编辑|steins来源|岛津分析中心背景摘要:紫外可见分光光度计和荧光分光光度计都经常用于样品定量。使用紫外可见分光光度计进行定量时基于朗伯比尔定律，测定的吸收值一定范围内与样品浓度成正比。另一方面，利用荧光分光光度计时，使用荧光强度。在低浓度时，荧光强度与浓度成正比，所以，可以用于定量。本次使用紫外可见分光光度计和荧光分光光度计两台仪器分别测定了罗丹明B溶液。罗丹明B是用于纤维和皮革的染色的荧光物质。关于测定结果，对两个机种的定量、检测下限值和标准曲线的线性度进行了比较，下面将进行介绍。1紫外1罗丹明B溶液的吸光度测定使用了紫外可见分光光度计UV-260Oi测定样品吸光度。测定条件如表1所示。将粉末状的罗丹明B溶解在蒸馏水中，调配～5ug/ml的标准溶液。罗丹明B的标准溶液的吸光光谱如图1所示，根据544nm的吸光度值创建的标准曲线如图2和图3所示。在图2中，用～5ug/ml的6点和空白样品（蒸馏水）创建，得到了线性度良好的标准曲线（相关系数的平方值是)。在图3所示的低浓度区域中，噪声的影响相对较大，导致线性较差。2荧光2罗丹明B溶液的荧光强度测定使用了荧光分光光度计RF-60O0测定了样品荧光强度。测定条件如表2所示。分光光度计，又称光谱仪(spectrometer)，是将成分复杂的光，分解为光谱线的科学仪器。新疆可见分光分光光度计推荐
杂散光是由于光学元件制造误差以及光学和机械零件表面的漫反射形成的。杂散光是分析样品的非吸收光，随着样品浓度的增加，杂散光的影响也随之增大，将给分析结果带来一定的误差。在紫外的短波区域光源强度和检测器的灵敏度均明显减弱，杂散光的影响更不能忽视。若大幅度改变测试波长，需稍等片刻，等灯热平衡后，重新校正“0”和“100%”点。然后再测量。指针式仪器在未接通电源时，电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况，需进行机械调零。北京分光分光光度计操作选购分光光度计时需要考虑紫外可见分光光度计能够接受的样品类型。
UV-9000S型双光束紫外可见分光光度计产品名称：UV-9000S型双光束紫外可见分光光度计产品型号：仪器特点和功能◆采用精选检测器、氘灯、钨灯等关键元器件，仪器经久耐用◆精选光栅的使用不仅提高了紫外区的能量，同时使仪器具有低杂散光◆采用获得**的双光路光学系统（实用新型专利号ZL20132），双检测器；◆采用320*240位点阵式高亮6”液晶显示器，显示清晰，◆主机可自主完成光度测量、定量测量、光谱扫描、动力学、DNA/蛋白质测试，多波长测试及数据打印等功能◆采用光学系统悬架式设计，整体光路固定在16mm厚的切削铝制无变形基座上，底板的变形和外界的震动对光学系统不产生影响，从而提高仪器稳定性◆考虑不同用户的使用习惯，本系列仪器都标配元析公司光谱扫描软件，联机操作时，除能实现主机测试功能外，还可实现较多的数据处理功能，并且使数据存储量不受限制◆UV-9000S型具有仪器指标波长范围190-900nm（可达1100nm）光谱带宽。
UV-5800（PC）型紫外可见分光光度计仪器特点和功能◆双光束比例监测光学系统◆仪器采用128*64位点阵式液晶显示器，每屏可显示多组数据◆能直接建立标准曲线，并可用标准曲线进行相关的测试◆可连续测试和存储200组数据，并可存储200条标准曲线，用户可根据编号方便调用，测试数据可断电保持◆波长自动校准、自动设定、偏差自我修复◆插座式钨灯设计，换灯免光学调试◆采用悬架式光学系统设计，整体光路固定在8mm厚的切削铝制无变形基座上，底板的变形和外界的震动对光学系统不产生任何影响，从而**提高了仪器的稳定性◆V-5800PC型标配元析公司的扫描软件可直接完成光度测量、定量测试、定性测试、动力学测试、多波长测试、DNA/蛋白质测试及数据图谱的处理仪器指标波长范围190-1100nm光谱带宽2nm杂散光≤。 紫外可见分光光度计的钨灯光源发出400～760nm波长的光谱。
分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。例如AmershamBiosciencesofPiscataway公司的GeneQuantII能在230、260、280、320、595和600nm的波长下测量样品。果果需要更大的灵活性，研究者可以考虑一种更高性能的宽光谱仪器，可以程序性地进行ELISAs分析和比色分析。紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长，通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。紫外-可见分光光度计可用于大部分有色物质的定量监测,通常需要使用各种各样的显色剂。四川元析分光光度计选购
紫外分光光度计的主要功能包括定量测量、动力学测量、光度测量、定性测量、蛋白测试。新疆可见分光分光光度计推荐
一些仪器具有多种光源供选择：紫外光、可见光和甚至红外光（780nm至3,000nm）。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分（大约380nm到800nm）。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。分光光度计的带宽（bandwidth）很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。为了测量吸光值，分光光度计制造商通常使用光电倍增管（photo-multipliertubes，PMTs）和光敏二极管。新疆可见分光分光光度计推荐
