编辑|steins来源|岛津分析中心背景摘要:紫外可见分光光度计和荧光分光光度计都经常用于样品定量。使用紫外可见分光光度计进行定量时基于朗伯比尔定律，测定的吸收值一定范围内与样品浓度成正比。另一方面，利用荧光分光光度计时，使用荧光强度。在低浓度时，荧光强度与浓度成正比，所以，可以用于定量。本次使用紫外可见分光光度计和荧光分光光度计两台仪器分别测定了罗丹明B溶液。罗丹明B是用于纤维和皮革的染色的荧光物质。关于测定结果，对两个机种的定量、检测下限值和标准曲线的线性度进行了比较，下面将进行介绍。1紫外1罗丹明B溶液的吸光度测定使用了紫外可见分光光度计UV-260Oi测定样品吸光度。测定条件如表1所示。将粉末状的罗丹明B溶解在蒸馏水中，调配～5ug/ml的标准溶液。罗丹明B的标准溶液的吸光光谱如图1所示，根据544nm的吸光度值创建的标准曲线如图2和图3所示。在图2中，用～5ug/ml的6点和空白样品（蒸馏水）创建，得到了线性度良好的标准曲线（相关系数的平方值是)。在图3所示的低浓度区域中，噪声的影响相对较大，导致线性较差。2荧光2罗丹明B溶液的荧光强度测定使用了荧光分光光度计RF-60O0测定了样品荧光强度。测定条件如表2所示。紫外-可见分光光度计可用于大部分有色物质的定量监测,通常需要使用各种各样的显色剂。天津uv分光光度计使用
在前面几期《聚创环保小科普》中，小聚从光度计的原理到紫外可见分光光度计的使用说明，再到适用领域给各位看官介绍的明明白白，本期小聚给大家重点介绍一下“为什么光度计分为红外的？紫外的？原子荧光的？超微量的？火焰的？”是不是在选购上很是迷茫呢？不要着急，下面重点给大家介绍。首先：什么是光度计？简单说，光度计是将成分复杂的光，分解成光谱线的科学检测仪器。一、紫外可见分光光度计和红外分光光度计的原理不同：紫外可见分光光度计的原理：物质的吸收光谱本质上是物质中的分子和原子吸收了光中的光波能量，相应地发生了分子振动级跃迁和电子能级跃迁的结果，由于各种物质具有不同的分子原子和分子结构，所以在吸收光能量的情况也各不相同，仪器通过各种物质特有的吸光光谱的曲线，来判定被检测物质的含量，这就是紫外可见分光光度计定性和定量的基础，紫外可见分光光度计就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分，结构。海南国产分光光度计型号扫描型分光光度计采用单片微机控制，宽大液晶显示器可显示多组数据。
由于仪器的制造和调整误差，单色光的实际波长与仪器的波长读数值间都存在一定的误差。样品中绝大部分的主要吸收峰都有一定的宽度，对波长准确度要求允许宽些。但是，当吸收峰宽度较小，而且吸收峰两侧边缘比较陡直，此时波长准确度的影响就必须引起注意。2、透射比（吸光度）准确度很显然,透射比或吸光度的误差越大,测试结果的可信性越差,从而影响到测试数据的准确性。3、杂散光杂散光是由于光学元件制造误差以及光学和机械零件表面的漫反射形成的。杂散光是分析样品的非吸收光，随着样品浓度的增加，杂散光的影响也随之增大，将给分析结果带来一定的误差。在紫外的短波区域光源强度和检测器的灵敏度均明显减弱，杂散光的影响更不能忽视。因此，杂散光的大小也是仪器性能的一项重要指标。使用与维护1、若大幅度改变测试波长，需稍等片刻，等灯热平衡后，重新校正“0”和“100%”点。然后再测量。2、指针式仪器在未接通电源时，电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况，需进行机械调零。3、比色皿使用完毕后，请立即用蒸馏水冲洗干净，并用干净柔软的纱布将水迹擦去，以防止表面光洁度被破坏，影响比色皿的透光率。4、操作人员不应轻易动灯泡及反光镜灯。
在零点不受光的条件下，用零点调节器将仪器调至零点，观察3分钟读取透射比的变化，即，为零点稳定性。在仪器测量范围两端向中间靠10nm处，调节零点后，盖上样品室盖(打开光门)，使光电管受光，调节透射比为95%（数显仪器调至100%）察3分钟读取透射比的变化，为光电流稳定性。在零点不受光的条件下，用零点调节器将仪器调至零点，观察3分钟读取透射比的变化，即，为零点稳定性。在仪器测量范围两端向中间靠10nm处，调节零点后，盖上样品室盖(打开光门)，使光电管受光，调节透射比为95%（数显仪器调至100%）察3分钟读取透射比的变化，为光电流稳定性。双光束分光光度计的两束光同时通过参比溶液和样品溶液，因此能够自动消除光源强度变化所引起的误差。
一般来说，紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。顾名思义，单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物，然后再通过实际样品溶液，就能得到吸光结果。双光束型则是通过一个斩光轮（mirroredchopperwheel）将一束光分成两束，分别测量对照样品和实际样品。可以较小化光漂移（lampdrift）和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮，而是利用一种光束分光器来代替，将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度，所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。超微量分光光度计氙气闪光灯为灯源.湖北元析分光光度计教程
分光光度计是食品厂、饮用水厂办理QS、HACCP认证的必备检验设备。天津uv分光光度计使用
在仪器改变测试波长和测试一段时间后可通过按0%键和100%/0A键对仪器进行调零和调满度、吸光度。（5）显示方式的选择【相关实验】邻二氮菲吸光光度法测定铁的含量报告实验目的邻二氮菲吸光光度法测定铁的含量；熟悉722N型分光光度计的原理和操作。实验原理邻二氮菲吸光光度法是测定铁含量的常用方法。在PH为2~9的溶液中，Fe2+的显色剂邻二氮菲形成稳定的橘红色络合物，该络合物在508nm波长处有**大吸收。为了消除Fe2+的副反应及其他因素的影响，在微酸溶液进行，且用盐酸羟胺将Fe3+还原为Fe2+。吸光光度法定量分析的依据是朗伯比尔定律A=Ɛbc，当液层厚度b一定时A=Kc，吸光光度法定量分析的方法有直接比较法和标准曲线法，这个实验用标准曲线法。在标准曲线上查出试液中铁的含量，按下式求出原始待测溶液中铁的含量（ρ表示溶液中铁的含量，mg/L）ρFe,原始待测溶液=ρFe,标准曲线查得50/10实验步骤1、取出容量瓶和移液管，用蒸馏水清洗容量瓶并用相应的溶液润洗移液管；2、在6个容量瓶中用刻度移液管分别加入,、、、、、，5mLHAc-NaAc缓冲溶液，1mL10%盐酸羟胺溶液及，用水定容。将其分别对应编号为1、2、3、4、5、6号。天津uv分光光度计使用
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