分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量,这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。它是带状光谱,反映了分子中某些基团的信息。可以用标准光图谱再结合其它手段进行定性分析。紫外可见分光光度计主要特点:较低的杂散光。中国**紫外可见分光光度计比较
紫外可见分光光度计的主要类型:单光束分光光度计。单光束是指从光源今发出的光,经过单色器等—系列光学元件,通过吸收池,结尾照在检测器上时,始终为一束光。它只官一束单色光(光束只能交替通过参比溶液、样品溶液),一只比色皿,一只光电转换器。工作时,一条光路,先通过多比溶液,再通过试样溶液进行光强度的测旦。单光束分光光度计的特点是结构简单、价格低,主要适用于做定量分析,测量结果受电源的波动影响较大,容易给测量结果带来较大的误差。所以,它们在位灼上受到限制。一般来讲,要求较高的制药行业、质量检验行加等不适宜使用单光束紫外可见分光光度计。常见紫外可见分光光度计仪器紫外分光光度法是根据物质的吸收光谱,来研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。
紫外可见分光光度计的优点:1、紫外可见分光光度计,快速紧凑。即时分光光度测定,无需预热,可立刻进行全光谱扫描。节省工作台空间。采用氙闪光灯,没有活动部件,因此坚固耐用。直观界面和指导工作流程,可进行质量控制、水测试和颜色测量。2、简单的OnClick™操作。超大彩色触摸屏有着直观的OneClick™界面。所有用户都可以设置他们自己的主页面,点击一下就可以开始日常工作。3、准备就绪。仪器无需安装,即开即用。4、优化您的实验台面。紧凑的光学元件布局使得仪器有着小巧的外观。仪器可以单独操作无需使用电脑。
玻璃吸收池用于可见光区测定,石英吸收池用于紫外光区的测定。吸收池的规格以光程为标志。常用的吸收池规格有0.5cm、1.0cm、2.0cm、3.0cm、5.0cm等。光栅实现上就是一系列等宽、等距离的平行狭缝,它是利用光的衍射与干涉作用制成的。光栅作为色散元件具有不少独特的优点,光栅单色器的分辨率比棱镜单色器的分辨率高,可精确到0.2nm,而且可用的波长范围也比棱镜单色器的范围宽。所以,目前生产的紫外可见分光光度计大多采用光栅作为色散元件。吸收池是用于盛装待测液并决定待测溶液透光液层厚度的器皿,又称比色皿。吸收池一般为长方体,也有圆形或其它形状的。其底及两侧为毛玻璃,另两面为光学透光面。根据光学透光面的材质,吸收池又可分为玻璃吸收池和石英吸收池两种。怎么维护紫外可见分光光度计:如出现故障,应按光谱仪器说明书逐步检查,不能乱拧乱敲。
紫外-可见吸收光谱为什么有些化合物是有色的,而另一些化合物却没有?共轭与颜色有什么关系?我们必须对光谱中可见光部分和附近的不同波长处的光吸收进行精确测量。商业光谱仪可对光谱中近紫外和可见部分光吸收进行精确测量。可见光区域的光子能量为36-72kcal/mol,近紫外线区域(至200nm)的能量范围扩展至143kcal/mole。波长小于200nm的紫外线辐射难以处理,因此很少用作结构分析的常规工具。当一束光照射物质时,上述能量会激发分子电子至更高能量的轨道。下图显示了有机分子中发生的各种电子激发的示意图,其包含六个跃迁。通常,只有三个低能量跃迁是通过200至800nm光的能量实现的,也就是说,能够吸收200-800nm区域光的分子应具有π电子系统和具有未成对电子对的杂原子。这种吸光基团称为生色团。当样品分子暴露于具有与分子内可能的电子跃迁相匹配能量的光时,电子受光子激发从高的占据分子轨道(HOMO)跃迁到低的未占据分子轨道(LUMO),一些光能将被吸收,所产生的物质称为激发态物质。光谱仪记录吸收波长以及每个波长的吸收程度,所得光谱用吸光度(A)与波长的关系图表示。吸光度通常在0(无吸收)到2(99%吸收)的范围内。紫外光区通常用氢灯或氘灯,可见光区通常用钨灯或卤钨灯。生产紫外可见分光光度计代理
测量吸光度并不是测量透过吸收池的光强度,而是将光强度转换成电流进行测量,称为紫外分光光度计的检测器。中国**紫外可见分光光度计比较
购买紫外可见分光光度计需注意几点:1、稳定性。稳定性是使用者较关注的指标之一。仪器的宗旨就是稳定可靠,不稳定更谈不上可靠了。2、噪声。噪声也是仪器的重要指标之一。它表征仪器的做稀溶液的能力。这个指标也是越小越好。3、波长的准确度和重复性。仪器的每个值都是在一定的波长下测得的,如果所示的波长和实际波长偏差万里,那么测出的值和真值的吻合度从何谈起呢?可见这个指标的重要性。总之,这几个指标都是相互分开又相互关联的,每个指标对仪器的使用都有比较大影响。希望大家在选购紫外、可见分光光度计时,多做比较,多做判断,切实找到一个稳定可靠的好帮手。我们选择时需要根据自己实验室的需要,主要考虑光学构造和光源、检测方法、样品类型和数据处理等因素。中国**紫外可见分光光度计比较