朝阳区胎牛血清培养基

2.取血方式不同胎牛血清：母牛怀孕3-8个月时，采用剖腹心脏密闭穿刺取血新生牛血清、小牛血清、供体牛血清：分别是取自新生牛（小牛）、成牛的血3.血清成分不同胎牛血清还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分比较少；促细胞生长因子、促附因子、及其他活性物质等组分也不同于其他几类血清4.用途不同某些细胞的培养必须使用胎牛血清才行，如：干细胞、淋巴细胞、神经细胞、星状胶质细胞等；而有些细胞需要小牛血清就可以，如：肿瘤细胞等。使用浓度也不同，一般在10%-15%，有特殊要求的浓度在20%给培养液供应出色的缓冲系统。朝阳区胎牛血清培养基

用于免疫的动物作免疫用的动物有哺乳类和禽类，主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等，实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量，如一般制备抗r-免疫球蛋白抗血清，多用家兔和山羊，因动物反应良好，而且能够提供足够数量的血清，用于免疫的动物应适龄，健壮，无感染性疾患，比较好为///雄性，此外还需十分注意动物的饲养，以消除动物的个体差异以及在免疫过程中死亡的影响。若用兔，最好用纯种新西兰兔，一组三只，兔的体重以2~3kg为宜。二、免疫途径免疫途径有多种多样，如静脉内、腹腔内、肌肉内、皮内、皮下、淋巴结内注射等，一般常用皮下或背部多点皮内注射，每点注射0.1ml左右。途径的选择决定于抗原的生物学特性和理化特性，如、酶、等生物学活性抗原，一般不宜采用静脉注射。南京猪血清购买真正的胎牛血清凝血功能差，红细胞容易破裂，一般表现出微红色或橘红色。

将血清从冷冻箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室温下使之全融。但必须注意的是，融解过程中必须规则地摇晃均匀。如果在37℃或更高的温度解冻血清，血清中会出现沉淀。此沉淀可能包括磷酸钙结晶，但不改变血清的性能，同样血清热灭活也会导致沉淀的形成。浑浊和沉淀所有的血清可能保留一些纤维蛋白原。某些外部因素可能引发纤维蛋白原转变为纤维蛋白，导致血清解冻后可能会观察到絮状物或混浊。这些物质的存在不会改变血清的性能。如果想去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装到无菌离心管中，以低速离心1~2min，上清液即可直接加入到培养基内使用。注意：不要以过滤的方式去除这些絮状沉淀物，因为这可能阻塞滤膜。

血清，指血液凝固后，在血浆中除去纤维蛋白原及某些凝血因子后分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和生长因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。主要成分血清是由血浆去除纤维蛋白原而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清是血浆中不含纤维蛋白原的胶状液体,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用。它主要由水和各种化学成分组成,这些化学成分包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,总胆固醇,谷丙转氨酶等。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。血清中供给了适量且份额适中的各式各样的激从来确保动物细胞离体后的正常代谢。

抗血清的采集与保存家兔是很常用以产生抗体的动物，因此这里主要讨论兔血的收集。羊等较大动物以颈静脉、动脉取血，鼠等小动物取血可参阅有关资料。取兔血有两种方法，一是耳缘静脉或耳动脉放血，一是颈动脉入血，也可心脏采集血。取动脉或静脉放血时，将免放入一个特造的木匣或笼内，耳露于箱(笼) 外，也可由另一人捉住兔身。剪去耳缘的毛，用少许二甲苯涂抹耳廓，30s后，耳血管扩张、充血。用手轻拉耳尖，以单面剃须刀或尖的手术刀片,快速切开动脉或静脉，血液即流出，每次可收集30~40ml。然后用棉球压迫止血，凝血后洗去二甲苯。二星期后，可在另一耳放血。此法可反复多次放血。颈动脉放血时，将免仰卧，固定于兔台，剪去颈部的毛，切开皮肤，暴露颈动脉，插管，放血。放血过程中要严格按无菌要求进行。收集的血液置于室温下1h左右，凝固后，置4°C下，过夜 (切勿冰冻) 析出血清，离心，4000rpm，10min。在无菌条件，吸出血清，分装 (0.05~0.2ml) ，贮于-40°C以下冰箱，或冻干后贮存于4。C冰箱保存。您只需把标本寄过来，我们为您节省时间，帮您出结果，原始数据，分析数据均可提供。青岛新生牛血清价格

血清长时间储存在2-8℃时。朝阳区胎牛血清培养基

配制方法:按比例将羊毛脂与石蜡油置容器内，用超声波使之混匀，高压灭菌，置4°C下保存备用。免疫前取等容积完全或不完全佐剂与免疫原溶液混合，用振荡器混匀成乳状，也可以在免疫前取需要量佐剂置乳钵中研磨，均匀后再边磨边滴加入等容积抗原液其中加卡介苗3~4mg/ml或不加加完后再继续研磨成乳剂，润十水水上10min内完全不扩散为止。为避免损失抗原，亦可用一注射器装抗原液，另一注射器装佐剂，二者以聚乙烯塑料管连接，然后二者来回反复抽吸，约数十分钟后即能完全乳化。检查合格后即以其中一注射器作注射用。免疫方法抗原剂量，头次剂量为300~500ug，加强免疫的剂量约为头次剂量为1/4左右。每2~3周加强免疫一次。加强免疫时用不完全佐剂，头次免疫时皮下注射百日咳疫苗0.5ml,加强免疫时不必注射百日咳疫苗。在第2次加强免疫后2周，从耳缘静脉取2~3ml血，制备血清，检测抗体效价。如未达到预期效价，需再进行加强免疫，直到满意时为止。当抗体效价达到预期水平时，即可放血制备抗血清。朝阳区胎牛血清培养基

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