350nm工作的比色皿适用于紫外区,必须使用石英或熔熔硅石制成透光面的石英比色皿。(注:熔熔硅石的还真没见过,只用过石英的)石英比色皿既可用于紫外区又可用于可见区,但是价格一般比较贵,所以要根据使用波长选择比色皿,如果不用紫外区的话,用普通玻璃比色皿就行了,一则浪费没必要,二则,嘿嘿,摔碎了也不心疼,哈哈。而普通硅酸盐光学玻璃制成的透光面的比色皿,只能用于350nm至1000nm的可见区。
一直以来都认为比色皿洗涤不干净会造成很大实验误差,才发现原来比色皿选择不当也能造成不可预测的误差。在此,就小结下有关如何正确选择比色皿、比色皿使用注意事项以及比色皿的洗涤方法。
紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。单光束型主要是依赖单束光进行测量。环境检测紫外可见分光光度计对比
若大幅度改变测试波长,需稍等片刻,等灯热平衡后,重新校正“0”和“100%”点。然后再测量。
指针式仪器在未接通电源时,电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况,需进行机械调零。
比色皿使用完毕后,请立即用蒸馏水冲洗干净,并用干净柔软的纱布将水迹擦去,以防止表面光洁度被破坏,影响比色皿的透光率。
操作人员不应轻易动灯泡及反光镜灯,以免影响光效率。分光光度计作为一种精密仪器,在运行工作过程中由于工作环境、操作方法等种种原因,其技术状况必然会发生某些变化,可能影响设备的性能,甚至诱发设备故障及事故。因此,分析工作者必须了解分光光度计的基本原理和使用说明,并能及时发现和排除这些隐患,对已产生的故障及时维修才能保证仪器设备的正常运行。 国产**紫外可见分光光度计仪器紫外分光光度计的光栅是一系列等宽、等距离的平行狭缝,以光的衍射现象和干涉现象为基础。
波长小于200nm的紫外光会被空气吸收,只能在真空中传播,因此称为真空紫外(VUV)。因此,普通的UV-Vis吸收光谱仪不能测量200nm以下的信号。如果要测量VUV波段光谱,需要保持光路真空,光谱仪结构会更加复杂,也更加昂贵。①单光束UV:传统的紫外,单光源发射单光束,全程密闭,通过光栅,照射样品,由光电倍增管监测器检测。缺点:测完空白再测试样品,全波段分析时间较长(一般2min)。②比例双光束UV:单光源单光束,全程密闭,通过光栅,加入棱镜,把光分为两束,分别照射样品与空白,再合并光,进入光电倍增管检测器,通过差减法计算结果。好处:空白样品同时检测。缺点:灵敏度下降,全波段分析时间较长
使用紫外可见分光光度计时需要注意哪些方面?
使用的吸收池必须洁净,并注意配对使用。量瓶、移液吸管均应校正、洗净后使用。
取吸收池时,手指应拿毛玻璃面的两侧,装盛样品以池体的4/5为度,使用挥发性溶液时应加盖,透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净,检视应无溶剂残留。吸收池放入样品室时应注意方向相同。用后用溶剂或水冲洗干净,晾干防尘保存。
供试品溶液浓度除各该品种已有注明外,其吸收度以在0.3~0.7之间为宜。
测定时除另有规定外,应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照,采用1cm石英吸收池,在规定的吸收峰±2nm以内,测几个点的吸收度或由仪器在规定的波长附近自动扫描测定,以核对供试品的吸收峰位置是否正确,并以吸收度MAX的波长作为测定波长,除另有规定外吸收度MAX波长应在该品种项下规定的测定波长±2nm以内。
供试品应取2份,如为对照品比较法,对照品一般也应取2份。平行操作,每份结果对平均值的偏差应在±0.5%以内。
选用仪器的狭缝宽度应小于供试品吸收带的半宽度,否则测得的吸收度值会偏低,狭缝宽度的选择应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准,对于大部分被测品种,可以使用2nm缝宽。 分光光度计的氘灯和汞灯是在不同波长的时候有程序控制自动变换的,一般是在360nm处变换。
玻璃吸收池用于可见光区测定,石英吸收池用于紫外光区的测定。吸收池的规格以光程为标志。常用的吸收池规格有0.5cm、1.0cm、2.0cm、3.0cm、5.0cm等。光栅实现上就是一系列等宽、等距离的平行狭缝,它是利用光的衍射与干涉作用制成的。光栅作为色散元件具有不少独特的优点,光栅单色器的分辨率比棱镜单色器的分辨率高,可精确到0.2nm,而且可用的波长范围也比棱镜单色器的范围宽。所以,目前生产的紫外可见分光光度计大多采用光栅作为色散元件。吸收池是用于盛装待测液并决定待测溶液透光液层厚度的器皿,又称比色皿。吸收池一般为长方体,也有圆形或其它形状的。其底及两侧为毛玻璃,另两面为光学透光面。根据光学透光面的材质,吸收池又可分为玻璃吸收池和石英吸收池两种。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。**紫外可见分光光度计生产厂家
波长范围越宽的价格越贵;波长准确度及杂散光参数的数值越低,表示性能越好。环境检测紫外可见分光光度计对比
原子吸收分光光度计(AAS):分析定量金属原子(除冷原子),利用高温使原子获得能量变为激发态,当原子回归到基态时用相应的我阴极灯照射来检测含量。主要分火焰法、石墨炉法和氢化物发生器法。
红外:红外分近红外、中红外和远红外三种仪器。
近红外:用来定性不对称的官能团,从而定性某种化学物质。红外的原理是红外光所产生高能给予分子,分子产生震动,从振幅来检测官能团。所以,不对称,是前提。对称了就看不出振幅了。一般多为手持式。
中红外:俗称的红外,用来定性或定量不对称官能团,从而定性或定量某种化学物质。相比于近红外增加了可以定量的技能!尤其是对同分异构体的定量由为明显!原理还是震动。没有手持式。
远红外:实验室一般没有。 环境检测紫外可见分光光度计对比