含细胞三维胶原凝胶的制备(以配制1mg/mL三维胶1mL为例)准备好悬浮于培养液的细胞,并放置于冰浴中。将200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反过来把12μL0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入23μL10×PBS或10×培养液,混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要测定pH值)。加入760μL的细胞悬浮液,混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温放置20min待胶凝固后,加入适当体积的细胞培养液,转移到培养箱中培养。本品在室温下pH中性时可迅速成胶,在操作过程中要尽量保持低温。保存条件4℃保存,切勿冻存,有效期一年。胶原蛋白是脊椎动物和无脊椎动物支持结构的主要组成。郑州鼠尾胶原厂家直销
鼠尾胶原:1实验制备:实验设备及材料:大鼠尾巴、剪刀、镊子、止血钳、弯头吸管、平皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、天平、生理盐水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、盖玻片、培养瓶、钻石笔、鼠尾胶原。实验内容:1、制备鼠尾胶原(两个同学一组操作)。2、切割小玻片。3、利用鼠尾胶原将小玻片固定于培养瓶内。实验步骤:制备鼠尾胶原:1、取大鼠尾巴洗净,75%酒精浸泡5分钟;2、手持尾巴,用止血钳夹住鼠尾的较高,折断尾骨后拉出尾腱;3、将尾腱剪断置于平皿中,生理盐水浸泡;4、重复步骤2、3,直至尾腱量够用;5、吸去生理盐水,将尾腱称重(0.5-1克)。郑州鼠尾胶原厂家细胞培养器皿的表面包被以包被浓度为2μg/cm2为例。
鼠尾胶原是一种天然培养基,它具有促进体外培养细胞(特别是上皮细胞)贴壁的作用,同时它也是一种天然的黏附剂,当我们需要在培养瓶或培养皿内放置小玻片,制备细胞爬片时,可在瓶底涂一层胶原,再放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培养瓶之中。通过本实验可掌握鼠尾胶原的制备方法,以及如何切割小玻片,并利用鼠尾胶原将其固定于培养瓶内。实验设备及材料:大鼠尾巴、剪刀、镊子、止血钳、弯头吸管、平皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、天平、生理盐水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、盖玻片、培养瓶、钻石笔、鼠尾胶原。实验内容:1、制备鼠尾胶原。2、切割小玻片。3、利用鼠尾胶原将小玻片固定于培养瓶内。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。
鼠尾胶原备用胶凝程序:1)在冰上放置以下物品:胶原蛋白I、无菌10×PBS、无菌蒸馏水、无菌1MNaOH。2)确定胶原蛋白I待使用溶液所需的较终浓度的体积。3)在冰上放置无菌管以收存胶原蛋白I。4)在无菌条件下执行以下步骤。4.1加入10×PBS(终体积/10)mL4.2计算要使用的胶原蛋白I的体积(不要添加到管中直到步骤4.6为止)终体积x终胶原蛋白I浓度(mg/mL)。4.3向10×PBS溶液中加入(要加入的胶原体积×0.023)mL的无菌冰冷1MNaOH。4.4向4.3溶液中加入下述体积的无菌冰冷蒸馏水:添加蒸馏水体积=V(终)—V(胶原蛋白)—V(10×PBS)—V(1MNaOH)4.5混合管中的物质并放入冰中。4.6加入胶原蛋白I并计算体积,混匀,冰上备用。5)胶原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小时。6)使用时,无菌条件下将溶液加入到细胞培养装置中37°C凝胶30min。建立利用自制的鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法。
一种基于鼠尾胶原蛋白:1.一种基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料,为鼠尾胶原蛋白、聚乙烯醇、壳聚糖、水制成的冻干止血材料,各材料重量配比为鼠尾胶原蛋白聚乙烯醇壳聚糖为1-10%0.2-5%0.2-2%,余量为水。2.根据权利要求1所述的基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料,其特征在于冻干止血材料中,各材料重量配比为鼠尾胶原蛋白聚乙烯醇壳聚糖为5%2%1%,余量的水。3.根据权利要求1或2所述的基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料,其特征在于鼠尾胶原蛋白来源于各品系SFP级大鼠鼠尾。碱法提取胶原蛋白常用的处理剂为石灰、氢氧化钠、碳酸钠等。南京正规鼠尾胶原厂家供应
注意事项:在室温下pH 中性时可迅速成胶,在操作过程中要 尽量保持低温。郑州鼠尾胶原厂家直销
鼠尾胶原备用胶凝程序:1)在冰上放置以下物品:胶原蛋白I、无菌10×PBS、无菌蒸馏水、无菌1MNaOH。2)确定胶原蛋白I待使用溶液所需的较终浓度的体积。3)在冰上放置无菌管以收存胶原蛋白I。4)在无菌条件下执行以下步骤。4.1加入10×PBS(终体积/10)mL4.2计算要使用的胶原蛋白I的体积(不要添加到管中直到步骤4.6为止)终体积x终胶原蛋白I浓度(mg/mL)。4.3向10×PBS溶液中加入(要加入的胶原体积×0.023)mL的无菌冰冷1MNaOH。4.4向4.3溶液中加入下述体积的无菌冰冷蒸馏水:添加蒸馏水体积=V(终)—V(胶原蛋白)—V(10×PBS)—V(1MNaOH)4.5混合管中的物质并放入冰中。4.6加入胶原蛋白I并计算体积,混匀,冰上备用。5)胶原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小时。6)使用时,无菌条件下将溶液加入到细胞培养装置中37°C凝胶30min。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。郑州鼠尾胶原厂家直销
鼠尾胶原:含细胞三维胶原凝胶的制备(以配制1mg/mL三维胶1mL为例)准备好悬浮于培养液的细胞,并放置于冰浴中。将200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反过来把12μL0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入23μL10×PBS或10×培养液,混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要测定pH值)。加入760μL的细胞悬浮液,混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温放置20min待胶凝固后,加入适当体积的细胞培养液,转移到培养箱中培养。本品在室温下pH中性...