高效液相色谱分离原理
液-液分配
(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶（极性不同，避免固定液流失），有一个明显的分界面。当试样进入色谱柱，溶质在两相间进行分配。达到平衡时，服从于高效液相色谱计算公式：
式中，cs—溶质在固定相中浓度；cm—溶质在流动相中的浓度； Vs—固定相的体积；Vm—流动相的体积。LLPC与GPC有相似之处，即分离的顺序取决于K，K大的组分保留值大；但也有不同之处，GPC中，流动相对K影响不大，LLPC流动相对K影响较大。
a.正相液-液分配色谱法(Normal Phase liquid Chromatography): 流动相的极性小于固定液的极性。
b.反相液-液分配色谱法(Reverse Phase liquid Chromatography): 流动相的极性大于固定液的极性。
c.液-液分配色谱法的缺点：尽管流动相与固定相的极性要求完全不同，但固定液在流动相中仍有微量溶解；流动相通过色谱柱时的机械冲击力，会造成固定液流失。上世纪70年代末发展的化学键合固定相（见后），可克服上述缺点。
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Vanquish 系统谱写了**UHPLC的新篇章 该系统不论是单独使用还是与更新的质谱仪联用都具有更高的性能、生产率和易用性。其设计以色谱柱和用户为中心，系统耐压22,000 psi，整机兼具一体式系统的耐用性和模块化系统的灵活性，便于维修，是赛默飞所有知识和热情的结晶，能够满足色谱工作者对于**UHPLC的分析需求。值得一提的是，Vanquish系统的高度比原有的模块化系统降低了25%，从而更加方便亚洲人的操作。此外，Vanquish UHPLC 系统还是一套整合的、生物兼容的系统。新疆进口液相色谱系统哪家好使用智能软件向导简化您的工作流程。
赛默飞高效液相色谱业务副总裁兼总经理Fraser McLeod表示：“在整个生物制药的流程中，从药物研发到质控的批次放行，数据完整性对于决策是必不可少的。为快速获取可靠结果，灵敏度和通量非常关键。我们开发出的这套系统展示出在复杂分析应用时的**辨分离和重复性。”
• Vanquish Flex UHPLC系统采用独特设计，即便在高通量的情况下，仍可以保证分析物色谱峰拥有尖锐峰形，实现在较短时间内分析更多样品。该系统良好的稳定性和重复性为数据质量提供了可靠保障，确保能够分析大量的样品，以供质控分析比较。其重要特点如下：
• 新型四元梯度泵模块，设计稳健，性能良好，保证高通量的前提下依然可提供方法开发的灵活性。
• 泵比较大耐压 1000 bar，性能***，流速高达 8 mL/min，应用灵活，可实现**辨分离。
• 新型荧光检测器模块灵敏度高，与高灵敏度、宽线性范围的UV、DAD检测器和针对非挥发性化合物的电雾式检测器互为补充。
高效液相色谱相关术语
色谱峰(peak)——组分流经检测器时响应的连续信号产生的曲线。流出曲线上的突起部分。正常色谱峰近似于对称形正态分布曲线（高斯Gauss曲线）。不对称色谱峰有两种：
前延峰(leading peak)和拖尾峰(tailing peak)。前者少见。
峰底—基线上峰的起点至终点的距离。
峰高(peak height，h)—峰的比较高点至峰底的距离。
峰宽（peak width，W)—峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点间的距离。W=4σ
半峰宽（peak width at half-height，Wh/2)—峰高一半处的峰宽。Wh/2=2.355σ
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