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鼠尾胶原蛋白的提取方法：1.一种生物医用鼠尾胶原蛋白的提取方法，其特征在于，包括以下步骤:(1)将无组织纤维、脂肪和多糖残留的鼠尾腱，真空冷冻干燥备用；(2)冻干鼠尾腱经低温冻干粉碎至200〜400目；(3)在冰水浴中将粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶胀，鼠尾腱与醋酸的固液比为I克:10mL〜I克:120mL，期间不断搅拌，防止冻结成块，得到胶原溶胀液；(4)称取胃蛋白酶加入到胶原溶胀液中，鼠尾腱与蛋白酶质量比为50:I〜100:1，在4°C，48〜74小时酶解，期间间歇性搅拌。鼠尾型胶原构建与人类自体骨组织化学成分和分子结构相近的仿生骨材料。青岛鼠尾胶原推荐厂家

鼠尾胶原，10mg包装，配制方法如下：1.配0.1M的乙酸溶液100ml。即取575ul冰乙酸加超纯水至100ml，容量瓶配制比较准确。2.用吸管吸取10ml刚配好的0.1M乙酸溶液（不要用*加，吸十次不如加一次z准确），加入盛胶原的瓶中，轻轻颠倒，不要震荡，蛋白容易起泡。几分钟即可，蛋白质非常好溶解。3.将胶原溶液移入事先压好的玻璃瓶中，比青霉素瓶大点的就行。用*在瓶底加1ml氯仿，打到一档就行，避免加入气泡。然后4度过夜除菌。4.第二天将上层胶原溶液分装进EP管中。用封口膜封口，4度保存，勿冷冻。芜湖鼠尾胶原服务电话整个操作请于冰上进行，因室温下鼠尾胶原I可迅速成胶。

鼠尾胶原醋酸溶解：1．将鼠尾胶原加入到0.1M的醋酸中，制备成浓度为0.1%的溶液。在室温中搅拌1-3小时直到完全溶解。2．建议将溶液转移到拧口的玻璃瓶中，并小心的在瓶底铺上一层氯仿。氯仿的量约为胶原溶液的10%。不要晃动或搅拌。在2-8度中放置过夜。在无菌条件下转移上层的胶原溶液。我们不建议用过滤的方法无菌化。已经发现该方法会导致丢失蛋白。3．稀释一定数量的胶原溶液。4．按照6-10ug/cm2的浓度包被培养瓶。在室温或37度结合数小时或者2-8度过夜。5．从包被表面除去多余的液体。过夜干燥。如果胶原溶液不是无菌的，这时候可以在无菌细胞操作室中暴光在紫外线下过夜消毒。在接种细胞前用无菌的水漂洗。

胶原蛋白的提取方法：1.碱法提取：碱法提取胶原蛋白常用的处理剂为石灰、氢氧化钠、碳酸钠等。如Holzer等[5]采用1%～1.5%石灰水浸泡的方法提取胶原蛋白。由于它容易造成肽键水解，因此得到的水解产物分子量比较低。所以，若想保留胶原的三股螺旋结构，此法不可取。2.盐法提取：盐法提取胶原蛋白所用的中性盐有盐酸-三羟甲基胺基甲烷(Tris-HCl)、氯化钠、柠檬酸盐等。在中性条件下，当盐的浓度达到一定量时，胶原溶解。并且可采用不同浓度的氯化钠对提取的胶原蛋白进行盐析处理，可以沉淀出不同类型的胶原蛋白。建立利用自制的鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法。

详细步骤如下：1.75％酒精浸泡大鼠尾巴30min；2.将尾巴剪开、去掉皮毛，并剪成小段（3cm左右），抽出银色的尾键；3.把剪碎的尾键置于150ml，0.1％消过毒的醋酸中，4℃放置，并不时振荡；4.48h后取上清，4000转离心30min后，取上清；5.分装上清（鼠尾胶）4度（或-20度）保存。有时可继续向4。中沉淀中加入10－20ml醋酸，重复以上步骤，以制备更多的鼠尾胶。在使用时，先将冰存的胶原液在室温下解冻，再按以下步骤包被培养器皿：1）用吸管吸取胶原液，在无菌的培养器皿的生长面内壁上均匀地涂上薄薄的一层胶原溶液。2）若包被的是培养瓶，可向培养瓶通入氨气或用浸有氨水的棉球封口片刻。让氨气充入瓶内后，即可旋紧瓶盖或塞紧瓶塞。若为培养皿或板的话，可将培养皿或板放在已消毒的饭盒内，将浸有氨水的棉球放入饭盒内，盖紧饭盒盖，四周用封口胶封死。利用鼠尾胶原可以构建类似物，该模型是进行皮肤部位型培养和制作复合皮的关键与基础。徐州珠海鼠尾胶原

胶原蛋白是脊椎动物和无脊椎动物支持结构的主要组成。青岛鼠尾胶原推荐厂家

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