液相色谱与气相色谱的比较
液相色谱所用基本概念:保留值、塔板数、塔板高度、分离度、选择性等与气相色谱一致。液相色谱所用基本理论:塔板理论与速率方程也与气相色谱基本一致,但由于在液相色谱中以液体代替气相色谱中气体作为流动相,而液体和气体的性质不相同。此外,液相色谱所用的仪器设备和操作条件也与气相色谱不同,所以,液相色谱与气相色谱有一定的差别。
主要有以下几力‘面:
①操作条件及应用范围不同
②液相色谱能完成难度较高的分离工作
③由于液体的扩散性比气体的小105倍,因此,溶质在液相中的传质速率慢,柱外效应就显得特别重要;而在气相色谱中,由色谱柱外区域引起的扩张可以忽略不计。
④液相色谱中,制备样品简单,回收样品也比较容易,而且回收是定量的,适合于大量制备,但液相色谱尚缺乏通用的检测器,一起比较复杂,价格昂贵。在实际应用中,这两种技术是相互补充的。
综上所述,液相色谱具有柱效高,选择性高,灵敏性**析速度快,重复性好,应用范围广等优点,该法已成为现代分析技术的主要手段之一。目前在化学,化工,医药,生化,环保,农业等科学领域获得***的应用。
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串联 LC 或 LC-MS应用提**析通量 Vanquish Duo系统
串联 LC 或 LC-MS 的 Vanquish Duo 系统将两个泵和两个色谱柱之间的分析分开。一个泵运行分析梯度,而另一个泵运行再生平衡梯度。您可通过该项配置,使用两个相同的色谱柱更快地运行序列,而不影响数据品质。
串联 LC 或 LC-MS(Thermo Scientific™ Q Exactive™ HF 组合型四极杆 Orbitrap™ 质谱仪)的Thermo Scientific™ Vanquish™ Horizon Duo UHPLC 系统的重现性结果,在此显示了五个总离子流色谱图的重叠图。采用 Thermo Scientific™ SMART™ 消化试剂盒消化英利昔单抗。
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双LC应用 Vanquish Duo 系统:
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“该仪器在同时运行两种相同化学分离或者同时运行两种不同化学分离时,极大地提高了分析通量,使我们能够快速从同一样品中获取大量表征数据。”--Jonathan Bones 博士 国家生物加工研究和培训研究所(NIBRT)
Vanquish Duo 系统
无需额外的工作 - 自动梯度转换
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液相色谱中的大多数检测选项都需要通过某些物理化学性质来检测某一物质,例如用于紫外线吸收检测的发色团或用于质谱检测的离子化。电雾式检测技术可检测所有不同化学结构的非挥发性分析物,同时提供一致的响应、出色的灵敏度和较宽的线性范围。
可以整个***连续记录数据。
液相色谱类型
液相色谱按其分离机理,可分为四种类型--吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱、凝胶色谱法
离子交换色谱
离子交换色谱通常用离子交换树脂作为固定相。一般是样品离子与固定相离子进行可逆交换,由于各组分离子的交换能力不同,从而达到色谱的分离。
离子交换色谱法是新发展起来的一项现代分析技术,已***用于氨基酸、蛋白质的分析,也适合于某些无机离子(NO3-、SO42-、Cl-等无机阴离子和Na+、Ca2+、Mg2+、K+等无机阳离子)的分离和分析,具有十分重要的作用。
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高效液相色谱法介绍
基本原理
高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC),是在经典液相色谱法的基础上,于20世纪60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀。因为较小的填充颗粒具有高柱效,但会引起高阻力,需用高压输送流动相,故又称高压液相色谱。
使用高效液相色谱时,液体待检测物被注入色谱柱,通过压力在固定相中移动,由于被测物种不同物质与固定相的相互作用不同,不同的物质顺序离开色谱柱,通过检测器得到不同的峰信号,***通过分析比对这些信号来判断待测物所含有的物质。高效液相色谱作为一种重要的分析方法,***地应用于化学和生化分析中。高效液相色谱从原理上与经典的液相色谱没有本质的差别,它的特点是采用了高压输液泵、高灵敏度检测器和高效微粒固定相,适于分析高沸点不易挥发、分子量大、不同极性的有机化合物。
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